双酚A对铜绿微囊藻生长及生理的影响

第２ｌ卷　第５期　２０ｌ　４年　工安全与环境　程　Ｖｏｌ＿２１　ＮＯ．５　Ｓｅｐ．　Ｚ０ｌ４　９月　Ｓａｆｅｔｙ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａ　Ｉ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　双酚Ａ对铜绿微囊藻生长及生理的影响　杨　璨，于晓娟，王欣泽，孔海南，李亚红　（上海交通大学环境科学与工程学院，上海２００２４０）　摘要：为了从生物量、光合系统、膜系统和抗氧化系统等方面研究培养基中不同浓度双酚Ａ（ＢＰＡ）对铜绿微囊　藻生长及生理的影响，本试验通过设置０．５　ｍｇ／Ｉ一２　ｍｇ／Ｉ　、８　ｍｇ／Ｉ　、１６　ｍｇ／Ｉ　和２４　ｍｇ／Ｉ　５个ＢＰＡ浓度梯度和１　个对照组，检测了藻细胞生物量、叶绿素ａ含量、最大光化学量子产量（Ｆ　／Ｆ　）、可溶性蛋白浓度、超氧化物歧化酶　（ＳＯＤ）活性、丙二醛（ＭＤＡ）含量以及试验过程中ＢＰＡ浓度的变化。结果表明：ＢＰＡ胁迫下，铜绿微囊藻的生长总　体呈现“低促高抑”的规律，即低浓度组（０．５　ｍｇ／Ｌ）ＢＰＡ促进了藻细胞生物量的增长和蛋白质的合成，但对叶绿　素ａ的合成没有显著促进作用，而高浓度组（２　ｍｇ／Ｌ、８　ｍｇ／Ｌ、１６　ｍｇ／Ｌ、２４　ｍｇ／Ｌ）对藻细胞的抑制与ＢＰＡ浓度呈正　相关；ＢＰＡ胁迫使得藻细胞叶绿素ａ含量下降，光合作用潜能降低，膜系统发生脂质过氧化，细胞受到氧化损伤，　ＳＯＤ活力升高，藻细胞生长及生理受到一系列的影响；此外，藻细胞对ＢＰＡ还具有一定的生物降解作用。　关键词：双酚Ａ（ＢＰＡ）；铜绿微囊藻；生长；生理　中图分类号：Ｘ１７　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７１—１５５６（２０１４）０５　００２１—０５　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｂｉｓｐｈｅｎｏｌ　Ａ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｍ　ｉｃｒｏｃｙｓｔｉｓ　Ａｅｒｕ　ｇｌｎｏｓａ　ＹＡＮＧ　Ｃａｎ，ＹＵ　Ｘｉａｏ—ｊ　ｕａｎ，ＷＡＮＧ　Ｘｉｎ—ｚｅ，Ｋ０ＮＧ　Ｈａｉ—ｎａｎ，Ｉ　Ｉ　Ｙａ～ｈｏｎｇ　（Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｊ　ｉａｏｔｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，　Ｓｈａｎｇｈａｉ　２００２４０，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｒｅｓｅａｒｃｈ，ａ　ｓｅｒｉｅｓ　ｏｆ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｏｆ　ｂｉｓｐｈｅｎｏｌ　Ａ（ＢＰＡ）ａｒｅ　ｓｅｔ　ａｓ　０．５　ｍｇ／Ｉ　，　２　ｍｇ／Ｉ　，８　ｍｇ／Ｉ　，１６　ｍｇ／Ｌ　ａｎｄ　２４　ｍｇ／Ｌ　ｉｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｔｏ　ｏｎｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅｉｒ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（Ｍ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）．Ｂｉｏｍａｓｓ　ｏｆ　ａｌｇａ。ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ　ａ，ＭＤＡ　ａｎｄ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ，Ｆｖ／Ｆｍ，ＳＯＤ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅ　ｏｆ　ＢＰＡ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｔｏ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅ　ｔｈｅ　ＢＰＡ’Ｓ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　Ｍ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．Ｉｔ　ｉＳ　ｆｏｕｎｄ　ｔｈａｔ　ＢＰＡ　ｐｕ—　ｓｈｅｓ　ａ　ｔｒｅｎｄ　ｏｆ　ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ　ｉｎ　ｌｏｗ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｉｎ　ｈｉｇｈ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｎ　Ｍ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ．０．５　ａｇ／Ｌ　ＢＰＡ　ｅｎｈａｎｃｅｓ　ｔｈｅ　ｂｉｒｏｍａｓｓ　ｏｆ　ａｌｇａ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｐｒｏｔｅｉｎ，ｂｕｔ　ｄｏｅｓ　ｎｏｔ　ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅ　ａｎ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ　ａ．Ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒａｒｙ，ｔｈｅ　ＢＰＡ’Ｓ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｎ　ａｌｇａ　ｉｓ　ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｉｔｓ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｈｉｇｈ—ｌｅｖｅｌ　ｇｒｏｕｐ．Ｂｅｃａｕｓｅ　ｏｆ　ＢＰＡ，ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ　ａ　ａｎｄ　ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｃａｐａｃｉｔｙ　ｒｅｄｕｃｅｓ，ｍｅｍｂｒａｎｅ’Ｓ　ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｏｃｃｕｒｅｓ，ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｄａｍａｇｅ　ａｐｐｅａｒｅｓ　ａｎｄ　ＳＯＤ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｓ．Ｏｎ　ｔｈｅ　ｗｈｏｌｅ，ｔｈｅｒｅ　ｉｓ　ａ　ｐｅｒｖａｓｉｖｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙｏｆ　Ｍ．ａｅｒｕｇｉｎｏ—　ｓａ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗ　ｔｈａｔ　Ｍ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ　ｐｌａｙｓ　ａ　ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｒｏｌｅ　ｏｎ　ＢＰＡ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｂｉｓｐｈｅｎｏｌ　Ａ（ＢＰＡ）；Ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ；ｇｒｏｗｔｈ；ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　环境雌激素，也称环境内分泌干扰物，可通过影　响机体内源性激素的合成、释放、运输、结合与代谢　等干扰人类和动物内分泌系统的正常生理功能，从　收稿日期：２０１　３－１０—２９　作者简介：杨修回日期：２０１３　１１－２６　而破坏机体稳定　。环境雌激素日渐引起各国高　度重视，并被列为高度优先研究和控制的污染物　。　双酚Ａ（ｂｉｓｐｈｅｎｏｌ　Ａ，ＢＰＡ）是具有雌激素活性的典　基金项目：国家水体污染控制与治理科技重大专项（２０１２ＺＸ０７１０５—００３）　璨（１９８９一），女，硕士，主要研究方向为低污染水治理。Ｅ～ｍａｉｌ：ｒｅｎｅｅ０６２７＠ｓｉｎａ．ｃｏｒｎ　２２　安全与环境工程　第２１卷　型酚类环境化学污染物，是生产环氧树脂、抗氧化剂　等的前体物质，广泛存在于人类的生产和生活　中＿５　ｊ。欧洲的北海和易北河支流、Ｅｌ本的河川和　港湾淤泥、韩国蔚山海湾等多国水体中均发现了　ＢＰＡ＿７］；我国的珠江广州河段和东江东莞河段也检　测出ＢＰＡ，调查显示珠江口地区入海口表层水中　ＢＰＡ浓度为１．１７～３。９２　ｔ￣ｇ／Ｌ　；我国滇池典型鱼　类肌肉样品中ＢＰＡ浓度为ｌ０．１～８３．５　ｎｇ／ｇＥ　。毒　理研究表明，ＢＰＡ对大型溢有抑制甚至致死作用，　对斑马鱼胚胎发育有明显的抑制和致畸作用，属于　高毒物质ｌ１　。因此，ＢＰＡ通过食物链进一步生物　放大而破坏水生生态系统健康和平衡的潜在危害不　容忽视ｕ　。　藻类是水生生态系统中的初级生产者，对整个　水生生态系统的物质和能量交换起着重要作用，并　且对毒物敏感、容易获得、个体小、繁殖快，可在较短　时间内得到化学物质对多种群水平及世代的影响评　价，是一类很好的测试生物ｌ１　。研究表明，藻类能　与水中污染物相互作用，污染物抑制了藻的生长，同　时藻对污染物亦有降解作用　。　］。内分泌干扰物　（如雌二醇、壬基酚、邻苯二甲酸甲酯等）普遍会对藻　细胞生长及生理产生影响＿】　］，其毒性机理主要包　括对光合作用、呼吸作用以及生物膜的影响等ｕ　。　微囊藻是全球广泛分布的一种蓝藻［２　，铜绿微　囊藻（Ｍｉｃｒｏ￣’ｙｓｔｉｓａ　ｅｒｕｇｉｎｏｓａ）作为其典型代表，在　我国的富营养化湖泊、池塘水体中分布很广。本文　以铜绿微囊藻为研究对象，综合评价ＢＰＡ对其生长　及生理的影响，以为ＢＰＡ的环境风险评估提供第一　手资料。　１材料与方法　１．１藻种来源及培养　铜绿微囊藻购自中科院武汉水生生物研究所淡　水藻种库，藻种编号为ＦＡＣＨＢ　９４２。试验前将藻种　转入ＢＧ１１培养基进行扩大培养，培养基和培养瓶　１２１℃灭菌５５　ｒａｉｎ，培养温度（２５－Ｉ－１）℃，光照强度　１　５００　Ｉ　ＵＸ，光暗比１４　ｈ：１０　ｈ，定时振荡；２～３　ｄ　后，将处于对数生长期的藻转入新培养基，进行试验　（初始藻细胞密度为１．１３×１０。ｃｅｌｌｓ／ｍＩ　）。　１．２试验方法　本试验周期为７　ｄ，共设置５个试验组和１个对　照组，试验组ＢＰＡ浓度梯度为０．５　ｍｇ／Ｌ、２　ｍｇ／Ｌ、　８　ｍｇ／Ｉ　、１６　ｍｇ／Ｉ　和２４　ｍｇ／Ｉ　，每组设置３个平行　样。以二甲亚砜（ＤＭＳＯ）为助溶剂，其在藻液中体　积分数为０．５‰。测试指标及测定方法如下：　１．２．１　藻细胞生物量测定　用血球计数板在显微镜下进行藻细胞计数，并　在６８５　ｎｍ波长下测定藻液吸光度，建立藻细胞密　度与藻液吸光度之间的线性关系，以藻液吸光度来　衡量藻细胞生物量。　１．２．２　藻液叶绿素ａ含量和藻细胞最大光化学量　子产量（Ｆ　／Ｆ　）测定　藻液暗处理５　ｍｉｎ后，取３　ｍＩ　置于样品管中，　采用浮游植物分类荧光仪（ＰＨＹＴＯ—ＰＡＭ，ＷＡＩ　Ｚ—　Ｇｅｒｍａｒｗ）测定荧光值。荧光由４７０　ｎｍ、５２０　ｎｍ、　６４５　ｎｍ和６６５　ｎｍ波长的ＬＥＤ灯轮流高频激发产　生。采用分光光度计法作叶绿素ａ校准曲线，在给　定激发光波长下根据校准曲线和荧光产量得出叶绿　素ａ含量。　