转化生长因子β1在肺癌中的表达和意义

第２５卷第５期　川北医学院学报　ＶｏＩｌ　２５．Ｎｏ．５　２０１０年ｌＯ月　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＮＯＲＴＨ　ＳＩＣＨＵＡＮ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＣＯＬＬＥＧＥ　Ｏｃｔ・２０１０　４０３　．｝　转化生长因子Ｉ３　１在肺癌中的表达和意义　何欣蓉，刘　馨，黄一凡　（川北医学院附属医院病理科，四川南充６３７０００）　【摘要】目的：研究肺癌组织中ＴＧＦ一１３１的表达特点，探讨ＴＧＦ一１３１蛋白与肺癌的组织类型、分化程度和淋巴结转移的关　系。方法：选取７７例肺癌标本和２Ｏ例肺良性病变的组织，通过常规石蜡包埋行免疫组织化学染色，检测ＴＧＦ一１３１蛋白表达。　结果：肺癌组和对照组ＴＧＦ一８ｌ蛋白表达的阳性率分别为４４．２％和１５％，两组间差异具有高度显著性（Ｐ＜０．０５）。　ＴＧＦ一８１蛋白表达在肺癌不同病理类型即鳞癌和腺癌中，差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。在高分化、中分化和低分化肺癌之间比　较，ＴＧＦ—ｐ１表达阳性率差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。ＴＧＦ一８１在有无淋巴结转移中差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论：肺癌组　织中存在ＴＧＦ一１３１蛋白的高表达；ＴＧＦ一１３１蛋白的高表达与肺癌组织类型无关，而与分化程度和淋巴结转移有密切关系。因　此，ＴＧＦ一１３１的表达与肺癌发生发展的生物学行为和预后可能有关。　【关键词】肺癌；ＴＧＦ—Ｂ１；免疫组织化学　【文章编号】１００５—３６９７（２０１０）０５－０４０３－０３【中图分类号】Ｒ７３４．３；Ｒ３９２．３【文献标识码】Ａ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＴＧＦ—Ｉ３｝１　ｉｎ　Ｌｕｎｇ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｔｉｓｓｕｅ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｓｉｇｎｉｉｆ－　ＣａｎＣｅ　ＨＥ　Ｘｉｎ—ｒｏｎｇ，ＬＩＵ　Ｘｉｎ，ＨＵＡＮＧ　Ｙｉ—ｆａｎ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，ｔ　ｅ　Ｆｉｒｓｔ　Ａｆｉｌｆｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｆ　ｏＮｏｒｔｈ　Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｎａｎｃｈｏｎｇ，Ｓｉｃｈｕａｎ　６３７００７）　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｅｘａｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＴＧＦ一１３１　ｉｎ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　ｔｉｓｓｕｅ　ａｎｄ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓ—　ｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ＴＧＦ一１３１　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　７７　ｈｕｍａｎ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ａｎｄ　２０　ｂｅｎｉｇｎ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：　ＴＧＦ一１３１　ｉｍｍｕｎｏｒｅａｅｔｉｖｉｔｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｆｒｏｍ１５％ｉｎ　ｂｅｎｉｇｎ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｌｅｓｉｏｎ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｔｏ　４４．２％ｉｎ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｆ　Ｐ＜　０．