多酚类化合物的研究进展
2022-12-16
来源:乌哈旅游
2015年6月 第17卷第6期 中国现代中药Modem Chinese Medicine ・综述・ 多酚类化合物的研究进展△ 吴建华,吴志瑰,裴建国,刘婧,孙艳朝,伍国芳,彭水梅,付小梅 (江西中医药大学药学院,江西南昌330004) [摘要] 多酚类化合物是一类复杂的具有多个酚羟基的次生代谢产物,广泛分布于植物中,具有抗氧化、清除 自由基、降血脂等作用。本文对其分类、提取方法、检测方法及其药理活性进行综述,为其开发利用提供依据。 [关键词] 多酚类;检测方法;药理活性 Advances in Studies Oil Polyphenols WU Jianhua,WU Zhigui,PEI Jingguo,LIU Jing,SUN Yanchao,WU Guofang,PENG Shuimei,FU Xiaomei (Department ofPharmacy,Jiangxi University f oTraditional Chinese Medicine,Jiangxi 330004,China) [Abstract]Polyphenols ale a class of complex secondary metabolites which have more phenolic hydroxyl groups.They are widely distributed in plants and possess antioxidant,free radical scavenging and lipid-lowering effects.In this review,the classification,extraction methods,detection methods and pharmacoloicagl activity of polyphenols were summarized for further research. [Keywords]Polyphenols;extraction methods;detection methods;pharmacological activity doi:10.13313/i.issn.1673-4890.2015.6.025 多酚类化合物是一类复杂的具有多个酚羟基的 次生代谢产物,其分布非常广泛,如蔬菜、水果、 植物等,具有抗氧化性、清除自由基¨j、降血脂、 降血压、降血糖 4。、抗癌 、抗衰老 、镇痛、 抗炎、抗菌等作用。本文对多酚类化合物的分类、 复杂,按化学结构分为聚桔酸酯 m (包含水解单宁 及相关的化合物)和聚黄烷醇类(包含缩合单宁及相 关的化合物)两大基本类型,见表1。 表1多酚类化合物的分类 碳架结构 C C6一C1 C6-C2 种类 简单酚类、苯醌类 羟基苯甲酸类 苯乙酸、苯乙酮类 提取方法、检测方法及其药理活性进行综述,为其 开发利用提供依据。 1 多酚类化合物的分类 C6-C3 羟基肉桂酸类、香豆素类、苯丙烯类 萘醌类 氧杂蒽酮类 多酚类化合物在自然界的储存量非常丰富,广 泛存在于植物体的皮、根、叶、果肉中 J,如覆盆 子多酚、苹果多酚、葡萄多酚、茶多酚、石榴皮多 酚等,在一些针叶树的树皮中其含量甚至可高达 40%。多酚类化合物是分子中具有多羟基化合物的 总称,包括了低分子量的简单酚类到具有高聚合结 C6一C4 C6-c1一c6 C6-C2一c6 芪类、蒽醌类 c —c,一c (c6一c3)2 黄酮、异黄酮、黄烷酮、黄烷醇、黄酮醇、花色苷 木脂素类 (C6-C3一C6)2双黄酮类 构的大分子聚合物,多数情况下酚类化合物和单糖 或多糖相结合,同时还以衍生物的形式存在,结构 (c6-c3) 木质素类 (C6一C3-C6) 缩合单宁 【基金项目] 国家自然科学基金项目(81360620);江西省青年科学基金(20114BAB215044);江西省教育厅科技项目 (GJJ12517);江西省卫生厅中医药科研项目(2012A023,2013A049);2013年大学生创新创业教育计划 (201310412012) [通信作者] 付小梅,博士,副教授,研究方向:中药品质评价;Tel:(0791)87118997,E—mail:smilefxm@163.corn ・630・ 2015年6月 第17卷第6期 中国现代中药Modern Chinese Medicine Jun.2015 Vo1.17 No.6 2 多酚类化合物的提取方法研究 多酚类化合物提取方法多种多样,广泛使用的 方法有有机溶剂萃取法、超临界CO:萃取法、超声 波辅助萃取法、微波辅助萃取法和生物酶解萃取 法等。 