链脲佐菌素糖尿病大鼠视网膜血管形态变化

健康大视野　２０１１年１２月　第１２期　论　著　链脲佐菌素糖尿病大鼠视网膜血管形态变化　苏艳兰高斌李淑华　辽宁省糖尿病治疗中心（辽宁　沈阳１１００１５）　【摘要】目的观察链脲佐菌素（ＳＴＺ）诱导的实验性糖尿病大鼠视网膜血管病理改变及中药的作用。方法光镜下观察ＳＴＺ诱　导的糖尿病大鼠视网膜血管病理改变，并应用中药复方煎剂每天定时给中药组糖尿病大鼠灌胃一次。连续给药６０天后．检测血糖、　ＨｂＡ１　Ｃ水平与实验对照组对比研究。结果　第６０天实验对照组大鼠视网膜血管萎缩闭塞。中药组病理改变轻微，视网膜血管无萎　缩闭塞。与实验对照组比较，中药组血糖、ＨｂＡｌｃ均下降，以第３０天降糖效果显著（Ｐ＜０．０５）。结论ＳＴＺ诱导的糖尿病６个月大鼠　视网膜血管病理改变明显，本中药复方煎剂能预防和延缓其发展。　【关键词】视网膜病变糖尿病大鼠　中药　［中图分类号］Ｒ５８７．２；Ｒ９６５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００５—００１９（２０１１）１２—１４２０—０２　Ｔｈｅ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｒｅｔｉｎａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｖｅｓｓｅｌｓ　ｏｆ　Ｄｉａｂｅｔｉｃ　Ｒａｔｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ．Ｓｕ　Ｙａｎｌａｎ，Ｃａｏ　Ｂｉｎ，Ｌｉ　Ｓｈｕｈｕａ．Ｌｉａｏｎ　ｉｎｇ　Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ　Ｄｉａｂｅｔｅｓ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｅｎｔｅｒ．Ｓｈｅｎｙａｎｇ　１　１００１５，Ｃｈｉｎａ．　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｅ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｒｅｔｉｎａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｖｅｓｓｅｌｓ　ｏｆ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｒａｔｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ（ＳＴＺ）ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｈｅｒｂｓ（ＣＭＨ）ｏｎ　ｉｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｅａｃｈ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｒａｔ　ｗａｓ　ｖｅｎ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｇａｖａｇｅ　ＳＱＤ　１３．４ｋｇ／ａ　ｆｏｒ　６０　ｄａｙｓ．