充分暗适应后，打开激发光测得叶绿素ａ荧光　值Ｆ，此时给出一个饱和脉冲，细胞内电子门将用于　光合作用的能量转化为荧光和热，测得叶绿素“荧　光值Ｆ　，Ｆ　／Ｆ　一（Ｆ　一Ｆ）／Ｆ　。　１．２．３　ＢＰＡ含量测定　藻液中ＢＰＡ含量测定：取ｌ　ｍＩ　藻液置于１．５　ｍＬ　ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，以５　０００　ｒ／ｒａｉｎ的转速离心１Ｏ　ａｒｉｎ，取上清液，过孔径０．４５　ｔｘｍ的ＰＴＦＥ膜，转入２　ｍＩ　棕色样品瓶中，４℃避光保存，ｇ４　ｈ内用高效液　相色谱（ＨＰＬＣ）检测。　藻细胞内ＢＰＡ含量测定：①取ｌ　ｍＩ　藻液置于　１．５　ｍＩ　ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，以５　０００　ｒ／ｍｉｎ的转速离心　１０　ｍｉｎ，弃上清液；②用超纯水悬浮藻液，离心，弃上　清液；③重复步骤②；④用Ｗｅｓｔｅｒｎ及ＩＰ裂解液（上　海生工，ＰＩ　０３５）裂解细胞，１２　０００　ｇ离心５　ｒａｉｎ，取　上清液，过孔径０．４５　ＩＴＩ的ＰＴＦＥ膜，转入２　ｍＩ　棕　色样品瓶中，４℃避光保存，２４　ｈ内用ＨＰＩ　Ｃ检测。　１．２．４　藻细胞中可溶性蛋白浓度、ＳＯＤ活性及　ＭＤＡ含量测定　藻细胞中可溶性蛋白浓度、超氧化物歧化酶　（Ｓ（）Ｄ）活性和丙二醛（ＭＤＡ）含量分别采用改良型　ＢＣＡ法蛋白质浓度测定试剂盒ｌ２　（上海生工，　ＳＫ３Ｏ５１）、总Ｓ（）Ｄ活性检测试剂盒（ＷＳＴ法）ｌ２　（碧　云天生物技术研究所，ＳＯＬＯ２）、脂质氧化检测试剂盒　（ＴＢＡ法）［２　（碧云天生物技术研究所，Ｓ０１３１）测定。　１．３分析方法　１．３．１　高效液相色谱分析条件　样品分离采用Ｃ１８　ＷＰ柱（２５０×４．６　ｍｍ，５　ｍ），柱温为４Ｏ℃；流动相为９Ｏ　甲醇和ｌＯ　水　（体积分数），流速为０．６　ｍＩ　／ｍｉｎ；紫外检测波长为　一．．　ＩＩ１．ｓ一一第５期　杨　璨等：双酚Ａ对铜绿微囊藻生长及生理的影响　２３　２７６　ｎｍ；进样体积为１Ｏ　Ｌ，ＢＰＡ的保留时间约为　６．１　ｒａｉｎ。　１．３．２数据分析处理　本文采用ｅｘｃｅｌ　２０１０、ＳＰＳＳ　２０．０和ｏｒｉｇｉｎ　９对　检测数据进行统计分析。　２结果与讨论　２．１　ＢＰＡ对铜绿微囊藻生物量的影响　图１为不同浓度ＢＰＡ对铜绿微囊藻生物量的影　响试验结果。由图１可见，试验组和对照组藻细胞生　物量总体都呈上升趋势。第１　ｄ时，各试验组与对照　组相比均无明显差异，从第３　ｄ开始，低浓度组（Ｏ．５　ｍｇ／Ｌ，下同）藻细胞生物量高于对照组，高浓度组（２　ｍｇ／Ｉ　、８　ｍｇ／Ｌ、１６　ｍｇ／Ｌ、２４　ｒａｇ／Ｌ，下同）藻细胞生物　量低于对照组，且差异显著（　＜０．０５），说明当ＢＰＡ　浓度高于２　ｍｇ／Ｌ时对藻细胞生长产生了明显的抑制　作用，且随着ＢＰＡ浓度的增加，抑制作用越显著，这　与楼春口妇研究酰胺类除草剂对铜绿微囊藻生长的影　响和Ｇ．Ｊ．Ｚｈｏｕ等＿２妇研究壬基酚和辛基酚对斜生栅藻　生长的影响结果类似；第７　ｄ时，对照组藻细胞生物　量为９２３．７５×１０　ｃｅｌｌｓ／ｍＬ，２４　ｍｇ／Ｌ　ＢＰＡ处理组藻　细胞生物量为７３７．０２×１０　ｃｅｌｌｓ／ｍＬ，抑制率为　２Ｏ．２　。可见，低浓度ＢＰＡ能促进铜绿微囊藻的生　长，表现出毒物兴奋效应；而高浓度组对铜绿微囊藻　的抑制作用与ＢＰＡ浓度呈正相关。这种毒物兴奋效　应是由于低浓度物质能够改变细胞膜的通透性，使藻　细胞更易吸收培养基中的营养所致［２　。　图１　不同浓度ＢＰＡ对藻细胞生物量的影响　Ｆｉｇ．１　Ｉｍｐａｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ＢＰＡ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｂｉｏｍａｓｓ　ｏｆ　Ｍ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ　２．２　ＢＰＡ对铜绿微囊藻光合作用的影响　叶绿素ａ是光合作用的主要色素，本试验考量　第７　ｄ时单位藻细胞叶绿素ａ的含量见表１。由表　ｌ可见，与对照组相比，高浓度组藻细胞内叶绿素ａ　含量明显降低，且单位藻细胞叶绿素ａ含量与ＢＰＡ　浓度呈负相关，说明高浓度ＢＰＡ极显著地抑制了藻　细胞内叶绿素ａ的合成或促进了其分解，叶绿素ａ　含量降低，直接影响藻细胞对光的捕获以及光合反　应的进行，从而导致光合效率降低，进而影响细胞的　生长；低浓度组单位藻细胞叶绿素ａ含量与对照组　无显著差别，这说明低浓度ＢＰＡ只是促进了藻细胞　数量的增殖，没有直接促进叶绿素ａ的合成。　表１第７　ｄ时不同浓度ＢＰＡ试验组单位藻细胞　叶绿素ａ的含量　Ｔａｂｌｅ　１　Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ　ａ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｐｅｒ　ｃｅｌｌ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｉｎｉｔｉａｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＢＰＡ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｖｅｎｔｈ　ｄａｙ　ＢＰＡ浓度／　单位藻细胞叶绿素ａ含量　（ｍｇ・Ｌ一　）　（×１０一　“ｇ・ｃｅｌｌ一　）　２．３２７士０．０１７　２．３０９±０．０８５　２．１９６士０．０１５　２．１９０士０．０３２　２．１５５±０．Ｏ２３　２．Ｏ２３士０．０８３　注：　”表示试验组与对照组比较差异极显著（　＜Ｏ．Ｏ１）。　Ｆ√Ｆ　值为最大光化学量子产量（ｏｐｔｉｍａｌ／　ｍａｘｉｍａｌ　ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｏｆ　ＰＳ　ＩＩ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄａｒｋ），它反映ＰＳ　１１反应中心内原初光能转换效率　或称最大ＰＳ　ＩＩ的光能转换效率，非胁迫条件下该参　数的变化极小，胁迫条件下该参数明显下降，可表征　光合作用潜能　。