2.1有机溶剂萃取法 有机溶剂萃取法是最常用的一种提取方法,不 同物质在不同溶剂中的溶解度不同,根据“相似相 溶”的原则,在一定的条件下将目标物质分离出来。 该方法提取效果受溶剂极性大小、溶剂酸碱度、提 取温度、溶剂容积、与样品接触的表面积和提取次 数等多种因素影响。该方法成本低且操作简单,被 广泛使用。常用的溶剂有乙醇、甲醇、石油醚、丙 酮等。贤景春等¨ 采用乙醇溶剂萃取法研究金丝草 总多酚提取工艺及抗氧化性结果表明,最佳参数为: 乙醇质量分数50%,时问1 h,料液比1:30(g:mL), 提取温度8O℃。在此提取条件下,金丝草多酚总含 量为4.14 mg・g~,且金丝草提取物有较好清除羟基 自由基的能力,提取效果好,多酚含量较高。黄秋 森 介绍了以质量分数75%的乙醇为提取溶剂、三 氯甲烷为去杂萃取剂、乙酸乙酯为纯化萃取剂生产 茶多酚的工艺流程、相关装置和生产过程,得到的 产品茶多酚质量分数大于94.6%,其中活性成分儿 茶酚总量达80.0%。 2.2超声波辅助萃取法 超声波辅助提取的机理源于其空化作用带来的 强化动力,该作用引起了微扰效应、湍动效应、聚 能效应和界面效应等¨ 。与溶剂提取法相比,该法 时间短、提取率高、成本低、污染小、操作简单方 便,容易实现产业化¨ 。 胡明明等 采用响应面法对超声辅助提取花生 壳多酚的工艺条件进行优化,在单因素试验的基础 上结合Box.Benhnken试验和响应面分析法,得到了 花生壳多酚的最佳提取工艺,结构预测值和实际测 得值相近,模型良好。周芳等¨ 在单因素试验的基 础上,选择料液比、超声波功率、提取时间为自变 量,以多酚得率为响应值,采用Box—Benhnken法设 计三因素三水平的响应分析试验,最佳工艺条件为: 料液比1:33、超声波功率301 W、提取时间2.4 h, 乙醇质量分数40%,温度60℃。在此条件下,红皮 云杉多酚的得率为18.92%。 2.3微波辅助萃取法 微波是一种电磁波,主要以波的形式向外传播, 能够渗透到生物学和水等极性分子,产生热量。近 年来微波辅助萃取技术被广泛用于生物化学、食品 加工、工业样品和环境样品等各领域的分析和提 取中。 周海旭等 以樟树叶为原料,采用微波辅助乙 醇法提取樟树叶中的多酚,利用正交试验方法优化 提取工艺条件,结果表明:当微波处理时间为 6 min,料液比为1:60,温度为80℃,乙醇质量分 数为80%时,提取液中樟树多酚得率最高为 54.05 mg・g一。与传统的溶剂萃取法相比,微波辅 助萃取法具有选择性强、效率高、对环境无污染、 质量稳定等优势,是一种可推广应用的技术。 2.4生物酶解萃取法 生物酶解技术是基于酶解作用能选择性地破坏 植物细胞壁,从而使植物细胞内的成分更容易溶解、 扩散,具有成分浸出率高、减少热敏成分降解、成 本低廉、操作简单的特点,且有大规模工业化生产 的潜力。该技术已经广泛用于多糖、生物碱、黄酮、 皂苷、蛋白质、有机酸等中药有效成分的提取,与 传统提取技术相比具有明显的优势¨ 。 谢蓝华等 以单枞茶为实验材料,研究复合酶 解辅助乙醇提取茶多酚的工艺条件,考察酶解温度、 酶添加量、酶解pH、酶解时间、乙醇质量分数、料 液比、提取时间、提取温度8个单因素对茶多酚提 取率的影响,在单因素试验的基础上,通过正交试 验优化提取工艺参数,结果表明:酶解温度60℃、 酶添加量3.5%、酶解pH 4.8的条件下酶解预处理 3 h后,在乙醇质量分数为60%、提取温度为70℃、 料液比为1:50的条件下提取1.5 h,茶多酚的提取 率达25.82%,与传统水提法相比,茶多酚提取率提 高了69.87% 3 多酚类化合物的检测方法 目前,常用的检测多酚类化合物的方法包括高 锰酸钾滴定法、Folin-Ciocalteu比色法、分光光度 法、高效液相色谱法等。 3.1高锰酸钾滴定法 高锰酸钾滴定法是传统的测定方法,具有一定 的代表性。