结直肠癌早期诊断的分子生物学研究进展

国际消化病杂志２０１５年８月第３５卷第４期Ｉｎｔ　Ｊ　ＤｉｇＤｉｓ，Ａｕｇｕｓｔ　２５，２０１５，Ｖｏ１．３５，Ｎｏ．４　・２４７・　・综述・　结直肠癌早期诊断的分子生物学研究进展　张观坡柏愚李兆申　摘要：早期筛查可以有效降低结直肠癌（ＣＲＣ）的发病率和病死率，结肠镜检查是目前筛查ＣＲＣ的金标　准，但受检率偏低。从患者的血液及粪便中寻找异常的ＤＮＡ和ＲＮＡ是非侵入性的筛查手段，其敏感度和　特异度越来越高，有些分子标志物有望成为早期诊断ＣＲＣ的有效指标，该文就这方面的研究进展作一综述。　关键词：结直肠癌；早期诊断；ＤＮＡ；ＲＮＡ　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—５３４Ｘ．２０１５．０４．００６　结直肠癌（ＣＲＣ）是全球第三位高发的癌症，同　时也是癌症致死的第四大病因＿１］。早期发现、早期　治疗是减少ＣＲＣ发病率和病死率的有效手段。结　肠镜检查是目前筛查ＣＲＣ的金标准，美国５０岁以　上人群的结肠镜筛查率只有２９．８　～５５．２　＿２］，中　国适龄人群的结肠镜受检率也偏低＿３］。此外，结肠　镜检查存在一定的漏检率，如结肠腺瘤的漏检率可　达６　～１２　，而ＣＲＣ的漏检率亦可达５　¨４］。因　此，为了提高适龄人群尤其是ＣＲＣ高危患者的筛查　率，迫切需要新的筛查手段，如寻找血液或粪便中　ＣＲＣ的肿瘤标志物。随着分子生物学以及新一代　测序技术的发展，研究者从患者血液及粪便中发现　了越来越多的肿瘤标志物，其中具有较高敏感度和　特异度的ＤＮＡ和ＲＮＡ具有广阔的应用前景。　１　ＤＮＡ　血中游离ＤＮＡ简称循环核酸，是指循环血中　游离于细胞外部分的已降解的机体内源性ＤＮＡ，可　以来源于肿瘤细胞的坏死、凋亡或直接分泌［５］。循　环核酸一般只有７０￣２００　ｂｐｌ６］，在血液中的含量极　其微少使得分离极其困难，但随着测序技术的不断　进步，目前已可以高度敏感及特异地检测血液中微　量的循环核酸，从而为寻求新的早期无创筛查ＣＲＣ　的标志物提供了可能［７］。　１．１异常ＤＮＡ甲基化　ＤＮＡ甲基化对细胞的正常分化和胚胎的发育　极其重要，但是异常的ＤＮＡ甲基化却与肿瘤的发　生发展密切相关。早在１９８３年，Ｆｅｉｎｂｅｒｇ等ｌ８］就报　道了ＤＮＡ异常甲基化和肿瘤发生的关系。ＤＮＡ　甲基化可以沉默基因的表达，如抑癌基因启动子　ＣｐＧ岛的高甲基化可以引起ＤＮＡ双链更紧密地折　作者单位：２００４３３上海，第二军医大学附属长海医院消化内科　（张观坡现工作于南京军区福州总医院消化内科）　通信作者：李兆申，Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｏｓｈｅｎｌｉ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｒｎ　叠而影响转录，从而导致癌症＿９＿ｌＩＪ］。很多研究发现，　ＤＮＡ甲基化与肿瘤发生的早期事件相关，因而其被　认为是一个潜在的早期肿瘤检测指标＿１　佗］。　目前，仅有少数几个ＤＮＡ甲基化的标志物实　现商业化。如ＣｏｌｏＶａｎｔａｇ　是一种基于检测血浆　中ＳＥＰＴ９基因甲基化的试剂盒，其对ＣＲＣ的总体　敏感度达９０　，其中对１期和２期ＣＲＣ的敏感度　为８７　，对３期和４期ＣＲＣ的敏感度达１００　［”］。　Ｅｐｉ　ｐｒｏＣｏｌｏｎ＠２．０亦是一种基于检测血浆中　ＳＥＰＴ９基因甲基化的试剂盒，其对ＣＲＣ的总体敏　感度达９５．６　，其中对Ｉ期ＣＲＣ的敏感度为８４　９／５，　对２～４期ＣＲＣ的敏感度亦达１００　；使用此试剂　盒时，其在左半结肠的阳性率达９６．４　，在右半结　肠的阳性率达９４．４　ｌ１　。ＣｏｌｏＳｕｒｅＴＭ则是一种基　于检测粪便中ｖｉｍｅｎｔｉｎ基因甲基化的试剂盒，其对　ＣＲＣ的敏感度为３８　～８８　，该试剂盒被推荐与结　肠镜检查联合筛查ＣＲＣ＿】　。　不过大部分ＤＮＡ甲基化的生物标志物尚处于　科研及临床试验阶段。在２１世纪初，Ｎａｋａｙａｍａ　等＿１　］和Ｌｅｃｏｍｔｅ等［１　］检测到，肿瘤抑制基因ｐ１６　的启动子高甲基化在ＣＲＣ患者血液中的阳性率分　别为６８　和６９　。而Ｇｒａｄｙ等＿１。　检测到ｈＭＬＨ１　启动子异常甲基化在ＣＲＣ患者血清中的阳性率仅　为４７　。Ｏｈ等＿１９］研究发现，异常ＳＤＣ２甲基化在　１３９例工～Ⅳ期ＣＲＣ患者肿瘤组织中的表达率为　９７．８　，而血清中ＳＤＣ２甲基化的敏感度为８７．０　，　特异度为９５．２　，特别是在工期ＣＲＣ患者的敏感　度可高达９２．３　，使其可以作为潜在的早期检测　ＣＲＣ的标志物。而对于粪便来源的ＤＮＡ，由于各　研究对标本处理的方法存在更大的异质性，使得目　前研究结果并不令人满意。如ＧｌＯｃｋｎｅｒ等ｌ＿２０］发　现，ＴＦＰＩ２的异常甲基化在ＣＲＣ腺瘤的检出率为　９７　，在Ｉ～Ⅳ期ＣＲＣ患者肿瘤组织中更高达　＂－９９　；而其在工～Ⅲ期ＣＲＣ患者的粪便标本中敏感　二、　国际消化病杂志２０１５年８月第３５卷第４期Ｉｎｔ　Ｊ　Ｄｉｇ　Ｄｉｓ，Ａｕｇｕｓｔ　２５，２０１５，Ｖｏ１．３５，Ｎｏ．４　度为７６　～８９　，特异度为７９　～９３　。其他学者　在ＣＲＣ患者粪便中检测到的ＮＤＲＧ４启动子及转　录因子ＧＡＴＡ４等基因的异常甲基化虽然敏感度仅　为５１　～５３　，但特异度可达９３　～１００　。即便　如此，这些研究仍需扩大样本以进一步验证。　鉴于检测单个基因的局限性，许多学者采用联　合检测多基因甲基化的策略以提高敏感度和特异　度。