鸡艾美耳球虫病病原调查及优势虫种鉴定

鸡艾美耳球虫病病原调查及优势虫种鉴定刘颖1，严斯刚2，汪嘉彦3，周远景4，赵志燕3，雷振超5，杨飞燕1，张廉1

（1.广西壮族自治区柳州市柳北区动物疫病预防控制中心，广西柳州545001；2.柳州市动物疫病预防控制中心，柳州545026；3.柳州市柳北区长塘镇水产畜牧兽医站，柳州545002；4.柳州市柳北区石碑坪镇水产畜牧兽医站，柳州545012；

5.柳州市柳北区水产畜牧兽医局，柳州545001)摘要院为掌握区域性鸡球虫病的感染情况，明确其优势虫种，试验采用随机采样法，从养鸡场（户）中分离并培养鸡球虫卵囊，

通过感染雏鸡试验分析寄生部位、卵囊大小、卵囊形态等指标，进行虫种鉴定。结果表明，该地鸡球虫病感染现象比较普通，感染率为1.78%，春季和初夏为球虫病感染高峰期，峰值达3.1%。试验发现，该地优势虫种为柔嫩艾美耳球虫、堆形艾美耳球虫和布氏艾美耳球虫，机体感染后第6天出现血便最高峰，峰值达81.3%，第4天开始有机体死亡，第6天出现死亡峰值，死亡率达31.2%。研究对区域性鸡球虫病的病原分布及其构成进行了初步确定，为以后鸡球虫病的防控制提供参考。

关键词院鸡；球虫病；调查；分离鉴定

中图分类号：S852.723

文献标识码：B文章编号：1006-4907（2018）02-0044-03

鸡球虫病是由一种或多种艾美耳球虫引起的

鸡肠道性疾病，是一种危害极为严重的全球性寄生虫病。据Bhogal(1992)称，全球每年因球虫病造成的损失高达20亿美元,抗球虫药消费达3.2亿美元[1]。

近年来，国内采用免疫预防、药物防治等措施控制鸡球虫病，在一定范围里取得了较好的效果，但由

作者简介：刘颖渊1984~冤袁男袁汉族袁湖北黄石人袁硕士袁主要从事动物疫病防控研究袁liuying8423@163.com遥

隔6小时观察发情，确认发情后适时实施人工输

精，在人工授精前注射LRH-A3。

二次PG+免疫抑制素法：采用发情周期中第一次注射IHN+PG后，间隔11d后再次注射PG，之后24~72小时每间隔6小时观察发情，适时实施人工输精，在人工授精前注射LRH-A3。2结果

两种处理方法结果见表2。

表2试验处理结果

组别处理方式处理数发情数发情率受胎数双胎率受胎率

/头/头/%/头/%/%

2972.519065.51二次PG法40

3790.226075.72二次PG+41

IHN法

816681.3545070.6合计

3分析与结论

3.1对母牛发情率和受胎率的效果

免疫抑制素是一种糖蛋白类激素，对动物的生殖机能有重要的调节作用。其对于雌性动物的发情与排卵机理是：外源注射免疫抑制素后可以对动物体内的繁殖激素排放起到类似免疫抑制的效果，当免疫效果解除后，会促进动物体内的FSH水平的

通过试提高，进而使动物的发情率与排卵率升高[1]。

验结果可以得出：二次PG法的同期发情率为

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72.5%（29/40），受胎率为65.5%（19/29）；二次PG法+免疫抑制素的同期发情率为90.2%（37/41），受胎率为75.7%（26/37）。两种方法处理后的发情率都达到了70%以上，受胎率也达到了65%以上，均可以满足肉牛的实际生产需要。3.2对成熟排卵率的影响

组2与组1的试验对比结果表明：添加了免疫抑制素的组2其母牛的同期发情率与受胎率得到了显著提高，分别比组1提高了17.7%和10.2%，两组间差异显著，P<0.05，这说明添加免疫抑制素可有效提高母牛发情后的成熟排卵率。3.3对产双胎的影响

两组的母牛双胎率均为0，添加免疫抑制素虽然提高了成熟排卵率，但对于单次发情多个排卵的影响仍不明显，并没有达到试验预期，这可能是因为牛是单胎动物，其卵巢卵泡发育与排卵的机理更为复杂有关。

因此，对于应用免疫抑制素诱发肉牛产双羔的处理技术在激素药物添加组合与用量，以及激素药物的处理程序仍有待进一步研究与探讨。□

参考文献：

[1]

施振旦,李明,刘丽,等.免疫抑制素和卵泡抑素阻止夏季热应激导

致的猪精液品质下降的研究.[J]中国牛业科学,2011,44(7):1488-1494.

