马属动物住肉孢子虫感染情况调查及形态学观察

・３４・　《上海畜牧兽医通讯》２００８年第２期　马属动物住肉孢子虫感染情况调查及形态学观察　张国仓　杨继元　卫　兰　冯增芳　李业武　王连生　（１青海省大通县畜牧兽医工作站８１０１００　２青海省大通县动物检疫站明显，如图２。　８１０１００）　住肉孢子虫病是由多种肉孢子虫（ｓａｒｃｏｃｇｓｉｔｉｓ）寄生于哺　乳动物、鸟类、爬行类、鱼类等多种动物和人的寄生虫病，分　布广泛，感染率高，对人畜危害较大。各种住肉孢子虫均为　异宿主寄生，终末宿主是犬、狐和狼等肉食动物，寄生于小肠　上皮细胞内；中间宿主是草食动物、禽类、啮齿类和爬行类　等，住肉孢子虫寄生于中间宿主的肌肉内，人可作为某些住　肉孢子虫的中间宿主或终末宿主，因此有些住肉孢子虫是人　畜共患寄生虫。目前已证实，有些住肉孢子虫具有较强的致　病性，严重感染时能够引起动物死亡，但对终末宿主犬、猫则　无明显致病性。人食人牛、猪等中间宿主肌肉中的肉孢子虫　囊后，在人肌肉中的肉孢子虫囊可破坏所侵犯的肌细胞，当　长大时可造成邻近细胞的压迫性萎缩，伴有肌痛、皮下肿胀　等，如果囊壁破例，可释放出一种很强的毒素一肉孢子毒素　（ｓａｒｃｏｃｇｓｔｉｎ），作用于肌纤维，可使之变性、坏死，导致肌纤维　发生炎症。近几年，随着机械化程度的提高和畜种结构调　整，饲养马属动物越来越少，对其感染肉孢子虫病的研究、报　道也较少，因此为了解马属动物住肉孢子虫的感染情况，作　者于２００７年４月至２００７年１０月期间，对大通县宰马场屠宰　的马胴体中的住肉孢子虫感染情况进行了调查，并对其形态　学进行了观察。　ｌ材料与方法　１．１　调查对象：首先登记马属动物的来源，观察生前健康　状况，然后在屠宰后的马胴体上采集膈肌、食道肌、心肌、咽　喉肌、半膜肌、股二头肌和背最长肌各１０　ｇ，编号，分别放入　青霉素瓶中，带回化验室进行镜检。　１．２　检查方法：运用病原学调查方法，首先剥去肉样肌膜，　肉眼观测，然后分别称取膈肌、食道肌、心肌、咽喉肌、半膜　肌、股二头肌和背最长肌各０．１　ｇ，沿肌纤维的方向剪切麦粒　大小后，置于两块载玻片之间，压平至半透明，在显微镜的暗　视野下（１０×１０）检查。　１．３　判定：凡在肉样中检出包囊者，即判为阳性，并观察其　虫体的形态、大小，统计计数，计算感染率、感染强度。　２　结果　２．１　被检查的２００匹马胴体中，检查出感染住肉孢子虫的　２１匹，感染率为１０．５％，每０．１　ｇ肌肉中，感染强度在１～１２　之间，平均感染强度３、６，不同部位感染状况详见表１。　表１不同部位马属动物住肉孢子虫感染情况　２．２　镜检出的虫体呈现不同的形态，有长椭圆、梭形、长纺　锤形、内含半月形孢子，外有包囊。膈肌主要以长纺锤形为　主，见图１；心肌以长椭圆形为主，见图２、３；食道肌以梭形为　主。见图４。虫体一般寄生在肌纤维之间，但有个别虫体在　载玻片挤压下，挤压出肌纤维外，所以此时观测到虫体清晰、　一　图１　马属动物住肉孢子虫在膈肌中形态　图２马属动物住肉孢子虫心肌中形态。虫体清晰。可见清晰孢子囊　图３马属动物住肉孢子虫在心肌中形态。孢子虫部分扭曲　图４ｉ一马属动物住肉孢子虫在食道肌中形态　　　２．３　在镜检时只在膈肌、食道肌、心肌中发现了虫体，其它　部位肌肉中没有发现虫体。　２．４　膈肌、心肌、食道肌的感染率分别为：５．５％、６．５％、　１０．５％，这说明马属动物住肉孢子虫在食道肌感染率高，在　其它部位感染率低。