图２为不同浓度ＢＰＡ对铜绿微　囊藻细胞Ｆ　／　值的影响试验结果。由图２可见，　第１　ｄ时，所有试验组Ｆ　／Ｆ　值均高于对照组，说明　２４　ｈ内ＢＰＡ对铜绿微囊藻细胞光合活性具有一定　的表观刺激作用，且ＢＰＡ浓度越低，刺激作用越强　烈；第３　ｄ时，对照组Ｆ　／Ｆ　值升高至０．７４，而各试　验组Ｆ　／Ｆ　值均有所下降，２４　ｍｇ／Ｉ　ＢＰＡ试验组　Ｆ　／Ｆ　值仅为０．４１，本试验周期内，两者差距达到　最大；第３～７　ｄ内，试验组Ｆ　／Ｆ，　值均低于对照组，　说明藻细胞受到不同程度的胁迫，光合活性被抑制。　光合作用亦是一个信息传递的过程，ＢＰＡ的出现可　能对光合作用中信号的级联传递产生了干扰，光合　效率下降　。与铜绿微囊藻不同，在ＢＰＡ胁迫下　单针藻Ｆ　／Ｆ　值则呈上升趋势　，推测原因为单针　藻作为真核生物，具有叶绿体，其光和活性对ＢＰＡ　胁迫的响应阈值和方式与原核细胞有所差异，同时　试验中ＢＰＡ的浓度对其也有所影响。　２．３　ＢＰＡ对铜绿微囊藻细胞膜的影响　表２为不同浓度ＢＰＡ作用７　ｄ后对铜绿微囊　２４　安全与环境工程　第２ｌ卷　１　３　５　７　时间／ｄ　图２不同浓度ＢＰＡ对藻细胞Ｆ　／Ｆ　的影响　Ｆｉｇ．２　Ｉｍｐａｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ＢＰＡ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｆ　ｏｔ、　Ｍ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ　藻细胞ＭＤＡ含量、可溶性蛋白浓度和ＳＯＤ活性的　影响试验结果。　丙二醛（ＭＤＡ）是衡量膜脂过氧化的重要指　标　。由表２可见，在Ｏ．５～１６　ｍｇ／Ｌ　ＢＰＡ浓度范　围内，藻细胞ＭＤＡ含量逐渐增加，显著高于对照　组；２　ｍｇ／Ｌ和８　ｍｇ／Ｌ　ＢＰＡ试验组藻细胞ＭＤＡ含　量基本一致，这可能由于该浓度范围内由ＢＰＡ引起　的ＭＤＡ增加量被藻细胞有效清除，继而减少了对　细胞膜的损伤；１６　ｍｇ／Ｌ　ＢＰＡ试验组藻细胞ＭＤＡ　含量达到最大，为８　ｍｇ／Ｉ　ＢＰＡ试验组的１．９倍，为　对照组的２．４倍；２４　ｍｇ／Ｌ　ＢＰＡ试验组藻细胞　ＭＤＡ含量为所有试验组中最低，与对照组相比无　显著差异。试验中在ＢＰＡ胁迫下藻细胞内ＭＤＡ　含量逐渐积累，说明生物膜发生了脂质过氧化，稳定　性降低，膜结构和功能受到影响，细胞受到了氧化损　伤；当ＢＰＡ浓度超过一定限度（高于１６　ｍｇ／Ｌ），过　度过氧化导致膜结构损伤，ＭＤＡ外渗，因此ＭＤＡ　含量有所下降。相关研究显示，从单细胞藻类到高　表２不同浓度ＢＰＡ试验组作用７　ｄ后对铜绿微囊藻细胞　ＭＤＡ含量、可溶性蛋白浓度和ＳＯＤ活性的影响　Ｔａｂｌｅ　２　Ｉｍｐａｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＢＰＡ　ｏｎ　ＭＤＡ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ，ａｎｄ　ＳＯＤ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｍ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ　ａｆｔｅｒ　７一ｄａｙ　ｅｘｐｏｓｕｒｅ　ＢＰＡ浓度／　ＭＤＡ含量／　可溶性蛋白浓度／　ＳＯＤ活性／　（Ｔｒｉｇ・Ｉ　一　）（　ｍ・ｒａｇ一　蛋白）　（　ｇ・ｍｉ　）　（ｕ・ｍｇ　蛋白）　０　６．６０７±０．０５８　１３２．７４９±１．５０１　３．４２３±０．１６６　０．５　８．０６７±０．２５２　１４６．２２８±１．９７０　５．５３３±０．３５１　２　８．５３３±０．５０３　１５２．０７６±２．６９７　６．３３３±０．１５３　８　８．５３３±０．４７３　１４３．７２７士３．４４６　７．６０３±０．１０７　１６　１６．０１２±０．２９８　１３６．８７６±３．３７９　６．１１４±０．２０５　２４　６．９３３±０．２５２　１０１．９４７士５．２９５　１．０６３±０．０４３　注：“　’表示试验组与对照组比较差异显著（　＜Ｏ．０５）；“…’表示试　验组与对照组比较差异极显著（　＜０．０１）。　等植物，在受到外界胁迫时，生物体内均发生了不同　程度的脂质过氧化ｌ１　ｊ。ＭＤＡ的形成和积累量　还可以作为细胞内活性氧自由基增多的衡量指　标口　，在ＢＰＡ胁迫下，藻细胞内活性氧（Ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｏｘｙｇｅｎ　ｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯｓ）合成和清除的动态平衡被打　破，藻细胞受到氧化胁迫。　２．４　ＢＰＡ对铜绿微囊藻ＳＯＤ活性及可溶性蛋白浓　度的影响　超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）是需氧生物细胞内抗氧　化防御系统中的第一道防线［３　，是抗氧化防御系统　中清除ＲＯＳ的关键酶。由表２可见，与对照组相　比，０．５～１６　ｍｇ／Ｉ　的ＢＰＡ使铜绿微囊藻ｓ（）Ｄ活力　增强，因为当细胞遭受氧化胁迫时，抗氧化酶活性增　加，以清除细胞内多余的活性氧自由基；而２４　ｍｇ／Ｉ　ＢＰＡ试验组藻细胞Ｓ０Ｄ活力显著降低，仅为对照　组的３１．１　，表现为显著的抑制作用。这是因为氧　化胁迫超出了藻细胞的防御能力，过量的ＲＯＳ导致　酶和蛋白质变性，抗氧化酶活性被抑制，藻细胞持续　受到氧化损伤，最终导致细胞死亡，这与孙颖颖　等ｌ＿３叩研究的对羟基苯甲酸对米氏凯伦藻ＳＯＤ活性　的影响结果类似。此外，藻细胞ＳＯＤ活性在ＢＰＡ　浓度为８　ｍｇ／Ｉ　时达到最大，而ＭＤＡ含量在ＢＰＡ　浓度为１６　ｍｇ／Ｉ　时达到最大，说明膜系统较Ｓ（１）Ｄ　对ＢＰＡ的耐受性更大；ＳＯＤ活性降低，继而膜损伤　急剧加大，藻细胞正常生理功能受到严重影响。　