Ｌｉｎｄ等＿２１］联合检测血清中ＣＮＩＰ１、ＦＢＮ１、　ＩＮＡ、ＳＮＣＡ、ＭＡＩ　和ＳＰＧ２０，发现≥２个以上上述　基因的启动子出现高甲基化，其敏感度在腺瘤和　ＣＲＣ中分别为９３　和９４　９／６，特异度可达９８　。　Ａｌｈｑｕｉｓｔ等ｌ２。坝０联合检测了粪便中骨形成蛋白３　（ＢＭＰ３）、ＮＤＲＧ４、ｖｉｍｅｎｔｉ、ＴＦＰＩ２、突变型ＫＲＡＳ、　ｐ一肌动蛋白（　—ａｃｔｉｎ）等基因的甲基化，其对ＣＲＣ的　敏感度可达８７　。相信随着研究的进展，将来一定　会出现更多的优化组合标志物，可进一步提高ＣＲＣ　早期检测的敏感度和特异度。　１．２异常的肿瘤ＤＮＡ突变　在结直肠正常上皮细胞由腺瘤向腺癌的发生　过程中，突变的基因如ＫＲＡＳ、ｐ５３、ＡＰＣ可以在血　循环中被检测到［１　。　，但与野生型ＤＮＡ相比，含　量非常低［　。例如，Ｄｉｅｈｌ等［　］研究发现，５９　的　ＣＲＣ患者（　＝５６）血浆中可以检测到突变的ＡＰＣ，　但其中晚期ＣＲＣ患者的血浆中突变的ＡＰＣ基因仅　占总ＡＰＣ基因的１．９％ｏ～２７　，而早期ＣＲＣ患者　则仅有０．０１　－－０．１２　。即便使用直接测序技术，　在野生型ＤＮＡ的背景中，其突变信号的检出率也　低于２５　¨２　。因此，目前的技术尚难以开发低成本　且具高敏感度的方法用来检测所有体细胞突变，作　为早期检测ＣＲＣ的指标。　１．３微卫星改变　微卫星不稳定性（ＭＳＩ）是指与正常组织相比，　在肿瘤中某一微卫星由于重复单位的插入或缺失　而造成的微卫星长度的任何改变，出现新的微卫星　等位基因现象。杂合性是指在同源染色体上的一　个或多个位点上有不同等位基因存在的状态。微　卫星改变包括ＭＳＩ和失去杂合性，与肿瘤的发生、　进展相关，因而被认为可作为潜在的肿瘤检测指　标［。　。Ｈｉｂｉ等［。　］研究发现，８０％的原发性ＣＲＣ中　存在ＭＳＩ或失去杂合性的改变，但无１例出现在相　应患者的血清ＤＮＡ中。总体上，在检测早期ＣＲＣ　时，微卫星改变表现出较低的敏感度和特异度，目　前尚难以作为早期检测ＣＲＣ的指标。　１．４循环线粒体ＤＮＡ　在每个细胞中均有数以百计的线粒体ＤＮＡ拷　贝，而正是由于其多拷贝的特性，线粒体ＤＮＡ通常　表现出异质性。对肿瘤细胞而言，除了表现出与特　定肿瘤相关的异质性之外，还存在Ｉ）Ｉ襻区域的变　异ｌ２　。Ｈｉｂｉ等＿３。］研究发现，在早期ＣＲＣ中，近９％０　（７／７７）的ＣＲＣ组织存在线粒体ＤＮＡ的改变，但在　这７例患者中，仅有１例的血清中存在线粒体ＤＮＡ　的改变。鉴于线粒体ＤＮＡ在早期ＣＲＣ中极低的　阳性率，更多的研究将重点放在其与ＣＲＣ晚期转移　的关系上。　２　ＲＮＡ　通常认为ＲＮＡ是一种高度不稳定、容易降解　的小分子物质，但随着研究的深入，许多研究证实　ＲＮＡ可以稳定的存在于外周血中，这可能与其在血　液中与蛋白质或磷脂相结合，从而可以抵御ＲＮＡ　酶降解有关［　。这些ＲＮＡ包括编码ＲＮＡ［￣Ｉ信使　ＲＮＡ（ｍＲＮＡ）］及非编码ＲＮＡ［如微小ＲＮＡ　（ｍｉｃｒｏＲＮＡ）和长链非编码ＲＮＡ（１ｎｃＲＮＡ）］ｌ＿３　。　。　不仅如此，这些ＲＮＡ还可以在血浆或血清中被抽　提及检测出来［３４－３５］作为潜在的肿瘤标志物　３　。　２．１　ｍＲＮＡ　ｍＲＮＡ是由ＤＮＡ的一条链作为模板转录而来　的、携带遗传信息的能指导蛋白合成的一类单链核　糖核酸。ｍＲＮＡ的研究策略是通过分析ｍＲＮＡ芯　片特征继而使用ＲＴ－ＰＣＲ进行确证。　Ｔｓｏｕｍａ等¨３　］通过提取ＣＲＣ患者的外周血　ＲＮＡ并使用多重ＲＴ－ＰＣＲ技术分析癌胚抗原　（ＣＥＡ）、细胞角蛋白２０（ＣＫ２０）、表皮生长因子受体　（ＥＧＦＲ）ｍＲＮＡ的改变，发现其阳性率分别为　９５．５　、７８．４　和１９．３　，并且其与疾病分期及术　前ＣＥＡ水平呈正相关。但目前关于ｍＲＮＡ和　ＣＲＣ的研究资料不多，可能与芯片技术逐渐被新一　代测序技术取代有关。　２．２　ｍｉｃｒｏＲＮＡ　ｍｉｃｒｏＲＮＡ是一类进化上保守的非编码单链小　ＲＮＡ分子，长度约为１８￣２５个核苷酸，其最早是由　Ｌｅｅ等ｌ３　于１９９３年在秀丽新小杆线虫中发现的。　ｍｉｃｒｏＲＮＡ通过与其靶ｍＲＮＡ上的互补序列的碱　基配对，进而引起转录抑制或ｍＲＮＡ降解＿３　。可　以由一个ｍｉｃｒｏＲＮＡ调控多个目的基因的表达，也　可以由几个ｍｉｃｒｏＲＮＡ调节同一个基因的表达ｌ４”ｊ。　异常的ｍｉｃｒｏＲＮＡ表达可以作为早期肿瘤的诊断　标志物。　Ｍｉｃｈａｅｌ等＿４们于２００３年最先分析了２８种　ｍｉｃｒｏＲＮＡ在人ＣＲＣ组织与正常黏膜组织中的差　异表达，发现ｍｉＲ－１４３和ｍｉＲ－１４５具有显著差异。　而Ｎｇ等ｌ＿４　于２００９年首次使用实时ＰＣＲ技术筛选　了ＣＲＣ患者血浆中９５种ｍｉｃｒｏＲＮＡ的变化，其中　ｍｉＲ　１７—３ｐ和ｍｉＲ－９２显著升高，其敏感度为８９　、　特异度为７０　。至今为止，有多达数十种血浆中的　志２０１５午８月第３５卷笫４期Ｉｎｔ　Ｊ　ＤｉｇＤｉｓ，Ａｕｇｕｓｔ　２５，２０１５，Ｖｏｌ。３５，　：　・２４９・　ｍｉｃｒｏＲＮＡ被提出来作为ＣＲＣ的肿瘤标志物，其敏　感度为６８　～９１　、特异度为４１　～９５　。在这些　ｍｉｃｒｏＲＮＡ中，原癌基因性ｍｉｃｒｏＲＮＡ如ｍｉＲ－１７、　ｍｉＲ－２１　ｍｉＲ－３１　ｍｉＲ－９２ａ、ｍｉＲ－１０６ａ、ｍｉＲ一１０６ｂ１　ｍｉＲ－１３５ａ、ｍｉＲ－１３５ｂ和ｍｉＲ－１５５的表达上调与　ＣＲＣ相关，而抑癌基因性ｍｉｃｒｏＲＮＡ如ｍｉＲ－１４３、　ｍｉＲ＿１４５　ｍｉＲ＿１４８ａ、ｍｉＲ一１４８ｂ和ｍｉＲ－２１５的表达下　调亦与ＣＲＣ相关。