总胆固醇三酰甘油试剂对总胆汁酸测定的交叉污染及对策

・１３０８・　西部医学２０１０年７月第２２卷第７期　Ｍｅｄ　Ｊ　Ｗｅｓｔ　Ｃｈｉｎａ，Ｊｕｌｙ　２０１０，Ｖｏ１．２２，Ｎｏ．７　总胆固醇三酰甘油试剂对总胆汁酸测定的　交叉污染及对策　盂令章　（唐山钢铁公司医院检验科，河北唐山０６３０２０）　【摘要】　目的探讨总胆回醇（ＣＨ０）、三酰甘油（ＴＧ）试剂对总胆汁酸（ＴＢＡ）测定的交叉污染及解决措施。方法　利用日立７１８Ｏ全自动生化仪分别进行下列测定：Ｉ组单独测定定值血清中ＴＢＡ　１０次；Ⅱ组先测ＣＨ０或ＴＧ后再　测定定值血清中ＴＢＡ　ｔ０次；Ⅲ组设定测完ＣＨ０或ＴＧ后用同一比色杯再测定ＴＢＡ，重复ｌＯ次；Ⅳ组、Ｖ组设定特殊　清洗程序后重复操作Ⅱ和Ⅲ；ＩＶ组先测ＣＨ０或ＴＧ后再连续测定定值血清中ＴＢＡ　１Ｏ次。结果　Ⅱ、Ⅲ、Ｖ、Ⅳ组结果　与Ｉ组比较ＴＢＡ均显著升高（Ｐ＜Ｏ．０１）。设置特殊冲洗程序前后（Ⅱ组和Ｖ组、Ⅲ组和Ｖ组）比较ＴＢＡ显著下降（Ｐ＜　０．０１）。测定ＣＨＯ或ＴＧ后再连续测ＴＢＡ，测定值逐渐下降，分别至第６次后才趋于稳定。结论　ＣＨＯ和ＴＧ试剂对　ＴＢＡ的测定有严重正干扰，实际操作应定期擦拭清洗试剂探针、搅拌棒和比色杯，调整ＣＨ０、ＴＧ和ＴＢＡ的通道使其间　隔６个以上通道能有效解决交叉污染引起的误差。　【关键词】　自动生化分析仪；胆固醇；甘油三酯；总胆汁酸；交叉污染　【中图分类号】Ｒ　４４６．１１　【文献标识码】Ｂ　【文章编号】　１６７２～３５１ｌ（２０１０）０７—１３０８—０３　随着全自动生化分析仪的应用，检验的工作效率　大大提高，但同时出现的交叉污染问题却给工作带来　１１～２Ｏ测定ＴＧ，第２１～１６０测定以水为试剂的对照，　１６１～１８０的结果分别反映了１～２Ｏ比色杯交叉污染　了诸多不便，如果不能及时排除交叉污染，甚至有可　能影响病人的检测结果，耽误治疗。在ＴＢＡ室内质　控正常而病人检查结果偶有偏高复查结果又正常的　现象，而且这个现象是在项目正常运行一段时间后突　情况。Ⅳ组设置仪器的特殊清洗程序，设置从干扰项　目到ＴＢＡ的特殊清洗，同时增加比色杯和搅拌棒的　特殊清洗，重复Ⅱ组测试；Ｖ组设置仪器的特殊清洗　程序后，重复Ⅲ组测试；Ⅵ组先测ＣＨＯ或ＴＧ后再连　然出现的，针对这种情况，初步判定是由于仪器硬件　或者项目变更导致的试剂交叉污染问题，为此试验了　ＣＨＯ、ＴＧ常对ＴＢＡ有严重的正干扰，并比较了排除　干扰的几种方法。　１材料与方法　续测定定值血清中ＴＢＡ　１０次，观察测ＣＨＯ或ＴＧ后　１Ｏ个通道内对ＴＢＡ测定的影响。　１．３　统计学方法　将Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ｖ组的测定　结果分别与Ｉ组结果，Ⅱ组和Ｖ组、Ⅲ组和Ｖ组结果　进行配对ｔ检验。　２结果　１．