０５）．Ｉｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ＴＧＦ一１３　１　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｄｅｇｒｅｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｃａｎｃｅｒ　（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ　ＴＧＦ一３１１　ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｗｉｔｈ　ｌｙｍｐｈ　ｎｏｄｅ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ　ｏｆ　ｌｕｎｇ　ｅａｎｃｅｒ（ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ　ｏｖｅｒ　ｅｘ—　ｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｒａｔｅｓ　ｏｆＴＧＦ一１３１　ｉｎ　ａｄｅｎｏｅａｒｃｉｎｏｍａ　ａｎｄ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｗｅｒｅ　ｎｏｔ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ（Ｐ＞０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ：Ａｎ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ＴＧＦ一１３１　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｓ　ｓｅｅｎ　ｉｎ　ｌｕｎｇ　ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．ＴＧＦ一１３１　ｍａｙ　ｂｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｂｉｏｌｏｇｉ—　ｃａｌ　ｂｅｈａｖｉｏｒｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ．　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】Ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ；Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ一１３１；Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　转化生长因子一１３１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ一　肺癌及肺良性疾病组织中的表达情况，探讨其在肺　癌发生发展过程中的作用。　１材料与方法　１．１材料　３１１，ＴＧＦ—Ｂ１）为具有多功能的细胞因子，能促进细　胞外基质的形成，抑制免疫功能，调节细胞的生长分　化，并对多种肿瘤细胞具有抑制增殖及激活凋亡作　用。而近年已经在胆管癌，胃癌，胰腺癌，结直肠癌　等多种恶性肿瘤中发现ＴＧＦ一１３１的表达异常¨“　。　本文应用免疫组织化学技术检测ＴＧＦ—Ｂｌ蛋白在　作者简介：　何欣蓉（１９７７一），女，四川南部人，讲师，硕士，　主要从事肿瘤病理学研究。　通讯作者：　黄一凡，Ｅｍａｉｌ：ｈｅｘｒ９９８＠ｙａｈｏｏ．ｅｏｍ．ｃｎ　　收稿日期：　２ＯｌＯ—Ｏ７—２ｌ１．１．１病例：选取２００７年至２００８年川北医学院第　一附属医院例肺癌根治术标本７７例为实验组，另选　取２０例良性肺疾病组织为对照组。全部病例均经　病理诊断证实。其中男性５８例，女性ｌ９例。年龄　为３９—７３岁，平均年龄６４．７岁。组织学分类腺癌　ｌ６例，鳞癌５４例，腺鳞癌２例，肉瘤样癌３例，小细　第２５卷４０４　第５期　川北医学院学报　Ｖｏ１．２５，Ｎｏ．５　Ｏｃｔ．２０１０　２０１０年１０月　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＮＯＲＴＨ　ＳＩＣＨＵＡＮ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＣＯＬＬＥＧＥ　胞神经内分泌癌２例。高分化１０例，中分化１４例，　低分化４６例。其中有淋巴转移４２例，无转移２８　例。同时收集肺大疱１０例，肺结核６例，肺脓肿４　例（阳性２例，阳性率为１４．