另一方面，在ＣＲＣ血循环中表　达上调的ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１７—５ｐ、ｍｉＲ－１８ａ、ｍｉＲ一１４２—　３ｐ　ｍｉＲ一１９５、ｍｉＲ－３３１　ｍｉＲ－５３２—５ｐ　ｍｉＲ一５３２—３ｐ　ｍｉＲ－６５２以及表达下调的ｍｉＲ－６０１、ｍｉＲ－７６０被认　为可以鉴别进展期腺瘤和ＣＲＣ，并且ｍｉＲ一１５ｂ、　ｍｉＲ－１７—３ｐ、ｍｉＲ－１８ａ、ｍｉＲ－２０ａ、ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－２９ａ和　ｍｉＲ－９２ａ都已被超过一个研究小组报道过。尽管如　此，仍有相当多的研究结果未被其他研究者所重　复，如Ｆａｈｅｊｓｋｏｖａ等＿４　Ｊ的研究并没有证实ｍｉＲ－１７—　３ｐ、ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－９２ａ、和ｍｉＲ＿１３５ｂ可作为ＣＲＣ的　肿瘤标志物。这些不一致的研究结果可能是由于　实验设计、患者来源以及实验条件不同引起的。因　此，将来需要确立标准的实验控制条件后进行更大　范围的多中心研究，才可能确定哪些ｍｉｃｒｏＲＮＡ可　以作为ＣＲＣ肿瘤标志物。　２．３　ｌｎｃＲＮＡ　ｌｎｃＲＮＡ为长度超过２００　ｎｔ的ＲＮＡ分子，其　不直接编码蛋白，而是以ＲＮＡ的形式在多个层面　上调控基因的表达水平。ｌｎｃＲＮＡ最初被认为是　“垃圾ＲＮＡ”，但随着研究的深入，ｌｎｃＲＮＡ成为近　年来生命科学研究的前沿和热点，其对基因的调节　及细胞的功能发挥着极其重要的作用¨４　，尤其是在　肿瘤抑制及生成中的作用，因此ｌｎｃＲＮＡ作为癌症　潜在的肿瘤标志物也越来越受到重视＿４　。　目前仅有的研究都是以ＣＲＣ组织作为标本。　如Ｇｅ等＿４　］研究发现，前列腺癌相关ｌｎｃＲＮＡ转录　因子１在ＣＲＣ组织中上调，但附近的正常组织为阴　性表达。Ｚｈａｉ等［　］研究发现，长的基因间非编码　ＲＮＡ—ｐ２１在ＣＲＣ组织中表达上调，并且与肿瘤进　展相关。Ｌｉｎｇ等ｌ４　发现ｌｎｃＲＮＡ－ＣＣＡＴ２在ＣＲＣ　组织中高度表达，并且可以促进肿瘤生长、转移和　染色体的不稳定。Ｋｏｇｏ等＿４９］发现ｌｎｃＲＮＡ－　ＨＯＴＡＩＲ的表达在晚期ＣＲＣ的组织中表达较高。　Ｘｕ等¨５ｏ＿则发现ｌｎｃＲＮＡ－人肺腺癌转移相关转录因　子１（ＭＡＬＡＴ－１）在ＣＲＣ组织中表达下调。鉴于　ｌｎｃＲＮＡ在基因调控中的重要作用以及随着下一代　测序技术的进步及普及，将来会有更多的血循环　ｌｎｃＲＮＡ和ＣＲＣ相关研究出现。　３结语　早期筛查ＣＲＣ是减少ＣＲＣ发病率及病死率的　最有效手段。虽然目前最有效的筛查方法仍是结　肠镜检查，但考虑到其较低的受检率，迫切需要新　的筛查手段，其必须满足价格低廉、低风险、高敏感　度并且不需要繁琐的肠道准备等优点，才可以提高　公众尤其是高风险人群进行ＣＲＣ筛查的意愿。通　过分析患者血液或粪便中ＤＮＡ或ＲＮＡ的变化，可　以有效寻找到高敏感度及特异度的早期ＣＲＣ肿瘤　标志物。虽然在目前的研究中，这些肿瘤标志物尚　难以广泛应用于临床，但随着下一代测序技术的进　步及普及，相信可以寻找到更加特异的早期ＣＲＣ肿　瘤标志物。　参考文献　１　Ｆｅｒｌａｙ　Ｊ，Ｓｈｉｎ　ＨＲ，Ｂｒａｙ　Ｆ，ｅｔ　ａ１．Ｅｓｔｉｍａｔｅｓ　ｏｆ　ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ　ｂｕｒｄｅｎ　ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ　ｉｎ　２００８：ＧＬ０Ｂ０ＣＡＮ　２００８．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ，　２０１０，１２７：２８９３　２９１７．　２　Ｂｅｙｄｏｕｎ　ＨＡ。Ｂｅｖｄｏｕｎ　ＭＡ．Ｐｒｅｄｉｃｔｏｒｓ　ｏｆ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｂｅｈａｖｉｏｒｓ　ａｍｏｎｇ　ａｖｅｒａｇｅ－ｒｉｓｋ　ｏｌｄｅｒ　ａｄｕｌｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｕｎｉｔｅｄ　Ｓｔａｔｅｓ．Ｃａｎｃｅｒ　Ｃａｕｓｅｓ　Ｃｏｎｔｒｏｌ，２００８，１９：３３９　３５９．　３　Ｄｅｎｇ　ＳＸ，Ｇａｏ　Ｊ，Ａｎ　Ｗ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｂｅｈａｖｉｏｒ　ａｎｄ　ｗｉｌｌｉｎｇｎｅｓｓ＝ａｎ　ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔ　ｓｕｒｖｅｙ　ｉｎ　Ｃｈｉｎａ．Ｗｏｒｌｄ　Ｊ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２０１１，１７：３１３３—３１３９．　４　Ｌｅｖｉｎ　ＴＲ，Ｃｏｒｌｅｙ　ＤＡ．Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ—ｃａｎｃｅｒ　ａｇｅ．Ｎ　Ｅｎｇｌ　Ｊ　Ｍｅｄ，２０１３，３６９：１１６４　１１６６　５　Ｓｃｈｗａｒｚｅｎｂａｃｈ　Ｈ，Ｈｏｏｎ　ＤＳ，Ｐａｎｔｅ１　Ｋ．Ｃｅｌｌ－ｆｒｅｅ　ｎｕｃｌｅｉｃ　ａｃｉｄｓ　ａｓ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ　ｉｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｎａｔ　Ｒｅｖ　Ｃａｎｃｅｒ，２０１　１，１　１：　４２６—４３７．　