它是利用多酚类化合物中酚羟基的还原 性,以0.1%靛红溶液为指示剂,使用高锰酸钾滴定 ’ ・631・ 2015年6月 第l7卷第6期 中国现代中药Modern Chinese Medicine 法测定食品中的多酚类物质含量。其优点是高锰酸 钾氧化能力强,能与许多物质起反应,应用范围广。 通过对高锰酸钾用量的研究发现,高锰酸钾标定后 存贮于棕色瓶中比较稳定,以后使用时不需要再次 标定 ;也有些学者对此法进行了不同研究改进, 为了避免因靛红不纯而造成的终点不敏锐的现象, 陈孝权等 钊对分光光度法测定茶叶中茶多酚含量不 确定度的来源进行分析和评估,主要探究标准工作 曲线、提取母液的定容、样品称量、样品干物质含 量、提取母液稀释及多次重复测量等因素对茶多酚 含量测量不确定度评估的影响,结果表明,测试液 标准工作曲线校正是影响茶多酚含量测量的主要因 采用对靛红进行磺化后置于棕色瓶中贮存 。 3.2 Folin—Ciocaheu比色法 素,其相对合成标准不确定度为9.21×10~,茶样 的茶多酚测量结果为25.38%,取包含因子k=2, Folin—Ciocaheu比色法是在Folin—Denis法的基础 上做些变动。Folin—Ciocalteu试剂中的钨钼酸可以将 多酚类化合物定量氧化,自身被还原(使w¨变为 W¨)生成蓝色的化合物_2 ,颜色的深浅与多酚含 量呈正比,因此可以通过比色方法来对多酚进行 定量。 蔡文国等 采用Folin—Ciocalteu法测定鱼腥革 多酚的含量,运用不同的溶剂超声提取鱼腥草叶片, 比较不同时间提取物用Folin.Ciocalteu法测得的吸光 度。结果发现甲醇提取效率最高,其次为乙醇、丙 酮和水;提取时间2 h;较适宜测定方法为采用 0.5 mL提取液,加入2.0 mL 20%的碳酸钠缓冲液, 1.5 mL Folin—Ciocalteu显色剂,蒸馏水定容至 50.0 mL,55 oC保温1。5 h,测定波长为760 nm。唐 金华等 以没食子酸为对照品,采用Folin.Ciocaheu 比色法测定阜康阿魏叶中总多酚的含量。结果没食 子酸对照品质量浓度在0.002—0.006 g・mL 与吸光 度呈良好的线性关系(r=0.999 6);阜康阿魏叶中 总多酚含量为4.99 mg・g~,RSD为0.52%;样品 溶液在0~10 h基本稳定(RSD=1.2%);精密度试 验RSD为1.1%;重复性试验RSD为1.1%;平均 回收率为101.0%(RSD=1.7%)。 3.3分光光度法 分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特 定波长处的辐射吸收程度的测量。波长长(频率小) 的光线能量小,波长短(频率大)的光线能量大。多 酚类化合物的峰值吸收波长特征为:紫外吸收光谱 处于210~215 nm段的为多酚类化合物的E2或K 带,处于230—235 nm和275~280 HITI段的为多酚 类化合物的B带,处于270~280 nm段的是天然酚 型儿茶素单体的特征吸收,在305~310 nm段处有 较弱吸收峰。 刘硕谦等 采用紫外分光光度法检测水皂角总多 酚的含量,皂角总多酚含量为0.032~0.146 mg・g~。 .632・ P=95%时,扩展不确定度为0.66%。陈方剑等 用紫外一可见分光光度法测定感冒安颗粒中总酚酸的 含量,以没食子酸为对照品,在760 nm处用紫外. 可见分光光度法测定总酚酸的含量,没食子酸质量 浓度在1O~6O g・mL一与吸光度呈良好线性关系 (r=0.999 8),用紫外.可见分光光度法测定感冒安 颗粒中总酚酸含量的加样回收率为(100.72± 2.53)%(n:9),精密度、重复性和稳定性良好。 3.4高效液相色谱法 高效液相色谱法应用不同溶液中分子的组成有 差异的现象,表现出分子量小的成分最先从色谱柱 内流出,而分子量越大的成分流出的时间越长,检 测器通过检测到的信号,最终把数据以图谱形式显 示出来。高效液相色谱法的分离效率高、检测灵敏 度高、选择性好、操作自动化、应用范围广。但分 析成本高、分析时间长、仪器的日常维护费用高且 流动相大多有毒性。 