收稿日期：2018-03-15HunanAnimalscienceandVeterinaryMedicine,No.2,2018.渊TotalNo.204冤刊头.TIF not exist! 试验研究2018年第2期（总第204期）于受区域和生存环境的影响，同种球虫株的不同地

理株在生物学特性上往往存在着显著差异，具体表现在免疫原性、致病性、耐药性等方面[2]。由数据分析可知，柳州市柳北区鸡球虫病每年均有不同程度发生，随着该地区养鸡业的快速发展，掌握当地鸡球虫病株类型和生物学特性是非常有必要的。本研究旨在了解当地鸡球虫病病原分布情况和明确优势虫体，为预防和控制该病提供依据。1材料与方法1.1材料及设备

收集疑似球虫病病鸡的粪样，带回实验室进行虫卵分离和培养。主要试验设备及试剂：显微镜、恒温箱、冰箱、移液枪、烧杯、铜筛、平皿、载玻片、离心管、生理盐水、PBS缓冲液等。1.2试验动物及饲养管理

试验动物为1日龄瑶鸡，购自柳州某公司，在严格消毒无球虫环境下饲养，其用具、饲料等均于喂前进行高温消毒。购前检查雏鸡粪便，均无球虫感染。

1.3粪样镜检

将新鲜鸡粪与5倍体积的生理盐水搅拌均匀后，经40目铜筛网过滤，将滤液置平底15mL离心管内，静置20min左右，用直径0.5~1.0cm的金属圈平着接触滤液表面，提起后将粘于金属圈上的液膜抖落于载玻片上，如此多次蘸取不同部位的液面后，显微镜下（100倍）观察是否有球虫卵囊，并做好记录[3]。

1.4卵囊分离与培养

将初检为阳性粪样水溶液加5倍蒸馏水稀释，3000r/min离心6min，弃上清液，重复2次，洗去卵囊沉淀中的盐份，将收集到的卵囊移入2.5%重铬酸钾液培养皿中,混匀，26~28℃恒温箱中培养。当有85%以上的卵囊发育为孢子化卵囊时停止培养，收集卵囊保存于4℃冰箱中备用。1.5感染试验

将120羽20日龄雏鸡检查无球虫卵囊后，随机分成感染组和对照组，每组60羽，感染组均接种约1×105个卵囊，感染后定期观察各组鸡的临床表现，并收集粪便。各组均在相同条件下饲养，自由采食、自由饮水，24小时提供光照。1.6病种的鉴定

通过观察感染鸡的临床症状、病变特征、球虫寄生部位等因素，并结合显微镜检查卵囊形态、大小、卵囊壁厚度、孢子化时间等形态指标，初步对种类进行鉴别。2结果与分析

2.1各地球虫病感染情况

结果表明，区域内鸡球虫病感染现象比较普通，各地均有不程度的感染病例，最高感染率为2.14%，最低感染率为1.33%（见图1）。

图1各地鸡球虫分布图

2.2不同季节球虫病流行趋势

以时间序列分析法对感染鸡球虫病例进行季节性分析。由图2可见，鸡球虫病一年四季均有发生，以4~6月份为高峰期，7~9月份为低谷期，峰谷之间相差2.3%，季节存在明显波动。

图2不同季节流行趋势曲线图

2.3雏鸡感染球虫后血便、死亡和体重变化率

由图3可见，接种卵囊后的雏鸡第3天开始出现血便，血便率为15%，第6天出现血便最高峰，峰值达81.3%，峰谷之间相差66.3%，两者之间呈明显差异（P＜0.05）。第4天开始有机体死亡，死亡率为5%，第6天出现峰值，死亡率达31.2%。整个试验过程中，机体重体变化率呈直线上升趋势。

图3机体感染球虫病指标变化曲线

2.4病理解剖和镜检观察

结果表明，感染鸡大部分为堆形艾美耳球虫、柔嫩艾美耳球虫和布氏艾美耳球虫混合感染。从表

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HunanAnimalscienceandVeterinaryMedicine,No.2,2018.渊TotalNo.204冤刊头.TIF not exist! 试验研究2018年第2期（总第204期）doi:10.3969/j.issn.1006-4907.2018.02.021

鸡球虫湖南醴陵分离株的药物敏感性试验刘瑞良

（湖南省醴陵市畜牧兽医水产局，湖南醴陵412200）

摘要院为探究最适宜湖南醴陵地区鸡抗球虫药物，试验选择目前临床上常用的的抗球虫药甲基盐霉素+尼卡巴嗪、马杜霉素

+尼卡巴嗪、盐霉素、莫能霉素、拉沙霉素、二硝托胺和磺胺喹恶啉+甲氧苄啶，以抗球虫指数（ACI）为试验指标，综合评判湖南醴陵地区分离的鸡柔嫩艾美耳球虫的抗药性情况。结果显示，甲基盐霉素+尼卡巴嗪组ACI为164.6，为高效抗球虫药；其次为马杜霉素+尼卡巴嗪和拉沙菌素，ACI分别达到152.6和147.1，属于中效抗球虫药；盐霉素ACI为131.6，为低效抗球虫药；而二硝托胺、莫能霉素和磺胺喹恶啉+甲氧苄啶ACI均低于120，为无效药。试验表明，对于该地区的球虫病应首选甲基盐霉素+尼卡巴嗪，其次选马杜霉素+尼卡巴嗪和拉沙菌素甲基盐霉素+尼卡巴嗪，但为了防止尼卡巴嗪的热应激和延缓耐药性的产生，可选择拉沙霉素和盐霉素进行轮换用药。