６　Ｊａｈｒ　Ｓ，Ｈｅｎｔｚｅ　Ｈ，Ｅｎｇｌｉｓｃｈ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．ＤＮＡ　ｆｒａｇｍｅｎｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂｌｏｏｄ　ｐｌａｓｍａ　ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ：ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅｉｒ　ｏｒｉｇｉｎ　ｆｔｏｍ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ａｎｄ　ｎｅｃｒｏｔｉｃ　ｃｅｌｌｓ．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００１，　６１：１６５９—１６６５．　７　Ｋａｉｓｅｒ　Ｊ．Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｋｅｅｐｉｎｇ　ｔａｂｓ　ｏｎ　ｔｕｍｏｒ　ＤＮＡ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，　２０１０，３２７：１０７４．　８　Ｆｅｉｎｂｅｒｇ　ＡＰ，Ｖｏｇｅｌｓｔｅｉｎ　Ｂ．Ｈｙｐｏｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｅｓ　ｇｅｎｅｓ　ｏｆ　ｓｏｍｅ　ｈｕｍａｎ　ｃａｎｃｅｒｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅｉｒ　ｎｏｒｍａ１　ｃｏｕｎｔｅｒｐａｒｔｓ．　Ｎａｔｕｒｅ，１９８３，３０１：８９—９２．　９　Ｌａｉｒｄ　ＰＷ，Ｊａｅｎｉｓｃｈ　Ｒ．ＤＮＡ　ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃａｎｃｅｒ．Ｈｕｍ　Ｍｏ１　Ｇｅｎｅｔ，１９９４，３：１４８７—１４９５．　１０　Ｊｏｎｅｓ　ＰＡ。Ｂａｙｌｉｎ　ＳＲ　Ｔｈｅ　ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃ　ｅｖｅｎｔｓ　ｉｎ　ｃａｎｃｅｒ．Ｎａｔ　Ｒｅｖ　Ｇｅｎｅｔ，２００２，３：４ｌ５－４２８．　１　１　Ｓａｎｄｏｖａｌ　Ｊ，Ｅｓｔｅｌｌｅｒ　Ｍ．Ｃａｎｃｅｒ　ｅｐｉｇｅｎｏｍｉｃｓ：ｂｅｙｏｎｄ　ｇｅｎｏｍｉｃｓ．　Ｃｕｒｒ　０ｐｉｎ　Ｇｅｎｅｔ　Ｄｅｖ，２０１２，２２：５０—５５．　１２　Ｇｙｐａｒａｋｉ　ＭＴ，　Ｂａｓｄｒａ　ＥＫ，Ｐａｐａｖａｓｓｉｌｉｏｕ　ＡＧ．　ＤＮＡ　ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ　ａｓ　ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　ａｎｄ　ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ　ｔｏｏｌｓ　ｉｎ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ．Ｊ　Ｍｏｌ　Ｍｅｄ（Ｂｅｒ１），２０１３，９１：１２４９—１２５６．　１３　Ｗａｒｒｅｎ　ＪＤ，Ｘｉｏｎｇ　Ｗ，Ｂｕｎｋｅｒ　ＡＭ，ｅｔ　ａ１．Ｓｅｐｔｉｎ　９　ｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ　ＤＮＡ　ｉｓ　ａ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｂｌｏｏｄ　ｔｅｓｔ　ｆｏｒ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａ１　ｃａｎｃｅｒ．　ＢＭＣ　Ｍｅｄ，２０１１，９：１３３．　１４　Ｔｏｔｈ　Ｋ，Ｓｉｐｏｓ　Ｆ，Ｋａｌｍａｒ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ　ＳＥＰＴ９　ｉｎ　ｐｌａｓｍａ　ｉｓ　ａ　ｒｅｌｉａｂｌｅ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｂｏｔｈ　ｌｅｆｔ—ａｎｄ　ｒｉｇｈｔ—ｓｉｄｅｄ　ｃｏｌｏｎ　ｃａｎｃｅｒｓ．ＰＬｏＳ　Ｏｎｅ，２０１２，７：ｅ４６０００．　１５　Ｎｅｄ　ＲＭ，Ｍｅｌｉｌｌｏ　Ｓ，Ｍａｒｒｏｎｅ　ＭＬ　Ｆｅｃａｌ　ＤＮＡ　ｔｅｓｔｉｎｇ　ｆｏｒ　Ｃｏｌｏｒｅｃｔａ１　Ｃａｎｃｅｒ　Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ：ｔｈｅ　ＣｏｌｏＳｕｒｅＴＭ　ｔｅｓｔ．ＰＬｏＳ　Ｃｕｒｒ，　２０１１，３：ＲＲＮ１２２０．　１６　Ｎａｋａｙａｍａ　Ｈ，Ｈｉｂｉ　Ｋ，Ｔａｋａｓｅ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　・２５０・　国际消化病杂志２０１５年８月第３５卷第４期Ｉｎｔ　Ｊ　Ｄｉｇ　Ｄｉｓ，Ａｕｇｕｓｔ　２５，２【Ｊ１５，Ｖｏ１．３５，Ｎｏ．