易湘茜等 副利用高效液相色谱法测得了菠萝中 的多酚类物,并分析比较了菠萝中果皮、果肉、果 心中的含量及分布情况,结果发现,菠萝中各个部 分均含有表儿茶素,其含量多少依次为:果皮>果 肉>果心;果皮中还含有较多的儿茶素、阿魏酸及 少量的没食子酸;均没有检测出儿茶酚、绿原酸及 黄酮。孙承锋等_2 建立了苹果多酚的反相HPLC检 测方法,结果表明,红富士苹果的多酚类成分主要 包括绿原酸、对香豆酸、(+)-儿茶素、(一)一表儿 茶素、芦丁、原花青素B、根皮苷等。李福娟等 采用反相高效液相色谱法分离测定了实际烟草样品 中芸香苷和绿原酸的含量。 3.5干酪素法 实验中干酪素作为多酚的吸附剂,可以选择性 地吸附有活性的多酚。干酪素法原理:在碱性溶液 中,钨钼酸通过多酚类化合物被还原,生成了蓝色 的化合物,而多酚含量直接决定着蓝色化合物的颜 2015年6月第17卷第6期 中国现代中药Modern Chinese Medicine 色,并且在大约760 nm波长处有最大吸收 。干 酪素的优点在于其样品价格低廉并且用量少。而缺 点是在760 nm处时干酪素中含有某些干扰杂质,需 要增加一个干酪素的空白对照实验,使实验操作变 得复杂。包志华等 采用干酪素法测定蒙药色木槭 中鞣质的含量,优化条件为:20目色木槭粉, 100 mL 30%甲醇提取0.5 h,干酪素用量300 mg, 1.5%碳酸钠显色后15 min测定,结果发现,优化方 法线性良好,鞣酸平均回收率为98.92%,表明该方 法简单、稳定、可靠。吴玲芳等 采用磷钼钨酸/ 干酪素分光光度法测定了8个不同产地藏药余甘子 中总鞣质的含量,结果发现不同产地余甘子药材总 鞣质含量差别较大(6.72%一11.95%),其中印度和 尼泊尔产余甘子中总鞣质含量最高。 3.6核磁共振波谱法 不同的多酚类化合物其结构不同,有一些结构 复杂的多酚类化合物,可以采用核磁共振波谱进行 鉴定。目前,对于使用核磁共振波谱来检测多酚类 化合物的报道还比较少,这可能是由于其价格昂贵, 程序比较复杂,不易操作。但核磁共振波谱法也有 其自身的优点:耗时少、操作简单、专一性强、重 现性高 。 4多酚类化合物药理作用研究 多酚类化合物由于具有多种生物活性,因此对 人体的健康也有较大影响。研究表明,植物多酚的 药理活性主要包括抗氧化、抗菌、抗病毒、抗肿瘤 和抑制心血管疾病等方面。 4.1抗氧化活性 自由基的氧化损伤作用不仅是导致或加速衰老 的重要因素,而且广泛存在于多种疾病的病理过程 中。因此,寻找清除自由基以及对抗过氧化反应的 药物和方法成为热点。现代医学研究证明,很多疾 病如组织器官老化等都与过剩的自由基有关。另外, 邻苯二酚或邻苯三酚等酚羟基结构赋予了植物多酚 较强的自由基清除能力和抗氧化能力,因为邻位酚 羟基不仅可被氧化成醌类结构,而且具有很强的捕 捉活性氧等自由基的能力。 近年来,人们越来越多地开始关注和探索植物 多酚的抗氧化活性。Fukumoto_3 报道大多数多酚化 合物在低浓度下具有抗氧化活性,许多酚类化合物 和多酚提取物的抗氧化性可以比得上合成氧化剂。 Lamien.Meda等 利用DPPH、FRAP和ABTS法测 定14种可食水果的抗氧化活性,发现表现出高氧化 性的水果多酚含量较高,多酚含量和抗氧化性之间 存在很强的相关性。Adhikafi等 研究发现,黄芩 素(baicalein)可以降低活性氧(ROS)和活性氮 (RNS)对线粒体膜造成的氧化损伤,并可以有效地 清除细胞内的氧化自由基。同时,Chobot等 对杨 梅素的抗氧化作用进行探索发现,当抗坏血酸(维生 素C)与杨梅素同时存在时,杨梅素表现抗氧化的功 能。贤景春等 通过正交试验优化,确定了飞扬草 多酚的最佳参数为:50%乙醇,浸提温度60℃,时 间25 h,料液比1:30。在此条件下浸提,多酚质量 浓度可达31.331 mg・mL~。抗氧化性研究表明,飞 扬草提取液能清除羟自由基,在多酚质量浓度为 3.759 mg・mL 时,清除率约为50%,说明清除能 力较强,这为飞扬草药用开发和利用奠定了理论 基础。 4.2抗菌、抗病毒活性 多酚对多种细菌、真菌、酵母菌都有明显的抑 制作用,尤其对霍乱菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆 菌等常见致病细菌有很强的抑制能力,并且不影响 生物体本身的生长发育。