Ｔｈｅ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃ　ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｂｙ　ｍｅａｎｓ　ｏｆ　ｌｉｈｔｇ　ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｌａｓｍａ　ｇｌｕｃｏｓｅ，ＨｂＡｌ　ｃ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｒｅｓｕｌｓｔ　Ｏｎ　ｔｈｅ　６０ｔｈ　ｄａｙ　ｔｈｅ　ｒｅｓｕｈｓ　ｓｈｏｗｅｄ：①ｉｎ　ｈｅｔ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（ＥＣＧ），ｔｈｅ　ｒｅｔｉｎａｌ　ｖｅｓｓｅｌｓ　ａｐｐｅａｒｅｄ　ａｔｒｏｐｈｉｃ　ａｎｄ　ｓｏｍｅｗｈａｔ　ｏｃｃｌｕｄｅｄ　ｗｉｔｈ　ｈｙｐｅｒ－　ｐｌａｓｉａ　ｏｆ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｃｙｔｅｓ．②Ｉｎ　ｈｅ　ＣＭＨ　ｔｇｒｏｕｐ，ｈｅ　ｔｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｗｅｒｅ　ｎｏｔ　ａｓ　ｅｖｉｄｅｎｔ　ａｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＥＣＧ．ｔｈｅ　ｒｅｔｉｎａｌ　ｖｅｓｓｅｌｓ　ｗｅｒｅ　ｕｎｉｆｏｒｍ　ｉｔｗｈ－　ｏｕｔ　ｖｉｓｉｂｌｅ　ａｔｒｏｐｈｙ　ｏｒ　ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｃｙｔｅｓ　ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ　ｗａｓ　ｎｏｔ　ａｐｐａｒｅｎｔ．Ｔｈｅ　ＣＭＨ　ｃａｎ　ｄｅｐｒｅｓｓ　ｐｌａｓｍａ　ｓｌｕｅｏｓｅ　ａｎｄ　ＨｂＡ１ｃ　ｉｎ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｒａｔｓ　ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　３０ｔｈ　ｄａｙ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　ＣＭＨ　ｃｏｕｌｄ　ｄｅｌａｙ　ｏｒ　ｐｒｅｖｅｎｔ　ｔｈｅ　ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｒｅｔｉｎｏｐａ—　ｔｈｙ（ＤＲ）．　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】Ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ　Ｄｉｂｅｔａｉｃ　ｒａｔ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｈｅｒｂ　糖尿病视网膜病变（Ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＤＲ）是糖尿病重要　网，平铺载玻片上，自然干燥，ＰＡＳ染色。光镜下观察视网膜血管　　的微血管并发症之一，可导致病人失明。有资料报导其患病率　网形态结构变化。占糖尿病人４０％一６０％Ｌｌ　，因此积极防治ＤＲ等微血管病变具　１．５生化测定　血糖：葡萄糖氧化酶法。试剂盒由北京北化精细化学品有　有重要意义。目前尚缺乏理想药物和有效防治手段，本实验观　察了ＳＴＺ诱导的糖尿病大鼠视网膜血管病理形态改变及中药复　限责任公司提供。　