１　仪器与试剂　日立７１８０生化分析仪，ＣＨＯ、ＴＧ　测定试剂由北京利德曼试剂公司生产，ＴＢＡ试剂由波　试验结果表明：Ⅱ组、Ⅲ组、Ｖ组、Ⅳ组结果与对　音特生物科技（南京）有限公司生产。标本为ＲＡＮ—　ＤＯＸ　２定值血清。　１．２试验方法　试验标本分为６组：Ｉ组即对照组，　对仪器进行Ｗａｓｈ　Ａｌｌ清洗后，确认仪器良好状态下，　以ＴＢＡ配套校准品定标，单独连续测定定值血清中　ＴＢＡ　１０次，取均值；ＩＩ组对试剂针及搅拌棒交叉污染　照组比较均显著升高（Ｐ＜Ｏ．０１），有显著统计学意义，　设置特殊冲洗程序前后（Ⅱ组和Ｖ组、Ⅲ组和Ｖ组）比　较差异也有显著意义（Ｐ　＜Ｏ．０１），见表１。通过表１　也可以看出ＣＨＯ、ＴＧ通过试剂针和搅拌棒及比色杯　对ＴＢＡ测定值存在严重的正干扰，设置特殊清洗程　序可以有效的降低交叉污染，但不能完全消除污染。　通过表２可以看出试剂针和搅拌棒携带污染是逐渐　评估，上述标本先测ＣＨＯ或ＴＧ后再测ＴＢＡ，重复　１Ｏ次；Ⅲ组对比色杯交叉污染评估，日立７１８０共有　１６０个比色杯，如果实验是按连续进行的，当使用完一　圈之后则会出现共用比色杯的情况，根据这样的规律　进行１８Ｏ次测试，按以下顺序测定：１～１０测定ＣＨＯ，　下降的变化趋势，间隔６个样本后存在的干扰大大降　低，接近对照值，这样就要求血脂项目和ＴＢＡ间隔至　少要大于６个项目才能有效的避免试剂针和搅拌棒　携带的交叉污染。　西部医学２０１０年７月第２２卷第７期　Ｍｅｄ　Ｊ　Ｗｅｓｔ　Ｃｈｉｎａ，Ｊｕｌｙ　２０１０，Ｖｏ１．２２，Ｎｏ．７　表１　五组测定总胆汁酸结果比较（ｉ士ｓ，ｊｔｍｏｌ／Ｌ）　３　讨论　合格比色杯；保持清洗机构的洁净及运转正常，废液　管道应定期用５　ｇ／ｄ１次氯酸钠溶液清洗，保持通畅，　可防止废液残留于比色杯造成交叉污染。③更改试　剂的加样顺序：通过表２可以看出试剂探针及搅拌棒　携带污染的变化是逐渐下降的，前６个样本存在明显　干扰，这样就要求ＣＨＯ、ＴＧ和ＴＢＡ间隔至少要大于　６个项目才能有效避免试剂间的交叉污染带来的影　目前，各种多通道全自动生化分析仪都存在一定　的交叉污染［１　］。分析仪使用同一根试剂针吸取试　剂，虽然分析仪有清洗系统，但试剂针很难通过一次　短暂快速的清洗程序就清洗干净，一个项目对随后的　一个项目甚至几个项目都会带来一定程度的试剂污　染［４］，并且随着仪器使用时间的增加，试剂交叉污染　程度会有所加剧。试剂问的交叉污染原因是多方面　响。在仪器的参数设置中没有直接对试剂加样顺序　进行更改的位置，对于日立仪器来说，最简单的方法　就是通过调整通道的顺序来改变试剂加样顺序。④　设置仪器的特殊清洗程序：设置从干扰项目（ＣＨＯ、　ＴＧ）到ＴＢＡ特殊清洗，同时增加比色杯和试剂探针　及搅拌棒的特殊清洗。通过数据可以看出，单纯通过　设置特殊清洗程序（去离子水清洗３次），ＣＨＯ、ＴＧ对　的，主要有①试剂成分中含有某种被污染的项目；②　试剂中含有下一个测试所要测定底物或含有的某种　试剂成分，与下一反应所测定的底物有作用，因而直　接影响下一反应测定的结果；③该试剂所引导的反应　给下一个项目反应进程带来了间接干扰［５］。