感染强度来看，每０．１　ｇ肌肉中有１～　２１个，平均感染强度在３．６，不同部位其感染强度不同，食道　肌较高，说明食道肌是寄生虫寄生较多的部位。　２．５　调查发现，住肉孢子虫与因马属动物的来源不同其感　染情况也有差别，此次检查出的感染住肉孢子虫的马匹全部　来自牧区，而从农区收购的马属动物没有检查出住肉孢子　虫。住肉孢子虫在马、骡、驴种间无差别。　３讨论　３．１　据报道马属动物住肉孢子虫感染率较高，而这次我们　调查的结果表明，大通县马属动物住肉孢子虫的感染率为　１０．５％，这可能与动物饲养管理方式的不同有关，在农区饲　维普资讯 http://www.cqvip.com 《上海畜牧兽医通讯》２００８年第２期　・　３５　・　犬细小病毒病的血清学调查　蔡金山　沈德贵　李桂兰　（青海省动物疫病预防控制中心犬细小病毒是由细小病毒科（Ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓｉｄａｅ）细小病毒属　８１０００１）　２　结果　检测犬血样１４５份，检出阳性３４份，阳性率为２３．４５％。　其中检测西宁市区５８份，检出阳性１２份，阳性率２０．６９％；　格尔木市２７份，检出阳性９份，阳性率３３．３３％；德令哈市３０　份，检出阳性８份，阳性率２６．６７％；乐都县３０份，检出阳性５　份，阳性率１６．６７％。详见表１。　表ｌ　犬细小病毒感染情况检测统计　（Ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ）犬细小病毒（Ｃａｎｉｎｅ　ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ　ｃＰｖ）引起犬科动　物的一种烈性传染病。临床可分为出血性肠炎和非化脓性　心肌炎两个类型。近年来随着养犬数量的增多和养犬规模　的不断扩大，致使犬细小病毒病Ｅｔ趋流行，加之该病发病急，　死亡率高，危害Ｅｔ渐严重。为掌握青海地区犬细小病毒病感　染情况，２００６年９月我们抽取青海省西宁、乐都、格尔木、德　令哈地区未经免疫的犬血清１４５份进行了感染检测。　１材料与方法　１．１　诊断试剂：北京世纪元亨公司生产的犬细小病毒抗体　诊断试剂盒。　１．２待检血清：西宁、乐都、格尔木、德令哈犬血样１４５份。　采集后摆成斜面，放在室温待血清析出后收集血清，一２０℃　冷冻保存待检。　３发病情况调查　据在互助、民和、泽库、西宁、称多、玉树、大通、刚察、格　１．３　犬细小病毒抗体酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）：（１）待检　血清在板孔外用样品稀释液作１：１６倍预稀释备用，阴、阳性　对照不稀释。（２）在反应板各孔中加入１００　ｌ样品稀释液，　再分别在相应孔中加入经预稀释的待检血清１０　，然后在　对照孔中分别加入１０　ｌ阴、阳性对照。阴阳性对照各加２　孔，充分混匀后，贴上封板膜，置３７℃温育２０　ｒａｉｎ。（３）揭掉　封板膜，弃去各孔中液体、拍千。每孔加满洗涤液，静置约　３０　ｓ，如此重复洗涤５次，最后一遍拍干。（４）每孔加入经过　稀释的酶结合物液１００“ｌ，贴上封板膜，置３７℃温育２０　ｒａｉｎ。　（５）同３法洗板５次。（６）每孔加入底物液Ａ　５０　ｌ，再加入底　物液Ｂ　５０“ｌ，轻拍混匀，置３７℃避光显色１０　ｒａｉｎ。