ＨｂＡ１ｃ：比色法，试剂盒由南京建成生物工程研究所第一分　方煎剂对它的作用。　１材料与方法　所提供。　１．６统计学处理　１．１　实验动物模型制作与分组　各实验数据以；±ｓ表示，ｔ检验。　Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠，月龄２个月，体重１５０—２５０ｇ，室温１８—　２５℃，购自中国医科大学实验动物研究中心。大鼠禁食１２小时　于腹腔内一次注射２％链脲佐菌素（Ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｅｉｎ，ＳＴＺ）溶液　４５ｍｇ／ｋｇ，造模后第７天禁食２小时，乙醚轻度麻醉下眶后静脉丛　取血测血糖，选血糖高于１６．７ｍｍｏｌ／Ｌ者为实验对象。按血糖随　机分为实验对照组１５只，中药组ｌ６只。各组间血糖均数相差小　于０．３５ｍｍｏｌ／Ｌ。随机抽取的８只正常对照组大鼠同时腹腔注射　等量枸橼酸一枸橼酸钠缓冲液。　１．２药品及其制备　２结果　２．１视网膜血管形态改变　正常组大鼠视网膜血管呈网状，粗细均匀一致。内皮细胞　均匀散在，可见无细胞核且很短的毛细血管间桥。实验对照组　视网膜血管迂曲、变形、粗细不均，基底膜增厚，可见萎缩、闭塞　的血管，内皮细胞增生。中药组血管网粗细均等，无迂曲、扩张、　闭塞改变，内皮细胞未见明显增生。　２．２中药复方煎剂对糖尿病大鼠血糖的影响　１．２．１　ＳＴＺ：美国ｓｉｇｍａ公司产品，临用前低温（Ｏ℃）以ｐＨ　４．２　的枸橼酸一枸橼酸钠缓冲液配成２％的溶液（２０ｍｇ／ｍ１）。　１．２．２中药复方煎剂：由女贞子、人参、黄芪、三七等中药组成。　各昧中药浸泡１小时后，共煎两次，每次半小时，合并两次滤液浓　缩至１．８　ｍｌ。　１．３实验方法　与实验对照组比较，中药组血糖于给药第３０、６０天均下降，　以第３Ｏ天降糖效果显著（Ｐ＜０．０５），表１。　２．３各组大鼠ＨｂＡｌｃ比较实验６个月各组大鼠ＨｂＡｌｃ检测　结果见表２。两组糖尿病大鼠与正常组比较ＨｂＡ１ｅ明显升高（Ｐ　＜Ｏ．０１），但中药组略低于实验对照组（Ｐ＞０．０５），提示本中药　复方可能具有一定抑制ＨｂＡ１Ｃ升高的作用。　３讨论　中药组大鼠每天定时以中药复方煎剂１３．４ｇ／ｋｇ（１．５ｍ１）灌　胃一次。实验对照组同时灌以自来水１．５ｍｌ。正常对照组自由　进食水。连续给药６Ｏ天，分别于给药第３Ｏ天测禁食２小时血　糖，第６Ｏ天处死后摘取各组大鼠右侧眼球，以１０％甲醛溶液固　定以备制片用，并留血检测血糖、ＨｂＡ１ｃ。　１．４视网膜血管铺片制备　参见Ｋｕｗａｂａｒａ等的方法　Ｉ３　Ｊ，将经１０％甲醛固定的眼球去　掉眼前节，再将眼杯切成三块分离出视网膜，流水冲洗２４小时，　入０．１ｍｏ］／Ｌ，ｐＨ７．８的Ｔｒｉｓ—Ｈｃｌ缓冲液溶解的３％的胰蛋白酶　液，３７℃消化１—３小时至视网膜组织显示混浊溶解，移入水中振　荡，去除内界膜及残存神经组织，直至剩下一层透明视网膜血管　近年的研究认为ＤＲ的发病机理是进展性微血管病变伴血　栓形成　ｊ，从而能导致视网膜缺血、缺氧，管腔闭塞，内皮细胞增　生。本实验对照组糖尿病大鼠可见明显视网膜血管内皮细胞增　生、基底膜增厚、血管迂曲变形、粗细不均，可见萎缩、闭塞。而中　药组大鼠视网膜血管上述改变不明显。本方剂所显示出来的防　治ＤＲ的作用可能与其有活血化瘀，改变血液流变学，改善供氧　或影响某些细胞因子的生成等因素有关。近年来的研究表明高　糖条件下，血糖较快控制后可使眼视网膜周细胞凋亡，反而加重　ＤＲ的发展　Ｊ。本研究结果提示中药降糖作用缓和而持久，这有　利于防止周细胞凋亡，延缓ＤＲ的发生。　