４　ｐｌ　６　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａＩ　ｃａｎｃｅｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ，２０（）３，１０５：４９１—４９３．　１７　Ｌｅｃｏｍｔｅ　Ｔ，Ｂｅｒｇｅｒ　Ａ，ｇｉｎｚｉｎｄｏｈｏｕｅ　Ｆ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｒｅｅ－　ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ｔｕｍｏｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ＤＮＡ　ｉｎ　ｐｌａｓｍａ　ｏｆ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ，２００２，　１００：５４２　５４８．　１８　Ｇｒａｄｙ　ｗＭ，Ｒａｊｐｕｔ　Ａ，Ｌｕｔｔｅｒｂａｕｇｈ　ＪＤ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｂｅｒｒａｎｔｌｙ　ｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ　ｈＭＬＨ１　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ＤＮＡ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ　ｕｎｓｔａｂｌｅ　ｃｏｌｏｎ　ｃａｎｃｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，　２００１，６１：９００　９０２．　１　９　Ｏｈ　Ｔ，Ｋｉｍ　Ｎ，Ｍｏｏｎ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｇｅｎｏｍｅ　ｗｉｄｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒ。ＳＤＣ２，ｆｏｒ　ｂｌｏｏｄ－　ｂａｓｅｄ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａ１　ｃａｎｃｅｒ．Ｊ　Ｍｏｌ　Ｄｉａｇｎ，２０１３，１５：　４９８—５０７．　２０　Ｇｌｏｃｋｎｅｒ　ＳＣ，Ｄｈｉｒ　Ｍ，Ｙｉ　ＪＭ，ｅｔ　ａ１．Ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴＦＰＩ２　ｉｎ　ｓｔｏｏｌ　ＤＮＡ！ａ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｎｏｖｅｌ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａ１　ｃａｎｃｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００９，６９：４６９１—４６９９．　２１　Ｌｉｎｄ　ＧＥ，Ｄａｎｉｅｌｓｅｎ　ＳＡ，Ａｈｌｑｕｉｓｔ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎ　ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒ　ｐａｎｅｌ　ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ　ｆｏｒ　ｃｏｌｏｒｅｅｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ａｎｄ　ａｄｅｎｏｍａｓ．Ｍｏ１　Ｃａｎｃｅｒ，２０１　１，１（）：８５．　２２　Ａｈｌｑｕｉｓｔ　ＤＡ，Ｔａｙｌｏｒ　ＷＲ，Ｍａｈｏｎｅｙ　ＤＷ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｓｔｏｏｌ　ＤＮＡ　ｔｅｓｔ　ｉｓ　ｍｏｒｅ　ａｃｃｕｒａｔｅ　ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｐｌａｓｍａ　ｓｅｐｔｉｎ　９　ｔｅｓｔ　ｉｎ　ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｎｅｏｐｌａｓｉａ．Ｃｌｉｎ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ　Ｈｅｐａｔｏｌ，２０１２，１【）：　２７２—２７７．　２３　Ｓｚｙｍａｎｓｋａ　Ｋ，Ｌｅｓｉ　ＯＡ，Ｋｉｒｋ　ＧＤ，ｅｔ　ａ１．Ｓｅｒ一２４９ＴＰ５３　ｍｕｔａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｕｒｎｏｕｔ　ａｎｄ　ｐｌａｓｍａ　ＤＮＡ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｆｒｏｍ　ａ　ｈｉｇｈ　ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ　ａｒｅａ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｇａｍｂｉａ。Ｗｅｓｔ　Ａｆｒｉｃａ．