（７）每孔　加入终止液５０　ｌ，轻轻振荡，置酶标仪４５０　ｎｍ波长处测定　尔木、德令哈、乐都、同仁、海晏等县（市）调查，近几年犬发生　细小病毒病７８　５９３例，发病率为３７．３６％（发病范围２３．４６％　４９．４６％），死亡１６　２２８例，致死率２１．９８％，其中肠炎型发　病６３　８５７例，占总发病数的８１．２５％。　犬细小病毒病一年四季均发生和流行，但以冬、春季节　流行最为严重，母犬发病比例大于公犬，幼犬大于成年犬。　～４结论与分析　４．１　我省犬细小病毒病检出阳性率高达２３．４５％，表明我　省饲养的犬体内存在犬细小病毒病。我省各地发生犬细小　病毒病大多数病例为犬自身带毒，在气候、饲养条件发生变　化后，抵抗力下降，应激引起发病，并造成传染。　４．２　在西宁、海晏等部分地区调查，引进宠物犬直接带入　细小病毒病，并引起当地土种犬的传染，造成大量死亡，因此　做好引进犬的检疫是防止犬细小病毒病发生的重要环节。　４．３　免疫接种是目前预防和控制犬细小病毒病的一种有　效技术措施，而我省犬类的总体免疫率很低，今后应加大实　施犬的免疫，并进行定期的血清学检测和流行病学调查，防　止疫情的发生。　ＯＤ值。（８）试验成立条件：阳性对照ＯＤ值≥０．６，阴性对照　ＯＤ值≤０．１，阴性对照若有一孔大于０．１应舍弃，如果两孔　ＯＤ值都大于０．１，应重复试验。（９）结果判定：计算临界值　Ｃｕｔ　ｏｆｆ　（阳性对照ＯＤ平均值一阴性对照ｏＤ平均值）×　０．１＋阴性对照ＯＤ平均值，待检样本ＯＤ值≥临界值为阳　性，ｏＤ值小于≤临界值为阴性。　养的马属动物一般是栓养，很少放牧，而牧区大多数的马属　动物以放养为主，接触卵囊的机会就多，增加了感染机会。　３．２　调查发现从宰马场出场的各种马产品，如马肉等主要　从事动物食品加工的初产品，与人们的生活习惯有很大的关　系，往往引起人住肉孢子虫感染的机会，所以在食品卫生方　面引起高度的重视。　３．３　调查发现，宰马场的下脚料部分直接有喂狗的习惯，　如果这样，就增加了终末宿主与中间宿主马属动物接触机　４．２　随着社会宠物热的出现，养狗户、养猫户逐渐增多，这　就给该病的传播增加了机会，建议各级动物防疫部门要加大　该病对人体危害的宣传力度，采取适当的措施防止猫、犬等　宠物对该病的传播，若有饲养犬、猫的家庭同时要注意个人　卫生，防止食入犬、猫粪便中的卵囊或孢子囊。　４．３　终末宿主狗等的粪便是主要的传染源，因此对护养犬　会，往往形成了生活史的完整统一，马属动物易发住肉孢子　虫，因此圈养马属动物且大量驱虫是消灭住肉孢子虫的有效　措施之一。　等应进行驱虫，驱虫后应清理，粪便用生物发酵处理。　４．４　屠宰检疫时，将该病列入检疫范围，感染该病的肉类　要废弃、销毁，不要喂犬、猫等其他动物。　４．５　随着社会发展，畜牧结构调整，马属动物在农牧区逐　渐减少，因而也忽视了对马属动物的疫病防治和监控，建议　对马属动物相关产业的开发应给予支持，并加强对马属动物　的疫病检测。　参考文献　［１］北京农业大学．家畜寄生虫学（Ｍ］．农业出版社，４３６～４３８　（２］张仲秋．人畜共患病培训教材（Ｍ］．农业部兽医局／中国动物疫病　预防控中心编，２３４～２４１　３．４　本次调查虽然表明大通县马属动物住肉孢子虫的存在，　但其生活史、流行病学、致病性等如何，尚待今后进一步研究。　４建议　４．１　首先在公共卫生方面，人们要改变不良的生活习惯，　尽可能不要食半生半熟的马肉、狗肉等，避免感染住肉孢子虫。