藻细胞可溶性蛋白浓度与ＳＯＤ活性变化规律　类似。由表２可见，在０．５　ｍｇ／Ｌ、２　ｒａｇ／Ｉ　和８　ｍｇ／Ｌ的ＢＰＡ作用下，藻细胞内可溶性蛋白浓度相　比对照组都显著增加，这与毕相东等　研究得出的　ＴＴＰＣ处理组铜绿微囊藻细胞可溶性蛋白浓度均低　于对照组的不同，推测由于药物结构及毒性不同所　致；２４　ｍｇ／Ｌ　ＢＰＡ试验组藻细胞可溶性蛋白浓度显　著低于对照组，代晓康口　在研究壬基酚对微小小环　藻生长的影响、张庭廷等　在研究亚油酸对铜绿微　囊藻抑制机理的试验中亦得到了相似的结果。推测　高浓度ＢＰＡ使藻细胞可溶性蛋白浓度降低的原因　是：①高浓度ＢＰＡ对铜绿微囊藻产生了胁迫，抑制　了藻细胞生长，藻细胞密度降低，可溶性蛋白浓度降　低；②高浓度ＢＰＡ导致藻细胞内产生大量ＲＯＳ，可　能对蛋白质产生毒害作用，使其失活，或直接抑制了　蛋白质的合成；③衰老细胞容易失水，蛋白质亲水胶　体系统的胶粒逐步失去电荷而相互聚集，使得胶体　失水而分散度降低，导致不溶性蛋白质增多　。　２．５铜绿微囊藻对ＢＰＡ的生物降解作用　研究显示，ＢＰＡ对藻细胞生长及生理产生影响　第５期　杨　璨等：双酚Ａ对铜绿微囊藻生长及生理的影响　２５　的同时，藻细胞对ＢＰＡ也有去除作用。为了探究铜　绿微囊藻对ＢＰＡ的生物降解作用，本试验通过　ＨＰＬＣ检测第７　ｄ时铜绿微囊藻胞内和胞外ＢＰＡ　含量，用初始ＢＰＡ浓度减去胞内、外ＢＰＡ浓度总　和，即为藻细胞降解的ＢＰＡ量，从而计算铜绿微囊　［２３　Ｆｏｌｍａｒ，Ｌ．Ｃ．，Ｎ．Ｄ．Ｄｅｎｓｌｏｗ，Ｖ．Ｒａｏ，ｅｔ　ａ１．Ｖｉｔｅｌｌｏｇｅｎｉｎ　ｉｎｄｕｃ—　ｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ｓｅｒｕｍ　ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｆｅｒａｌ　ｍａｌｅ　ｃａｒｐ（Ｃｙｐｒｉｎｕｓｃａ　ｐｉｏ）ｃａｐｔｕｒｅｄ　ｎｅａｒ　ａ　ｍａｊｏｒ　ｍｅｔｒｏｐｏｌｉｔａｎ　ｓｅｗ—　ａｇｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｐｌａｎｔ［Ｊ］．Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ，　１　９９６，１０４（１０）：１０９６～１１０１．　［３３楼春，黄深琪，徐超．铜绿微囊藻去除环境内分泌干扰物１７１７一雌　二醇的研究ＥＪ］．浙江工业大学学报，２Ｏ１２，４０（１）：２５—２９．　藻对ＢＰＡ的降解率，并以试验中最高浓度（２４　ｍｇ／Ｉ　）ＢＰＡ试验组加入不含藻细胞的ＢＧ１１培养　Ｅ４３李纯茂，张勇，俞宁．环境内分泌干扰物研究进展［Ｊ］．新乡医学　院学报，２００６，２３（６）：６４１—６４３．　基作为对照，其试验结果见图３。由图３可见，铜绿　微囊藻对ＢＰＡ的降解率随着ＢＰＡ初始浓度的增大　而降低。第７　ｄ时，不含藻细胞的ＢＰＡ对照组自然　Ｉｓ］Ｓｔａｐｌｅｓ，Ｃ．Ａ．，Ｐ．Ｂ．Ｄｏｍｅ，Ｇ．Ｍ．Ｋｌｅｃｋ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ｒｅｖｉｅｗ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　ｆａｔｅ，ｅｆｆｅｃｔｓ，ａｎｄ　ｅｘｐｏｓｕｒｅｓ　ｏｆ　ｂｉｓｐｈｅｎｏｌ　Ａ［Ｊ］．　Ｃｈｅｍｏｓｐｈｅｒｅ，１　９９８，３６（１０）：２１４９—２１７３．　降解率仅为０．７　，而ＢＰＡ初始浓度为０．５　ｍｇ／Ｌ　和２　ｍｇ／Ｉ　的试验组ＢＰＡ的降解率分别达到１００　和４６　，可见铜绿微囊藻对ＢＰＡ具有较好的降解　［６］Ｋｉｍ，Ｈ．Ｓ．，Ｓ．Ｙ．Ｈａｎ，Ｓ．Ｄ．Ｙｏｏ，ｅｔ　ａ１．Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｅｓｔｒｏｇｅｎｉｃ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｂｉｓｐｈｅｎｏｌ——Ａ　ｅｓｔｉｍａｔｅｄ　ｂｙ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｃｏｍｂｉｎａ—。　ｔｉｏｎ　ａｓｓａｙｓ［Ｊ］．Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００Ｉ，　２６（３）：ｌｌｌ　１１８．　作用。铜绿微囊藻对ＢＰＡ的降解机理推测为：①将　ＢＰＡ作为能量和营养来源；②ＢＰＡ能够被藻细胞逐　步分解利用；③藻细胞可以通过共代谢作用将ＢＰＡ　分解　。　胞外　１　ＯＯ广———Ｔ＿——广—１　［７３张琴，包丽颖，刘伟江，等．我国饮用水水源内分泌干扰物的污染　现状分析【ｌＪ］．环境科学与技术，２０１１，３４（２）：９１　９６．　［８］刘长．大辽河口典型酚类内分泌干扰物的分布特征和生态风险　评价［Ｄ］．青岛：中国海洋大学，２０１２．　Ｅ９３刘晶靓．滇池鱼类典型环境内分泌干扰物生物富集及毒性效应　ｌ胞内　口降解　——１　——１　可——］≤　习——１　研究［Ｄ］．昆明：昆明理工大学，２０１２．　［１ｏ］刘红玲，刘晓华，王晓蓉．双酚Ａ和四溴双酚Ａ对大型潘和斑马　８Ｏ　鱼的毒性＿Ｊ］．环境科学，２００７，２８（８）：１７８４～１　７８７．　［１１３Ｉｓｈｉｈａｒａ，Ｋ．，Ｎ．Ｎａｋａｊｉｍａ．Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｍａｒｉｎｅ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎ—　６０　ｔａｌ　ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ　ｕｓｉｎｇ　ｅｃｏ—ｓｙｓｔｅｍ：Ｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ　ｄｉｓｒｕｐｔｉｎｇ　ｃｈｅｍｉｃａｌｓ　ｂｙ　ｍａｒｉｎｅ　ｐｈｙｔｏ——ａｎｄ　ｚｏｏｐｉａｎｋ—　４０　∞　ｔｏｎｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏＪ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃａｔａｌｙｓｉｓ　Ｂ：Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ，２００３，　２０　２３（２）：４１９—４２４．　