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ，２００４，１　１０：３７４—３７９．　２４　ｅｈｌ　Ｆ，Ｌｊ　Ｍ．Ｄｒｅｓｓｍａｎ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｕｔａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｌａｓｍａ　ｏｆ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｔｕｍｏｒｓ．　Ｐｒｏｃ　Ｎａｔ１　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　Ｕ　Ｓ　Ａ，２００５，１０２：１６３６８　１６３７３．　２５　Ｄｉｅｈｌ　Ｆ，Ｓｃｈｍｉｄｔ　Ｋ，Ｃｈｏｔｉ　ＭＡ，ｅｔ　ａ１．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ｍｕｔａｎｔ　ＤＮＡ　ｔｏ　ａｓｓｅｓｓ　ｔｕｍｏｒ　ｄｙｎａｍｉｃｓ．Ｎａｔ　Ｍｅｄ，２００８，１　４：９８５　９９０．　２６　Ｇｏｒｍａｌｌｙ　Ｅ，Ｃａｂｏｕｘ　Ｅ，Ｖｉｎｅｉｓ　Ｐ，ｅｔ　ａ１．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ｆｒｅｅ　ＤＮＡ　ｉｎ　ｐｌａｓｍａ　ｏｒ　ｓｅｒｕｍ　ａｓ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒ　ｏｆ　ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ：ｐｒａｃｔｉｃａｌ　ａｓｐｅｃｔｓ　ａｎｄ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ．Ｍｕｔａｔ　Ｒｅｓ，２００７，６３５：１　０５—　１１７．　２７　Ｃｈｅｎ　ＸＱ，Ｓｔｒｏｕｎ　Ｍ，Ｍａｇｎｅｎａｔ　ＪＬ，ｅｔ　ａ１．Ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ　ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｐｌａｓｍａ　ＤＮＡ　ｏｆ　ｓｍａｌｌ　ｃｅｌｌ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｎａｔ　Ｍｅｄ，１９９６，２：１０３３一１０３５．　２８　ＨＩｂｉ　Ｋ。Ｒｏｂｉｎｓｏｎ　ＣＲ，Ｂｏｏｋｅｒ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　ｅｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ．　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，ｉ９９８，５８：１４０５—１４（）７．　２９　Ｋｕｏ　ＳＪ，Ｃｈｅｎ　Ｍ，Ｍａ　ＧＣ，ｅｔ　ａ１．Ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｓｏｍａｔｉｃ　ｍｕｔａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　Ｄ－ｌｏｏｐ　ｒｅｇｉｏｎ　ｉｎｄｉｃａｔｅｓ　ｐｏｏｒ　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ　ｉｎ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ．ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｏｆ　ＴＰ５３　ｍｕｔａｔｉｏｎ．Ｃａｎｃｅｒ　Ｇｅｎｅｔ　Ｃｙｔｏｇｅｎｅｔ，２０１（），２０１：９４　１０１．　３【）ＨＩｈｉ　Ｋ，Ｎａｋａｙａｍａ　Ｈ，Ｙａｍａｚａｋｉ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　ＤＮＡ　ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｔｕｍｏｒｓ　ａｎｄ　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ，　２０（）１，９４：４２９—４３１．　３１　Ｈａｓｓｅｌｍａｎｎ　ＩＸ），Ｒａｐｐｌ　Ｇ，Ｔｉｌｇｅｎ　Ｗ，ｅｔ　ａ１．Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ　ｍＲＮＡ　ｗｉｔｈｉｎ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｂｏｄｉｅｓ　ｉｓ　ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｓｅｒｕｍ．Ｃｌｉｎ　Ｃｈｅｍ，２００１，４７：１４８８　１４８９．　３２　Ｋｏｐｒｅｓｋｉ　ＭＳ，Ｂｅｎｋｏ　ＦＡ，Ｋｗａｋ　ＬＷ，ｅｔ　ａｌ＿Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ｍｅｓｓｅｎｇｅｒ　ＲＮＡ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｍａｌｉｇｎａｎｔ　ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｃｌｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，１９９９，５：１９６１—１９６５．　