交叉污　染常来源于试剂针、搅拌棒和比色杯。本文实验发现　ＣＨＯ、ＴＧ通过试剂针和搅拌棒及比色杯对ＴＢＡ测　定值存在严重的正干扰，原因在于两种试剂中均含有　高浓度的胆酸钠，当生化分析仪刚刚加完含有高浓度　的胆酸钠试剂后，通过仪器默认的清洗方式无法清除　残留在试剂针、搅拌棒和比色杯上的胆酸钠，导致后　面的ＴＢＡ测定结果明显偏高。通过探讨ＴＢＡ的交　叉污染情况总结了以下对策。　①试剂针、搅拌棒污染解决措施：停机状态下检　查并更换表面有损伤的试剂探针和搅拌棒，每天用无　水乙醇擦洗，可以避免纤维蛋白原粘附其上造成携带　交叉污染，并定期（每２周）用１Ｏ　花王洗液浸泡　ＴＢＡ的污染并未完全清除。但是通过改变通道顺序却　能有效的改善交叉污染问题［６］，此处的更改通道顺序是　将ＴＢＡ设置在肝功组合项目（９项）的最后一个项目，　由于ＴＢＡ很少单独开展，一旦在捆绑肝功组合的话，就　保证了两次检测之间ＴＢＡ与污染项目之间的项目间隔　超过了８个。这样就有效的解决了试剂交叉污染的问　题，与此同时，通过增加特殊清洗程序使得仪器的检测　速度大大降低，因此对日立仪器来讲，调整通道顺序是　较优方案。试剂针、搅拌棒和比色杯交叉污染解决措施　是针对所有检测项目，提高所有项目检测结果的准确　性，而更改试剂的加样顺序只是针对相应有交叉污染的　项目，提高相应项目检测结果的准确性。所以应重视试　２０ｒａｉｎ，然后用干纱布将剂探针和搅拌棒擦净，用清水　冲洗、擦干，始终保持剂探针和搅拌棒的洁净，减少挂　壁，把由试剂探针和搅拌棒携带的交叉污染降到最　低。②比色杯污染解决措施：检测比色杯的杯空白，　做好比色杯的保养，每周清洗一次，每月要用ＨＩＴＡ—　ＣＨＩ中性洗液浸泡比色杯２４小时，３～４个月更换不　剂针、搅拌棒和比色杯日常保养，去除携带造成的交叉　污染，保证检测结果准确可靠。　４结论　ＣＨＯ和ＴＧ试剂对ＴＢＡ的测定有严重正干扰，　（上转１３１１页）　西部医学２０１０年７月第２２卷第７期　Ｍｅｄ　Ｊ　Ｗｅｓｔ　Ｃｈｉｎａ，Ｊｕｌｙ　２０１０，Ｖｏ１．２２，Ｎｏ．７　表１　各工龄组测定的网织红细胞参数和成熟红细胞参数与对照组的比较（ｉ士　）　注：网织参数：与对照组相比，均Ｐ＜０．０５；接触组相互比较，①组与②组，Ｐ＜０．０５；③组与④组Ｐ＞０．０５；②组与（３或４　ｇ１）Ｐ＜０．０５。成熟红参数：与　对照组相比，③组、④组Ｐ＜０．０５，①组、②组Ｐ＞０．０５；接触组相互比较，①组与②组、③组与④组Ｐ＞０．０５１（１组或２组）与（３组或４　ｇｔ）Ｐ＜０．０５　表２不同性别网织红细胞参数改变特点　注：各组中无性别差异，Ｐ＞０．０５；同性别不同组中各参数均存在差异，Ｐ＜０．０５　们的试验中选定上述指标为观察对象，使更能敏感的　反映低剂量的电离辐射对网织红细胞的损伤。　