关键词院鸡球虫；抗球虫药；耐药性；尼卡巴嗪;药物敏感性试验中图分类号：S858.31;S852.723

文献标识码：B

文章编号：1006-4907（2018）02-0046-04

鸡球虫病是养鸡业中重要而常见的一种疾病，

由复顶门、孢子虫纲、真球虫目、艾美耳亚目、艾美耳1可见，鉴定出的三种球虫寄生部位依次为十二指肠、盲肠、小肠中下段。卵囊以柔嫩艾美耳球虫最

球虫种类寄生部位堆形艾美耳十二指肠、

小肠前段

柔嫩艾美耳盲肠布氏艾美耳小肠中、下段

卵囊大小/μm

(14.5~20.7)×(12.4~17.8),平均17.9×14.5

(22.0~25.1)×(16.2~21.1),平均23.6×18.4

(17.9~25.8)×(16.4~22.1),平均20.8×18.4

科、艾美耳属的一种或多种艾美耳球虫感染引起的寄生虫病，危害十分严重[1]。目前全世界报道的鸡球大，堆形艾美耳球虫最小。孢子化时间以布氏艾美耳球虫最长，堆形艾美耳球虫最短。

孢子囊大小/μm

(6.7~11.2)×(4.1~6.8)

孢子化时间/h

19

2428

作者简介：刘瑞良(1974~),男,湖南醴陵人,兽医师,执业兽医师,主要从事畜牧研究及技术推广工作,644680149@qq.com遥表1鸡球虫种形态学指标

卵囊形态

卵圆、卵壁光滑、淡绿色

宽椭圆、卵壁光滑、淡褐色(11.24~6.4)×(5.45~7.6)卵圆、卵壁光滑、淡黄色

(14.2~16.7)×(8.1~11.4)

3讨论与结论

调查表明，该地鸡球虫病感染现象比较普通，一年四季均有发生，但感染率均不高。由于该地春季和初夏雨水充沛、温度湿润，为球虫卵的生存发育提供有利条件，因此，上述两季节要做好鸡舍内外卫生环境消毒，减少机体应激反应，提高机体抗病力。试验表明，机体感染球虫后第3天开始出现血便，第6天出现死亡高峰期，因此，当个别机体出现血便时应立即采取紧急预防控制措施。

目前，世界上公认感染鸡的艾美耳球虫有7种，其中柔嫩、毒害艾美耳球虫致病力最强，堆形、巨型、布氏艾美耳球虫有一定的致病力，缓和、早熟艾美耳球虫致病力弱[4]。有的可以根据卵囊形态即可鉴定，如巨型艾美耳球虫；有的根据最短潜在期来判断，例如早熟艾美耳球虫和和缓艾美耳球虫。其他的必须结合寄生部位典型的病变特征和内生性发育等特征才能鉴定。本次实验虫种鉴定的过程46

中发现，柔嫩艾美耳在盲肠的病变很典型，刮取盲

肠内容物镜检可以查见典型的虫体的形态。而堆形、布氏艾美耳球虫需要结合病理解剖和镜检观察才可以确诊。本次虫种感染试验中，均出现柔嫩、堆形、布氏艾美耳球虫混合感染特征，结果表明上述3种虫体为该地区鸡球虫病病原的优势虫种。通过调查和鉴定可以了解当地鸡球虫病原构成及其病原水平，为以后抗球虫药的选择提供参考。□

参考文献：

[1]索勋,李国清.鸡球虫病学[M].北京:中国农业大学出版社,1998.[2]张伟信，张西臣，李建华.五种不同地理株柔嫩艾美耳球虫免疫保护性比较[J].中国预防兽医学报,2006,28(4):454-456.

[3]王鑫,黄兵,赵其平,等援鸡艾美耳球虫单卵囊分离与种类鉴定[J].复旦学报,2007,46(6):930-936.

[4]龚振兴,刘毅,刘增再,等.鸡球虫单卵囊分离技术与雏鸡感染试验[J].动物医学展,2006,27(3):72-75.

收稿日期：2017-12-27HunanAnimalscienceandVeterinaryMedicine,No.2,2018.渊TotalNo.204冤