３％），低分化４６例（阳　性２８例，阳性率为６０．９％），低分化组的阳性率与　高、中分化之间有显著性差异（Ｐ＜０．０５）；淋巴结无　转移的２８例（阳性７例，阳性率为２５％），淋巴结有　转移４２例（阳性２４例，阳性率为５７．１％），两者之　间ＴＧＦ—Ｂ１表达差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５），见　表１。　例，共计２０例作为对照。　１．１．２试剂：兔抗人ＴＧＦ一［３１多克隆抗体购自　Ｓａｎｔａ　ｃｒｕｚ公司，使用浓度为１：１００。二抗、即用型二　步法检测试剂盒ＰＶ一９０００和ＤＡＢ染色试剂盒购白　北京中山公司。　１．２方法：以ＴＧＦ一［３１蛋白表达为阳性的乳腺癌　组织为阳性对照，ＰＢＳ代替一抗为阴性对照，采用　ｓＰ法进行染色。具体步骤如下：石蜡标本行４ｌｘｍ　厚连续切片，脱蜡，对切片进行预处理。３％过氧化　氢去离子水孵育ｌ０分钟，阻断内源性过氧化物酶。　ＰＢＳ冲洗，２分钟×３次。滴加一抗，４￣Ｃ湿盒过夜。　ＰＢＳ冲洗３次，２分钟×３次。滴加ＰＶ一９０００工作　液，３７℃湿盒内孵育３０分钟，ＰＢＳ冲洗，２分钟×３　次。选用ＤＡＢ显色，自来水充分冲洗，复染，脱水，　透明，封片。　１．３结果判断：ＤＡＢ显色法阳性染色为棕黄色颗　粒，ＴＧＦ一［３１蛋白主要表达于细胞质中，细胞核中　图ｌ　ＴＧＦ一［３１在肺鳞癌中的阳性表达ＳＰ￣箭头所示为胞浆阳性信号　ｘ４００　偶见散在阳性物质表达。参照１９９６年５月北京“全　国免疫组织化学技术与诊断标准化专题研讨会”标　准　，每张切片随机观察５个高倍视野（×４００），计　数每个视野中染色阳性细胞数，阳性细胞＜２０％为　（一），＞２０％为（＋）。　１．４统计学方法：应用ＳＰＳＳ１１．５统计软件进行卡　方检验。Ｐ＜０．０５为统计学意义。　２　结　果　２．１肺癌中ＴＧＦ—Ｂ１蛋白的表达：本组７７例肺癌　标本中，ＴＧＦ一［３１的阳性率分为４４．２％，明显高于　图２　ＴＧＦ—Ｂ１在肺腺癌中的阳性表达ＳＰ　ｂ￣箭头所示为胞浆阳性信号　ｘ４００　良性肺疾病组（１５％），两者之间存在显著性差异　（Ｐ＜０．０５），见图ｌ、图２。　２．２　ＴＧＦ一［３１蛋白表达与肺癌癌主要病理特征的　３讨论　关系：７７例肺癌标本中，腺癌１６例，鳞癌５４例，腺　鳞癌２例，小细胞神经内分泌癌２例，肉瘤样癌３　例。因腺鳞癌、小细胞神经内分泌癌、肉瘤样癌例数　过少，没有统计学意义。腺癌中有９例ＴＧＦ一［３１阳　性，鳞癌中有２２例阳性，腺癌的阳性率（５６．２５％）　和鳞癌的ＴＧＦ一［３１阳性率（４０．７４％）之间相互比　ＴＧＦ—Ｂ１是ＴＧＦ一１３家族的主要成员，广泛参　与细胞的分化、增殖及凋亡等多种病理生理过程：在　不同的器官组织中有不同的功能。在胚胎时期，　ＴＧＦ—Ｂ１的表达比较高，与正常肺的形态发生密切　相关，而在成熟肺的支气管上皮细胞中表达水平低。　较，差异无显著性意义（　＞０．０５）；组织学分级高分　化ｌ０例（其中阳性１例，阳性率为１０％），中分化ｌ４　现许多研究表明，在多种肿瘤细胞中ＴＧＦ一［３１水平　明显增高，并与肿瘤的生长、浸润和转移关系密切。　第２５卷第５期　川　北医学院学报　Ｖｏ１．２５．ＮＯ．５　２０１０年１０月　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＮＯＲＴＨ　ＳＩＣＨＵＡＮ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＣＯＬＬＥＧＥ　Ｏｃｔ・２０１０　４０５　表１　ＴＧＦ—Ｂｌ蛋白表达与肺癌主要临床　病理特征的关系　所表数据有显著性差异（ｘ　检验，ｐ＜０．０５）。　ＴＧＦ—Ｂ１信号转导机制非常复杂，目前研究表　明其主要介导两个效应相反的信号转导通路：Ｓｍａｄ　和ＭＡＰＫ通路，经典的ＭＡＰＫ通路是ＥＲＫ通路。　ＴＧＦ一［３１／Ｓｍａｄ通路被激活后，对上皮细胞而言，起　抑制增殖作用。而ＴＧＦ一１３１／ＥＲＫ通路效应是促使　细胞增生。因此在肿瘤发生发展过程中，高表达的　ＴＧＦ—ｐ１可能激活ＥＲＫ通路。Ｉｇｌｅｓｉａｓ　等研究证　实，ＴＧＦ一１３１能激活Ｒａｓ／ＥＲＫ通路，使肿瘤细胞表　型从高分化向低分化过渡。　由于ＴＧＦ一１３１作用的双向性，其与肿瘤生物学　行为间的关系，文献报道不一。朱红　等通过对　ＴＧＦ—ｐ１ｍＲＮＡ水平的检测表明，ＴＧＦ一１３１在肺腺　癌组织中的表达明显高于非肿瘤肺组织，并且随着　肿瘤分期的升高其表达也增加，淋巴结转移组的　ＴＧＦ—Ｂｌ表达水平高于无转移组。马进安　等研　究表明ＴＧＦ一１３１的阳性表达在腺癌中的表达高于　鳞癌和小细胞癌，与淋巴结转移和临床分期明显相　关。ＨａｓｅｇａＷａ　等研究中有淋巴结转移的非小细　胞肺癌患者，其ＴＧＦ—Ｂ１蛋白水平显著高于无淋巴　结转移的患者。　