３３　Ｃｏｒｔｅｚ　ＭＡ，Ｂｕｅｓｏ—Ｒａｍｏｓ　Ｃ，Ｆｅｒｄｉｎ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．ＭｉｃｒｏＲＮＡｓ　ｉｎ　ｂｏｄｙ　ｆｌｕｉｄｓ　ｔｈｅ　ｍｉｘ　ｏｆ　ｈｏｒｍｏｎｅｓ　ａｎｄ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ．Ｎａｔ　Ｒｅｖ　Ｃｌｉｎ　Ｏｎｃｏｌ，２０１ｉ，８：４６７　４７７．　３４　Ｓｏｕｒｖｉｎｏｕ　ＩＳ，Ｍａｒｋｏｕ　Ａ，Ｌｉａｎｉｄｏｕ　ＥＳ．Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ｍｉＲＮＡｓ　ｉｎ　ｐｌａｓｍａ：ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐｒｅａｎａｌｙｔｉｃａｌ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｏｎ　ｔｈｅｉｒ　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ．Ｊ　Ｍｏｌ　ｉＤａｇｎ，２０１３，１５：８２７　８３４．　３５　Ｍｉｔｃｈｅｌ１　ＰＳ，Ｐａｒｋｉｎ　ＲＫ，Ｋｒｏｈ　ＥＭ，ｅｔ　ａ１．　Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ　ａｓ　ｓｔａｂｌｅ　ｂｌｏｏｄ—ｂａｓｅｄ　ｍａｒｋｅｒｓ　ｆｏｒ　ｃａｎｃｅｒ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．　Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　Ｕ　Ｓ　Ａ，２００８，１０５：１０５１３—１０５１８．　３６　Ｓｈｅｎ　Ｊ，Ｓｔａｓｓ　ＳＡ，Ｊｉａｎｇ　Ｆ．ＭｉｃｒｏＲＮＡｓ　ａｓ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｓｏｌｉｄ　ｔｕｍｏｒｓ．Ｃａｎｃｅｒ　Ｌｅｔｔ，２０１３，３２９：１２５—１３６．　３７　Ｔｓｏｕｍａ　Ａ，Ａｇｇｅｌｉ　Ｃ，Ｌｅｍｂｅｓｓｉｓ　Ｐ，ｅｔ　ａ１．Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ　ＲＴ　ＰＣ１　ｂａｓｅｄ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＣＥＡ．ＣＫ２０　ａｎｄ　ＥＧＦＲ　ｉｎ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｗｏｒｌｄ　Ｊ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２０１（），１６：５９６５　５９７４．　３８　Ｌｅｅ　ＲＣ，Ｆｅｉｎｂａｕｍ　ＲＬ，Ａｍｂｒｏｓ　Ｖ．Ｔｈｅ　Ｃ．　ｅｌｅｇａｎｓ　ｈｅｔｅｒｏｃｈｒｏｎｉｃ　ｇｅｎｅ　１ｉｎ＿４　ｅｎｃｏｄｅｓ　ｓｍａｌｌ　ＲＮＡｓ　ｗｉｔｈ　ａｎｔｉｓｅｎｓｅ　ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｉｔｙ　ｔｏ　ｌｉｎ　１　４．Ｃｅｌｌ，１　９９３，７５：８４３　８５４．　３９　Ｏ　Ｈａｒａ　ＳＰ，Ｍｏｔｔ　Ｊｉ　，Ｓｐｌｉｎｔｅｒ　ＰＬ，ｅｔ　ａ１．ＭｉｃｒｏＲＮＡｓ：ｋｅｙ　ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ　ｏｆ　ｐｏｓｔｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００９，１３６：１　７—２５．　４０　Ｓａｙｅｄ　Ｄ．Ａｂｄｅｌｌａｔｉｆ　Ｍ＿ＭｉｃｒｏＲＮＡｓ　ｉｎ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｄｉｓｅａｓｅ．Ｐｈｙｓｉｏｌ　Ｒｅｖ，２０１　１，９１：８２７—８８７．　４１　Ｍｉｃｈａｅｌ　ＭＺ，Ｏ　Ｃｏｎｎｏｒ　ＳＭ，ｖａｎ　Ｈｏｌｓｔ　Ｐｅｌｌｅｋａａｎ　ＮＧ，ｅｔ　ａ１．　Ｒｅｄｕｃｅｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ　ｉｎ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｎｅｏｐｌａｓｉａ．Ｍｏｌ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００３，１：８８２　８９１．　４２　Ｎｇ　ＥＫ。Ｃｈｏｎｇ　ＷＷ。Ｊｉｎ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ　ｉｎ　ｐｌａｓｍａ　ｏｆ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ：ａ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｍａｒｋｅｒ　ｆｏｒ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ．