【基因工程】：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到
载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA），转入微生物，植物或动物细
胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。
【限制性核酸内切酶】:是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列（4-8bp）,
并由此处切割DNA双链结构的核酸内切酶。
【识别序列】：限制性核酸内切酶在双链DNA上能够识别的特殊核苷酸序列被称为识别序
列。
【酶切位点】：DNA在限制性核酸内切酶的作用下，使多聚核苷酸链上磷酸二酯键点开的
位置被称为切割位点。
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【粘性末端】：是指含有几个核苷酸单链的末端，可通过这种末端的碱基互补，使不同的
DNA片段发生退火。
【平末端】：限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时产生的平齐的末端。
【同裂酶】：一些来源不同的但能识别位点的序列相同的限制性内切酶。
【同尾酶】：一些来源不同且识别序列不同，但能产生相同粘性末端的限制性内切酶。
【DNA的甲基化程度】:DNA被甲基化酶甲基化，识别序列中的核苷酸一旦被甲基化，就会影
响内切酶的切割效率。
【位点偏爱】：对不同位置的同一个识别序列表现出不同的切割效率的现象
【内切酶的star活性】：某种限制性核酸内切酶在特定条件下，可在不是原来的识别序列
处切割DNA，这种现象称为star活性。
【末端转移酶】：一种能将脱氧核苷酸三磷酸（dNTP）加到某DNA片段上3’-OH基上的酶。
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【DNA连接酶】：借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA双链,DNA片段紧靠在一起
的3’-OH末端与5’-PO4末端之间形成磷酸二酯键，使两末端连接
【DNA聚合酶】：以DNA为复制模板，使DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。
【反转录酶】：与DNA聚合酶作用方式相似：5’→3’聚合，模版是mRNA,合成DNA
【碱性磷酸酶】：能够催化核酸分子脱掉5’磷酸基团，从而使DNA（或RNA)片段的5’-P
末端转换成5’-OH末端。
【基因克隆载体】：在基因工程操作中，把能携带外源DNA进入受体细胞的DNA分子叫载体。
【质粒】：独立于染色体外的能自主复制的双链闭合环状DNA分子，存在于细菌、霉菌、
蓝藻、酵母等细胞中。
【质粒的不亲和性】：指在无选择压力的情况下，两种亲缘关系密切的不同质粒不能够在
同一宿主细胞系中稳定地共存的现象。（机制至今没有圆满的解释）
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【多克隆位点】：多聚接头，由多种常用限制性核酸内切酶单一识别序列组成。
【基因文库】 ： 某种生物的基因组的全部遗传性息通过克隆载体贮存在一个受体菌的群体
之中，这个群体即为这种生物的基因文库。
【cDNA文库】：利用某种生物的总RNA合成cDNA，再将这些cDNA与载体连接，转入细菌细
胞进行繁殖、保存和扩增，称cDNA文库。
【引物】：是PCR过程中引导互补链DNA合成的一种脱氧核苷酸寡聚体，其3’端必须具有
游离的-OH基团。
【回文序列】：双链DNA中的一段倒置重复序列，当该序列的双链被打开后，可形成发夹
结构。
【简并引物】：一类由多种核苷酸组成的混合物，彼此之间仅有一个或数个核苷酸的差异。
【受体细胞】：从实验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定性维持的细胞；
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从实验目的上讲是有应用价值和理论研究价值的细胞。
【报告基因】：（书：载体携带的选择标记性基因）
一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是一个其表达产物非常容易被检测的基因。
【SD序列】：在细菌mRNA起始密码子AUG上游10个碱基左右处，有一段富含嘌呤的碱基
序列，能与细菌16SrRNA3’端识别，帮助从起始AUG处开始翻译。
【融合蛋白】：将外源蛋白基因与受体菌自身蛋白基因重组在一起，但不改变两个基因阅
读框，以这种方式表达的蛋白称为融合蛋白。360
【包涵体】：在一定条件下，外源基因的表达产物在大肠杆菌中积累并致密地聚集在一起
形成无膜的裸露结构，这种结构即为包含体。
【分泌蛋白】：指外源基因的表达产物通过运输或分泌的方式穿过细胞的外膜进入培养基
中。
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【目的基因沉默】：外源基因存在于生物体内，并未丢失或损伤，但该基因不表达或表达量
极低的现象。三种情况（了解，345页）：a位置效应b转录水平c转录
后水平。
【目的基因】：把需要研究的基因称为目的基因。
【结构基因】：是一类编码蛋白质或RNA的基因。
【启动子】：RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。
【分子杂交法】：使单链DNA或 RNA分子与具有互补碱基的另一DNA或RNA 片断结合
成双链的技术。
【基因表达】：是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，
转变成具有生物活性的蛋白质分子。
【感受态细胞】：经过适当处理后容易接受外来DNA进入的细胞。如大肠杆菌经CaCl2处
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理，就成为容易受质粒DNA转化的细胞。
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