电离辐射作用于机体，对造血器官的损伤表现为　不同程度的白细胞、血红蛋白和血小板的减少，但是，　利用电离辐射网织红细胞的早期损伤，来观察放射科　工作者血液系统受放射损伤的早期改变鲜有报道。　本研究显示，网织红细胞的损伤要早于红细胞Ｌ３］。由　在辐射性疾病防治中具有广泛的应用前景。能更加　早期提示电离辐射造成的损伤，从而促进相应防护措　施的提高。且随着流式细胞仪的普及，上述综合观察　标示的开展将成为可能。　【参考文献】　［１］　丁凤仙，冯会民，段栓紧，等．放射工作人员外周血象及细胞遗传　此可见，我们在对放射科工作人员进行体检时应该注　意网织红细胞的改变，尤其是网红绝对值（ＲＥＴ）、平　学５年检查结果分析［Ｊ］．中国辐射卫生，２００１，１０（１）：５０—５１．　［２］　郭美艳．天津市放射人员体检外周血象分析［Ｊ３．中国城乡企业卫　生，２００６，１１６（６）：１５．　均网红体积（ＭＣＶｒ）、网红内血红蛋白量（ＣＨｒ）参数　的改变，这对进一步提高长期接触电离辐射工作者的　［３］　马江涛，何林，周厚清，等．外源性维生素对电离辐射损伤小鼠　网织红细胞参数的影响［Ｊ］．中国临床康复，２００５，９（１１）：４０—４１．　［４］　吴卫，陈雨，罗　丹，等．测定网织红细胞血红蛋白含量诊断　防护措施及操作技能，改善作业场所的工作条件，完　善对他们的健康监护很有意义。　４结论　妇女早期铁缺乏［Ｊ３．临床检验杂志，２００６，２４（６）：４６０—４６１．　［５］　丛玉隆．当代血液分析技术与临床［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，　１９９７：１８７－１８８．　网织红细胞各参数的联合观察在长期小剂量电　离辐射损伤的早期有预警作用是可行的，流式细胞仪　（编辑：母存培）　（上接１３０９页）　实际操作应定期擦拭清洗试剂探针、搅拌棒和比色　杯，调整ＣＨＯ、ＴＧ和ＴＢＡ的通道使其间隔６个以上　探讨［Ｊ］．现代检验医学杂志，２００８，１：８３—８３．　［３］　王新平，段建林，池慧．ＴＢＡ－４０全自动生化分析仪交叉污染探　通道能有效解决交叉污染引起的误差。　【参考文献】　［１３　尚晓泓。胡晓丽，王海龙，等．日立７６００—０２０型全自动生化分析仪　干扰、交叉污染的实验研究［Ｊ３．中国医学装备，２００７，４（１１）：１７一　２２．　析［Ｊ］．现代检验医学杂志．２００８．１：３５—３６．　［４３　顾宝国，陈洁，李燕，等．全自动生化仪使用中项目问交叉污染　的探讨［Ｊ］．上海医学检验杂志，２００２，１７（３）：１７６．　［５］　于雷．生化自动分析仪项目间的交叉污染及其避免方法［ｊ］．临　床检验杂志，２００３，２１（３）：１６８．　［６３　李　浩，缪应业，郭昭静．生化自动分析仪分析顺序对测定结果的　影响［Ｊ］．临床检验杂志，２００２；１９（４）；２１２．　（编辑：陈舟贵）　［２］　张延玮．ＢＥＣＫＭＡＮ　ＣＸ５Ａ全自动生化分析仪测试项目交叉污染