我们从蛋白水平检测了ＴＧＦ—Ｂ１，结果表明肺　癌组织中ＴＧＦ—Ｂ１表达水平明显高于良性疾病组　织，ＴＧＦ一１３１蛋白的高表达与临床常见的肺癌组织　类型无关，而与组织分化及淋巴结转移密切相关，分　化越低的阳性率越高，有淋巴结转移的肺癌标本中　ＴＧＦ一１３１蛋白的阳性率高于无淋巴结转移的。由　此提示ＴＧＦ一１３１可能与肺癌的发生及进展有关，有　可能作为判断人肺癌细胞恶性程度的指标之一。　肺癌的发生发展是一个极其复杂的过程，涉及　诸多因素，但可以看出，ＴＧＦ一１３１在其中起着非常　重要的作用。至于高表达的ＴＧＦ一８１在细胞恶性　转化中所起的作用还有待于进一步研究。　【参考文献】　［１］朱卫东，汤恢焕，欧阳迪平，等．Ｓｍａｄ４蛋白和ＴＧＦ—ｔ３１及　ＴＩ３ＲＩＩ在胆管癌中表达的研究［Ｊ］．中国普通外科杂志，２００４，　１３（７）：５０２—５０５　［２］　许春进，刘华，陈玉龙，等．转化生长因子Ｂ１基因和细胞外　信号调节激酶在胃癌中的表达和意义［Ｊ］．胃肠病学和肝病学　杂志，２００２，１１（３）：２４５—２４８　［３］　董春燕，刘铁夫，李兆申，等．ＴＧＦ．１３１和ＥＲＫ／ＥＲＫ２的相互作　用及对人胰腺癌细胞生长的影响［Ｊ］．第二军医大学学报，　２００５，２６（３）：３１４—３１８　［４］Ｔｓｕｓｈｉｍａ　Ｈ，Ｋａｗａｔａ　Ｓ．Ｈｉｇｈ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｂｅｔａ一１　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ：ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ［Ｊ］．１９９６，１１０（２）：３７５—３８２　［５］　中华病理学会杂志编辑委员会．《全国免疫组织化学技术与诊　断标准化专题研讨会》会议纪要［Ｊ］．中华病理学杂志，１９９６，　２５（６）：３２６—３２８　［６］Ｉｇｌｅｓｉａｓ　Ｍ，Ｆｒｏｎｔｅｌｏ　Ｐ，Ｇａｍａｌｌｏ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｂｌｏｃｋａｄｅ　ｏｆ　ｓｍａｄ－４　ｉｎ　ｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄ　ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｓ　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　ａ　Ｒａｓ　ｏｎｃｏｇｅｎｅ　ｌｅａｄｓ　ｔｏ　ｈｙ—　ｐｅｒａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｒａｓ－－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　Ｅｒｋ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｐａｔｈｗａｙ　ａｓｓｏｃｉａｔ－－　ｅｄ　ｗｉｔｌｌ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｔｏ　ｕｎｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ　ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ［Ｊ］．Ｏｎｅｏｇｅｎｅ，　２０００，１９（３６）：４１３４—４１４５　［７］　朱红，项锋钢．ＴＧＦ－Ｂ１　ｍＲＮＡ在肺腺癌组织中的表达［Ｊ］．　青岛大学医学院学报，２００７，４３（５）：４１９—４２３　［８］　马进安，张连部．肺癌转化生长因子Ｂｌ的表达与预后的相关　性研究［Ｊ］．肿瘤研究与临床，２０００，１２（２）：７５—７７　［９］Ｈａｓｅｇａｗａ　Ｙ，Ｔａｋａｎａｓｈｉ　Ｓ，Ｋａｎｅｈｉｒａ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ—Ｂ１　ｌｅｖｅｌ　ｃｏｒｅｌａｔｅｓ　ｗｉｔｈ　ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｔｕｍｏｒ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｄ　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈ　ｎｏｎｓｍａｌｌ　ｃｅｌｌ　ｌｕｎｇ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．Ｃａｎｃ－　ｅｒ，２００１，９１（５）：９６４　（学术编辑：文彬）