——１——　论　著　健康大视野　２０１１年１０月　第１０期　节机体免疫功能和抗氧化作用　ｊ。总之中药复方制剂具有广泛　的增强体质、调节生理功能作用。合理的应用中医中药治疗糖　尿病，从整体出发，辩证论治，以滋阴补肾为基本治疗法则，使机　体内外环境达到协调与平衡可能在预防、延缓或减轻ＤＣＣ方面　有其独特优势。ＤＣＣ的发生与发展是多因素的，确切机制不明，　如高血糖、高血脂、血液流变学异常、脂质过氧化损伤、蛋白的非　酶糖化、多元醇通路激活、自由基损伤等。本组实验显示中药复　方煎剂对糖尿病视网膜病理形态改变有明显的防治作用，其作　用机制尚有待于今后进一步深入探讨。　参考文献　［１］　沈稚舟，吴松华，邵福源，等．糖尿病慢性并发症．第１版．　上海：上海医科大学出版社，１９９９：５５．　表１给药后各组大鼠血糖比较（　±ｓ，ｍｍｏｌ／Ｌ｝　注：与实验对照组比较　Ｐ＜０．０５，　Ｐ＞０．０５。与正常对照组比　较　Ｐ＜０．０１。　表２实验６个月各组大鼠ＨｂＡ１ｃ水平比较（　±　）　［２］　李石良，陈汉平，郑蕙田，等．不同病程糖尿病大鼠的视网　膜血管形态学变化．中国糖尿病杂志，１９９６，４（１）：１３．　［３］　Ｋｕｗａｂａｒａ　Ｔ，Ｃｏｇａｎ　ＤＧ．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｆ　ｒｅｔｉｎａｌ　ｖａｓｃｕｌａｒ　ｐａｔｔｅｒｎｓ．　Ａｒｃｈ　ｏｖｈｔｈａｌｍｏｌ，１９６０，６４：９０４．　注：ＨｂＡ１Ｃ结果为每１Ｏ克血红蛋白中ＨｂＡ１Ｃ的吸光度。与正常　组比较　Ｐ＜０．０１，与实验对照组比较△Ｐ＞０．０５。　中医认为，糖尿病的主要病证为阴虚，病位于肾。阴虚贯穿　整个病程，燥热、血淤为本病之兼证，晚期为阴阳俱虚，该方剂具　有滋阴补肾之功效。近年研究显示中药复方制剂的显著疗效是　各味中药共同作用的结果，本方剂每味中药都有一定的降糖作　用，人参、女贞子尚能降低血脂，人参、女贞子、三七、黄芪亦有调　［４］袁明霞，袁申元，刘元涛，等．粘附分子与实验性糖尿病视　网膜病变的初步研究．中华内分泌代谢杂志，１９９９，１５（４）：　２０７—２１１．　［５］　隋国良，葛在香，董砚虎．糖尿病视网膜病变的发病机制及其　防治研究进展．国外医学内科学分册，２０００，２７（３）：１１９—１２２．　［６］　黄泰康．常用中药成分与药理手册．第１版．北京：中国医　药科技出版社，１９９４：１５，１２５，４２９，１５７７—１５８４．　综合医学　重型颅脑外伤５３例麻醉处理分析　李岩　沈阳市第五人民医院（辽宁　沈阳１１００２３）　【摘要】目的探讨重型颅脑外伤的麻醉处理。方法对５３例重型颅脑外伤的病人，采用全麻气管内插管，麻醉维持用并丙酚３　５ｍｇ／（ｋｇ・ｈ）间断静脉注射芬太尼，吸入低浓度异氟醚，术中应用呼吸机行控制呼吸。结果５３例病人术毕血流动力学稳定，带管　安全返回监护病房。结论重型颅脑外伤病人的麻醉处理力求诱导平稳，合理选用全麻药，避免缺氧，适度的过度通气可有效降低颅　内压。术中加强监测，维持循环呼吸平稳，对合并症积极治疗，提高重型颅脑外伤救治成功率。　【关键词】重型颅脑外伤　过度通气控制性降压　［中图分类号］Ｒ６１４；Ｒ６５１．１　５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００５—００１９（２０１１）１０—１２１６—０２　颅脑外伤是临床上常见的急危重疾病，多需急诊手术治疗　３讨论　以挽救患者生命。