［１２］高玉荣．杀虫剂单甲脒对绿藻的毒性研究［刀．环境科学学报，　０　１９９５，１５（１）：９２　９８．　０．５ｍｇ／Ｌ　８ｍｇ／Ｌ　２４ｍｇ／Ｌ　２　ｍｇ／Ｌ　１６　ｍｇ／Ｌ　２４　ｍｇ几（无藻）　［］３］Ｓｅｍｐｌｅ，Ｋ．Ｔ．，Ｒ．Ｂ．Ｃａｉｎ，Ｓ．Ｓｃｈｍｉｄｔ．Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｒｏｍａｔ—　ｉｃ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｂｙ　ｍｉｃｒｏａｌｇａｅ［Ｊ］．ＦＥＭＳ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　Ｌｅｔｔｅｒｓ，　１９９９，１７０（２）：２９１—３Ｏ０。　ＢＰＡ初始浓度／（ｍｇ・Ｌ　）　图３铜绿微囊藻对不同初始浓度ＢＰＡ的降解率　Ｆｉｇ．３　Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　Ｍ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ　ｏｎ　ＢＰＡ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｊｎｉｔｉａ１ｃ０ｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　［１４］Ｗａｎｇ，Ｊ．，Ｐ．Ｘｉｅ，Ｎ．Ｇｕｏ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｎｏｎｙｌｐｈｅｎｏｌ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｓｓｔｒａｉｎｓ［Ｊ］．Ｅｎｖｉｒｏｎ—　ｍｅｎｔａｌＲｅｓｅａｒｃｈ，２００７，１０３（１）：７０—７８．　［１　５］Ｙａｎｇ，Ｓ．，Ｒ．Ｓ．Ｗｕ，Ｒ．Ｙ．Ｋｏｎｇ．Ｂｉ０ｄｅｇｒａｄａｔｉ。ｎ　ａｎｄ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　３　结论　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍａｒｉｎｅ　ｄｉａｔｏｍ　Ｓｋｅｌｅｔｏｎｅｍａｃｏｓｔａｔｕｍ　ｕｐｏｎ　ｅｘｐｏ—　ｓｕｒｅ　ｔｏ　２，４－ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｏｌ［Ｊ］．Ａｑｕａｔｉｃ　Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，２００２，５９　（３）：１９ｌ一２００．　ＢＰＡ胁迫下，铜绿微囊藻的生长总体呈现“低　促高抑”的规律，同时ＢＰＡ还会对藻细胞的一系列　［１６］曹维，陈建孟，马建义，等．ＭＴＢＥ与雌二醇对螺旋鱼腥藻的联　合毒性［Ｊ］．生态毒理学报，２００７，２（４）：４５０—４５５．　［１　７］代晓康．壬基酚（ＮＰ）对微小小环藻的毒性及其生物降解研究　ＥＤ］．广州：中山大学，２００５．　Ｅ１８］钱晓佳．三种环境激素对杜氏盐藻的联合毒性效应［Ｄ］．广州：　生理过程产生影响。ＢＰＡ会降低主要捕光色素叶　绿素ａ的含量和藻细胞光合活性，增加膜脂质过氧　化程度，抑制抗氧化酶活性，从而破坏藻细胞整体稳　态，影响其生长。此外，铜绿微囊藻对ＢＰＡ具有一　定的生物降解作用，其机制和代谢途径还有待进一　步深入的研究。　参考文献：　［１］Ｋａｖｌｏｃｋ，Ｒ．Ｏｖｅｒｖｉｅｗ　ｏｆ　ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ　ｄｉｓｒｕｐｔｏｒ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　暨南大学，２Ｏ１１．　［Ｉ９］楼春．１７Ｂ一雌二醇与酰胺类除草剂和铜绿微囊藻的相互作用研　究［Ｄ］．杭州：浙江工业大学，２０１１．　［２ｏ］郑朔方，杨苏文，金相灿．铜绿微囊藻生长的营养动力学［Ｊ］．环　境科学，２００５，２６（２）：１５２—１５６．　［２１］邓常清，黄小平，邱咏园，等．黄芪甲苷和三七的三种有效成分配　（下转第３２页）　ｔｈｅ　ｕｎｉｔｅｄ　ＳｔａｔｅｓＥＪ］．ｃｈｅｍｏｓｐｈｅｒｅ，１９９９，３９（８）：１２２７—１２３６．　３２　安全与环境工程　第２１卷　［６］Ｚｈａｎｇ，Ｉ　．Ｙ．，Ｊ．Ｓｕｎ，Ｄ．Ｙ．Ｌｉｕ，ｅｔ　ａ１．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ　ａｎｄ　ｇｒａｚｉｎｇ　ｍｏｒｔａｌｉｔｙ　ｒａｔｅ　ｂｙ　ｍｉｃｒｏｚｏ０ｐｌａｎｋｔｏｎ　ｏｆ　ｓｉｚｅ—ｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄ　［１　７］沈锦兰，林元烧，杨圣云，等．厦门杏林虾池夏冬季微型浮游动物　对浮游植物的摄食压力［Ｊ］．台湾海峡，２００２，２１（１）：３１—３６．　ｐｈｙｔｏｐｌａｎｋｔ０ｎ　ｉｎ　ｓｐｒｉｎｇ　ａｎｄ　ｓｕｍｍｅｒ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｊｉａｏｚｈｏｕ　Ｂａｙ，Ｃｈｉｎａ　［１８］孙军，宋秀贤，殷克东，等．香港水域夏季微型浮游动物摄食研究　［Ｊ］．生态学报，２００３，２３（４）：７ｌ２　７２４．　［１　９］孙军，刘东艳，王宗灵，等．