Ｇｕｔ，２０（）９，５８：　１３７５　１３８１．　４３　Ｆａｈｅｊｓｋｏｖａ　Ｐ，Ｂｏｃａｎｅｋ　Ｏ，Ｓａｃｈｌｏｖａ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ｍｉＲ一　１７—３Ｐ，ｍｉ１　２９ａ，ｍｉＲ一９２ａ　ａｎｄ　ｍｉ１　１３５ｂ　ｉｎ　ｓｅｒｕｍ：Ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｈｅｉｒ　ｕｓａｇｅ　ａｓ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ　ｉｎ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ　Ｂｉｏｍａｒｋ，２０１２，１２：１９９　２０４．　４４　Ａｔｋｉｎｓｏｎ　ＳＲ，Ｍａｒｇｕｅｒａｔ　Ｓ，Ｂａｈｌｅｒ　Ｊ．Ｅｘｐｌｏｒｉｎｇ　ｌｏｎｇ　ｎｏｎ－　ｃｏｄｉｎｇ　ＲＮＡｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ．Ｓｅｍｉｎ　Ｃｅｌｌ　Ｄｅｖ　Ｂｉｏｌ，２０ｌ　２，　２３：２００—２０５．　４５　ＳｈｉＸ，Ｓｕｎ　Ｍ，Ｌｉｕ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｌｏｎｇ　ｎｏｎ　ｃｏｄｉｎｇ　ＲＮＡｓ：ａ　ｎｅｗ　ｆｒｏｎｔｉｅｒ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｃａｎｃｅｒ　Ｌｅｔｔ，２０１　３，　３３９：１５９—１６６．　４６　Ｇｅ　Ｘ，Ｃｈｅｎ　Ｙ，Ｌｉａｏ　Ｘ，ｅｔ　ａ１．ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｌｏｎｇ　ｎｏｎｃｏｄｉｎｇ　ＲＮＡ　ＰＣＡＴ　１　ｉｓ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒ　ｏｆ　ｐｏｏｒ　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ．Ｍｅｄ　０ｎｃｏｌ，２（）１３，３（）：５８８．　４７　Ｚｈａｉ　Ｈ，Ｆｅｓ１ｅｒ　Ａ，Ｓｃｈｅｅ　Ｋ，ｅｔ　ａＬ　Ｃ１ｉｎｉｃａ１　ｓｉｇｎ－ｆｉｃａｎｃｅ　０ｆ　ｌｏｎｇ　ｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃ　ｎ０ｎｃ。ｄｉｎｇ　ＲＮＡ　ｐ２１　ｉｎ　ｃｏ１ｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ．　ＣＩｉｎ　Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　Ｃａｎｃｅｒ，２０１３，１　２：２６１—２６６．　４８　Ｌｉｎｇ　Ｈ，Ｓｐｉｚｚ。Ｒ，Ａｔｌａｓｉ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ＿ＣＣＡＴ２，ａ　ｎｏｖｅ１　ｎｏｎｃｏｄｉｎｇ　ＲＮＡ　ｍａｐｐｉｎｇ　ｔ０　８ｑ２４，　ｕｎｄｅｒｌｉｅｓ　ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉ０ｎ　ａｎｄ　ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａ１ｉｎｓｔａｂｍｔｙ　ｉｎ　ｃｏ１ｏｎ　ｃａｎｃｅｒ．　Ｇｅｎｏｍｅ　Ｒｅｓ，２（）１３，　２３：１４４６　１４６１．　４９　Ｋｏｇｏ　Ｒ，Ｓｈｉｍａｍｕｒａ　Ｔ，Ｍｉｍｏｒｉ　Ｋ，ｅｔ　ａｌ＿Ｌｏｎｇ　ｎｏｎｃｏｄｉｒ堰ＲＮＡ　Ｈ０ＴＡＩＲ　ｒｅｇｕｌａｔｅｓ　ｐｏｌｙｃｏｍｂ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｃｈｒ。ｍａｔｉｎ　ｍｄ．ｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｐｏｏｒ　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ　ｉｎ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａ１　ｃａｎｃｅｒｓ．　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２（）１　１，７１：６３２Ｏ一６３２６．　５（）Ｘｕ　Ｃ，Ｙａｎｇ　Ｍ，Ｔｉａｎ　Ｊ，ｅｔ　ａＬ　ＭＡＬＡＴ　１：ａ　ｌｏｎｇ　ｎ０ｒｒｃｏｄｉｎｇ　ＲＮＡ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｉｍＤｏｒｔａｎｔ　３　ｅｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａＩ　ｍｏｔｉｆ　ｉｎ　ｃ０１ｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．Ｉｎｔ　Ｊ　０ｎｃｏｌ，２（】１１，３９：１６９—１７５．　（收稿日期：２（）１４（）８　１４）　（本文编辑：林磊）