此类急诊手术因伤情危重，病情突然、复杂多　近年来醉酒交通肇事后颅脑外伤发生率明显增高，据报道　变，往往难以做到充分的术前准备，并对麻醉选择和处理有特殊　醉酒情况下发生颅脑外伤占颅脑外伤总数的４４．８％一６ｏ％，酒　的要求。病人多有意识障碍，呼吸道梗阻，低氧血症，血流动力　精本身可致大脑对低氧耐受力减低和呼吸抑制，因此术前应保　学波动，麻醉医生必须对病人全身状态及损伤程度全面了解综　持呼吸道通畅，并常规吸氧，对深昏迷有明显呼吸抑制的病人应　合判断，争取尽早手术。现将我院近年来５３例重型颅脑外伤病　立即行气管插管，必要时行气管切开，严重脑外伤的病人常合并　人麻醉处理报告如下。　颈椎损伤，可影响呼吸功能，必须保证在颈椎曲线原位不变的情　１资料与方法　况下进行紧急气管插管，所有颅脑外伤的病人均应视为饱食，麻　１．１一般资料选５３例重型颅脑外伤的病人ＡＳＡ分级Ⅱ一Ⅳ　醉前应下胃管，并尽可能清除胃内容物，诱导插管时应防止误　级，其中男２７例，女２６例，年龄在２３—７５岁之间，术前诊断为硬　吸，插管后如有分泌物，应及时吸引清除，因为误吸血性液、呕吐　膜外血肿２５例，硬膜下血肿２４例，脑室出血４例，双侧瞳孔不等　物不但损害了肺的结构和功能，也为细菌生长创造了条件，早期　大３３例，瞳孔散大或瞳孔直径＞５ｒａｍ２０例，病人术前均有恶心、　抗生素气道灌洗对肺炎控制十分重要。对于危重、反应极差或　呕吐，并伴有巴彬斯基阳性。　呼吸微弱，甚至呼吸停止的病人，可直接行气管插管，术中微泵　１．２方法麻醉前插胃管、开放静脉，麻醉方法采用全麻气管内　持续输注异丙酚可降低颅内压，减少脑血流量和脑需氧量。在　插管，入室后吸净口咽、鼻腔中的血性液、呕吐物使气道通畅。　颅内压增高的病人颅内压下降更明显，而平稳利于神经功能的　监测ＢＰ、Ｐ、Ｒ、ＳＰＯ２、ＥＣＧ、尿量，ＥＴＣＯ：。麻醉诱导静脉注入：咪　观察　。术中采取间断过度通气，以降低动脉血二氧化碳分压，　唑安定２ｍｇ，芬太尼５　ｋｇ，异丙酚１～１．５ｍｇ／ｋｇ，琥珀胆碱　从而减少脑血流，达到降低颅内压的效果　』。麻醉中应注意液　２ｍｇ／ｋｇ，行气管插管。接微量泵持续输注异丙酚３—５ｍｒ／ｋｇ／ｈ，　体平衡，因常用脱水剂、利尿剂还应及时纠正电解质和酸碱平衡　１％一－１．５％ＭＡＣ低浓度异氟醚吸人，术中分次追加维库溴铵和　失调。术中应注意输血补液维持循环稳定。　小剂量芬太尼维持麻醉，术中控制呼吸，潮气量１０ｍｌ／ｋｇ，呼吸频　重型颅脑外伤病人的麻醉处理力求诱导平稳，合理选用全　率１２次／分。间断过度通气，以降低动脉血二氧化碳分压，减少　麻药，避免缺氧，适度的过度通气可有效降低颅内压。术中加强　脑血流，降低颅内压。静脉滴注脱水剂，如甘露醇。降低颅内　监测，维持循环呼吸平稳，掌握必要的麻醉深度，确保患者围手　压，减轻脑水肿。也可静注地塞米松以降低毛细血管通透性，减　术期内环境的稳定，是麻醉成功的关键。并对合并症积极治疗，　轻脑水肿。注意掀开颅骨瓣减压时的循环的变化，术中输液晶　提高重型颅脑外伤救治成功率。　体以林格氏液为主。根据出血量和血细胞比容决定是否输血及　参考文献　输血的量…。术中加强监测，术毕复查血气分析。　［１］　杭燕南．当代麻醉手册．上海：上海世界图书出版公司，２Ｏ０４．　２结果　［２］　黄宇光，罗爱伦．麻醉科分册．北京：中国协和医科大学出　５３例病人经过扩容，降颅压，控制性降压，利尿等麻醉处理，　版社，２０００．　术中循环稳定，开颅后脑组织无明显膨胀，未发生严重并发症，　［３］　黄绍农，李维平，等．过度通气对重型颅脑外伤病人脑氧代　术毕带管送返监护病房。　谢的影响［Ｊ］．中国急救医学，２００３。２３（４）：２６２．　～～一８一　’