春季赤潮频发期东海微型浮游动物摄　食研究［Ｊ］．应用生态学报，２００３，１４（７）：１０７３—１０８０．　［２０］孙军，刘东艳，王宗灵，等．浮游动物摄食在赤潮生消过程中的作　用［Ｊ］．生态学报，２００４，２４（７）：１　５ｌ４—１　５２２．　［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｏｃｅａｎｏｌｏｇｉｃａ　Ｓｉｎｉｃａ，２００５，２４（２）：８５—１０１．　［７７　Ｃａｌｂｅｔ，Ａ．，Ｍ．Ｒ．Ｌａｎｄｒｙ．Ｐｈｙｔｏｐ１ａｎａｋｔｏｎ　ｇｒｏｗｔｈ，ｍｉｃｒｏｚｏｏｐ—　ｌａｎｋｔｏｎ　ｇｒａｚｉｎｇ　ａｎｄ　ｃａｒｂｏｎ　ｃｙｃｌｉｎｇ　ｉｎ　ｍａｒｉｎｅ　ｓｙｓｔｅｍｓ［Ｊ］．Ｌｉｍ—　ｎｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｏｃｅａｎｏｇｒａｐｈｙ，２００４，４９：５１～５７．　［８］宋金明，徐亚岩，张英，等．中国海洋生物地球化学过程研究的最　新进展［Ｊ］．海洋科学，２００６，３０（２）：８９—７７．　［２１］刘嫒，黄邦钦，曹振锐，等．厦门海域春夏季微型浮游动物对浮游　植物的摄食压力初探［Ｊ］．海洋环境科学，２００５，２４（１）：９—１　２．　［９３中国海湾志编委会．中国海湾志［Ｍ］．北京：海洋出版社，１　９９４．　［ｔｏｉｌ　ａｎｄｒｙ，Ｍ．Ｒ．，Ｒ．Ｐ．Ｈａｓｓｅｔｔ．Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｇｒａｚｉｎｇ　ｉｍｐａｃｔ　ｏｆ　ｍａｒｉｎｅ　ｍｉｃｒｏ—ｚｏｏｐｌａｎｋｔｏｎ［Ｊ］．Ｍａｒｉｎｅ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，１　９８２，６７（３）：　２８３—２８８．　［２２］曾祥波．台湾海峡及厦门海域微型浮游动物及其对浮游植物的　摄食生态学研究［Ｄ］．厦门：厦门大学，２００７．　［２３］曾祥波，黄邦钦．台湾海峡南部夏季微型浮游动物对浮游植物的　摄食压力及其生产力［Ｊ］．台湾海峡，２００６，２５（１）：１　９．　［２４］王学锋，李纯厚，贾晓平，等．大亚湾冬春季微型浮游动物摄食研　究［Ｊ］．海洋环境科学，２００６，２５（１）：４４—４７．　［１１］赵三军，岳海东，肖天．海洋异养细菌生物量与生产力的研究方　法［Ｊ］．海洋科学，２００２，２６（１）：２１—２３．　［１２］Ｆｕｈｒｍａｎ，Ｊ．Ａ．，Ｆ．Ａｚａｍ．Ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ　ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　ａｓ　ａ　ｍｅａｓｕｒｅ　ｏｆ　ｈｅｔｅｒｏｔｒｏｐｈｉｃ　ｂａｃｔｅｒｉｏｐ１ａｎｋｔｏｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｍａｒｉｎｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　［２５］曾祥波，黄邦钦．台湾海峡微型浮游动物的摄食压力及其对营养　盐再生的贡献［Ｊ］．厦门大学学报（自然科学版），２００７，４６（２）：　２３１—２３５．　ｗａｔｅｒｓ：Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｆｉｅｌｄ　ｒｅｓｕｌｔｓ［Ｊ￣．Ｍａｒｉｎｅ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９８２，　６６（２）：１０９一ｌ２Ｏ．　［１３］Ｚｕｖｋｏｖ，Ｍ．Ｖ．，Ｍ．Ａ．Ｓｌｅｉｇｈ，Ｐ．Ｈ．Ｂｕｒｋｉｌ１．Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｌ２６］田皓洁．南海中北部典型海区微型浮游动物及其对浮游植物的　ｂａｃｔｅｒｉｖｏｒｙ　ｂｙ　ｐｒｏｔｅｓｔｓ　ｉｎ　ｏｐｅｎ　ｏｃｅａｎ　ｗａｔｅｒｓ［Ｊ］．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　Ｅｃｏｌｏｇｙ，１９９８，２７：８５—１０２．　摄食研究［Ｄ］．厦门：厦门大学，２００７．　［２７］杨青，曹文清，林元烧，等．厦门港表层水体磷周转的生物学过程　研究Ｉ．微型浮游动物对浮游植物的摄食［Ｊ］．海洋学报，２００８，　３０（１）：１７２—１　７８．　［１４］Ｋｏｔｏｎ—Ｃｚａｒｎｅｃｋａ，Ｍ．，Ｒ．Ｊ．Ｃｈｒｏｓｔ．Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｐｒｏｔｏｚｏａｎ　ｇｒａｚｉｎｇ　ｏｎ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｂｙ　ｍｅａｎｓ　ｏｆ［　Ｈ—ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ］ｌａｂｅｌｅｄ　ｎａｔｕｒａｌ　ａｓｓｅｍｂｌａｇｅｓ　ｏｆ　ｌａｋｅ　ｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］．Ｐｏｌｉｓｈ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎ—　ｔａｌ　Ｓｔｕｄｉｅｓ，２００２，１１（４）：３８５　３９３．　［２８］李亚治．福建东山湾水质状况分析与污染防治对策［Ｊ］．海洋环　境科学，２０００，１９（２０）：６４～６７．　［１　５］张武昌，王荣．渤海微型浮游动物及其对浮游植物的摄食压力　［Ｊ］．海洋与湖沼，２０００，３ｌ（３）：２５２—２５８．　［１６］李超伦，孙松，吉鹏，等．南极普里兹湾边缘浮冰区微型浮游动物　的摄食及其氮的排泄ＥＪ］．海洋与湖沼，２０００，３１（６）：６５７—６６３．　蛤　＃　坊　石　写　写　分　［２９］张静，陈永俊，宋普庆，等．福建东山湾游泳动物群落物种组成及　其多样性口］．海洋渔业，２０ｌ３，３５（ｉ）：ｌ５　２３．　［３ｏ］杨明松．东山湾海域表层海水油类污染分布特征分析［Ｊ］．福建　水产，２０１　３，３５（２）：１４７—１５ｏ．　：　、　、蛉、蛤蛉　、　；　０　、呀精、　、％　　、矗、Ｌ；　（上接第２５页）　伍对小鼠脑缺血再灌注后氧化应激和Ｎｒｆ。／ＨＯ　ｌ途径的影响　［Ｊ］．中国药理学通报，２Ｏ１３，２９（１１）：１　５９６—１６０１．　Ｅ２２］袁娇．氧化应激在ＬＰＳ诱导小鼠肺巨噬细胞自噬中的作用机制　［Ｄ］．泸州：泸州医学院，２Ｏ１２．　［２３］Ｑｉａｎ，Ｊ．，Ｆ．Ｊｉａｎｇ，Ｂ．Ｗａｎｇ，ｅｔ　ａ１．Ｏｐｈｉｏｐｏｇｏｎｉｎ　Ｄ　ｐｒｅｖｅｎｔｓ　ＨｅＯ２　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｈｕｍａｎ　ｕｍｂｉｌｉｃａｌ　ｖｅｉｎ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉ——　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，２０１２，４１　６：５０１—５０６．　［２９］Ａｌｌ，Ｍ．Ｂ．，Ｅ．Ｊ．Ｈａｈｎ，Ｋ　Ｙ　Ｐａｅｋ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｏｆ　Ｅｃｈｉｎａｃｅａ　ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉａ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｒｏｏｔｓ　ｔｏ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　Ｃ（）２　ｉｎ　ｈｉｏｒｅａｃｔｏｒ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ［Ｊ］．Ｅｎｚｙｍｅ　ａｎｄ　Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　１、ｅｃｈｎｏｌ　ｏｇｙ，２００６，３９（５）：９８２—９９０．　［３ｏ］孙颖颖，刘筱潇，阎斌伦，等．对羟基苯甲酸对２种赤潮微藻生长　的影响ＥＪ］．环境科学与技术，２０１０，３３（７）：３６—３９．　Ｌ３１ＪＳｏｎｇ，Ｎ．Ｈ．，Ｘ．Ｌ．Ｙｉｎ，Ｇ．Ｆ．Ｃｈｅｎ，ｅｔ　ａ１．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｏｆ　ｗｈｅａｔ（Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ）ｐｌａｎｔｓ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｈｅｒｂｉｃｉｄｅ　ｃｈ１０ｒ０ｔｏｌｕｒｏｎ　ａｌ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｅ　＾　０　ｈ口ｒｍ口ｆ０￡０ｇ　，２０１０，１２８（２）：４３８　４４５．　［２４］Ｚｈｏｕ，Ｇ．Ｊ．，Ｆ．Ｑ．Ｐｅｎｇ，Ｂ．Ｙａｎｇ，ｅｔ　ａ１．Ｃｅｌｌｕｌａｒ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ａｎｄ　ｂｉｏｒｅｍｏｖａＩ　ｏｆ　ｎｏｎｙｌｐｈｅｎｏｌ　ａｎｄ　ｏｃｔｙｌｐｈｅｎｏｌ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｆｒｅｓｈｗａｔｅｒ　ｉｎ　ｓｏｉｌｓ［Ｊ］．Ｃｈｅｍｏｓｐｈｅｒｅ，２００７，６８（９）：ｌ７７９—１　７８７．　［３２］贺勇，严家平．淮河中下游底泥中ＰＡＨｓ的分布及其生态风险　评价［Ｊ］．生态环境，２００６，１　５（５）：９４９—９５３．　［３３］Ｆｏｙｅｒ，Ｃ．Ｈ．，Ｐ．Ｍｕｌｌｉｎｅａｕｘ．Ｃａｕｓｅｓ　０，Ｐｈｏｔｏｏ．ｒｉｄａｔｉｖｅ　Ｓｔｒｅｓｓ　ｇｒｅｅｎ　ｍｉｃｒｏａｌｇａ　Ｓｅｅｎｅｄｅｓｍｕｓｏｈｔｉｑｕｕｓ［Ｊ］．Ｅｃｏｔｏｘｉｃｏ１．Ｅｎｖｉｒｏｎ．　Ｓａｆ．，２０１３，８７：１０—１　６．　［２５］傅海燕，柴天，赵坤，等．水网藻种植水对铜绿微囊藻生长的抑制　作用研究［Ｊ］．环境科学，２０１２，３３（５）：ｉ５６４　１　５６９．　［２６］陈建明，俞晓平，程家安．叶绿素荧光动力学及其在植物抗逆生　理研究中的应用［Ｊ］．浙江农业学报，２００６，１８（１）：５１　５５．　［２７］庞士铨．植物逆境生理学基础［Ｍ］．哈尔滨：东北林业大学出版　社，１９９０．　ａｎｄ　Ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＤｅＪｅｎｓｅ　Ｓｙｓｔｅｍｓ　ｉｎ　Ｐｌａｎｔｓ［Ｍ］．Ｆｌｏｒｉｄａ：　ＣＲＣ　Ｐｒｅｓｓ　Ｉｎ［，１　９９４．　［３４］毕相东，刘红玉，杨雷，等．ＴＴＰＣ对铜绿微囊藻生长及生理的影　响ＥＪ］．环境科学与技术，２０１１，３４（８）：３８—４１．　［３５］张庭廷，郑春艳，何梅，等．亚油酸对铜绿微囊藻的抑制机理［Ｊ］．　中国环境科学，２００９，２９（４）：４１９—４２４．　［３６］管超，孙志伟，安民，等．壬基酚对球形棕囊藻的生态毒性效应　［２８］Ｇａｔｔｕｌｌｏ，Ｃ．Ｅ．，Ｈ．Ｂｆｉｈｒｓ，Ｃ．Ｅ．Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｍｏｖａｌ　ｏｆ　ｂｉｓ—　ｐｈｅｎｏｌ　Ａ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｆｒｅｓｈｗａｔｅｒ　ｇｒｅｅｎ　ａｌｇａ　Ｍｏｎｏｒａｐｈｉｄｉｕｍｂｒａｕｎｉｉ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｎａｔｕｒａｌ　ｏｒｇａｎｉｃ　ｍａｔｔｅｒ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｔｏｔａｌ　［ｊ］．生态环境学报，２０１１，２０（４）：６４０—６４５．