茶多酚可以用作胃炎和溃 疡药物的成分,抑制幽门螺旋杆菌的生长和抑制链 球菌在牙齿表面的吸附。近年来大量的研究表明, 治疗流感、胞疹都与多酚抗病毒作用有关。此外, 多酚还具有抗病毒活性。 赵二劳等 以香椿叶为原料,超声辅助醇提法 制备得到香椿叶提取物,并测定了其多酚含量,同 时采用清除DPPH・和・OH法及测定抑菌圈直径大小 研究了香椿叶提取物的抗氧化及抑菌活性,结果表 明,香椿叶提取物具有一定的抑菌活性,对大肠杆 菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径 分别为9.7、7.1、8.5 mm。Weber等 研究了绿茶 中儿茶素及其主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)的抗腺病毒感染活性,研究结果表明, EGCG的加入可使病毒呈显著减少,并对感染的 Hep2细胞起到显著的治疗效果。据报道,石榴皮中 的丹宁具有抗生殖器疱疹病毒活性的作用 引,石榴 皮提取物有强大的杀病毒作用并且石榴皮提取物已 经作为抗真菌和抗病毒制剂被使用。有报道称石榴 皮水提物作为多功能阴道栓剂被应用,用来避孕, 预防和治疗性病。石榴皮还作为男性或女性性器官 ・633・ 2015年6月第17卷第6期 中国现代中药Modem Chinese Medicine 感染、痤疮、毛囊炎、过敏性皮炎、中耳炎以及烫 伤治疗药物的一部分被广泛应用。另外,石榴皮还 用来治疗口腔疾病 。 4.3抗肿瘤活性 多酚类化合物具有“活血化瘀”作用,通过调整血 液中多种指标的水平(如降血脂 彤 、抑制低密度 脂蛋白的氧化等 ),有效预防心血管疾病 即 。 5总结 恶性肿瘤是仅次于癌症的疾病,极大地影响我 们的健康。近年来,人们发现自由基反应与肿瘤的 发生发展密切相关,越来越多的研究表明,过氧化 多酚类化合物不仅在医学上具有广泛的应用, 还在食品、化妆品及保健品中都有着广泛的应用, 由于其应用越来越广泛,也越来越被人们所重视。 自由基可能是导致癌变的重要原因之一。多酚类物 质在哺乳动物中有广泛的生物学效应,动物实验证 明,茶多酚在体外有较强的抗诱变效应,能够抑制 啮齿动物皮肤、肺、胃、食道、十二指肠、结肠等 部位的肿瘤细胞的生成,茶多酚中主要功能成分 EGCG可能通过下面几个机制发挥效应:提高抗氧 化剂活性和辅酶Ⅱ等的活性;抑制脂质过氧化反应、 细胞氧化信号转导酶活性;诱导肿瘤细胞凋亡和抑 制肿瘤细胞增殖 J。 梁进等 对纳米茶多酚体外抗肿瘤进行研究, 结果发现纳米茶多酚对人肝癌细胞HepG2有明显的 生长抑制作用,并呈剂量与时效关系。陈孝娟等 发现石榴皮多酚在体外对前列腺癌PC.3细胞株有明 显的生长抑制和诱导凋亡的作用,石榴皮多酚可通 过诱导凋亡和增加肿瘤坏死因子的含量,抑制裸鼠 人前列腺癌PC.3细胞皮下移植瘤的生长,石榴皮多 酚对MCF-7/Adr和MCF-7细胞有直接抑制作用。另 外,Kampa对红酒进行研究,发现红酒中的红酒多 酚具有抑制前列腺肿瘤细胞增长的功效 。Stoner 报道茶多酚中含有的丰富的鞣花酸能够抑制恶性肿 瘤增殖 。 4.4抑制心血管疾病 心血管疾病是心血管和脑血管疾病的总称,指 由于高血脂症、动脉粥样硬化、高血压等引发的心 脏、大脑或者全身组织性的疾病,近年来心血管疾 病的发病率和死亡率在我国呈逐渐上升之势。 据报道 ,植物多酚物质能够抑制血小板的聚 集黏连,诱导血管舒张,并抑制血脂新陈代谢中的 酶作用。赵磊等 。。研究了香蕉皮多酚对高脂血症模 型大鼠的降血脂作用,结论发现,香蕉皮多酚具有 一定的降血脂、预防动脉粥样硬化的作用。张倩倩 等 研究柿果多酚调节高脂血症小鼠脂代谢的作 用,结果发现,柿果多酚可通过调节机体脂代谢减 轻高脂血症,预防动脉硬化(AS)。大量研究表明, ・634. 可再生的植物类多酚,必将以其丰富的储量以及安 全、无毒性等优势成为现代应用中最广泛、最环保 的绿色资源。 参考文献 [1]Ajay M,Cheng M,Mustafa AM,et a1.A comparitive study on antioxdant activity of flavonoids:structure—activity relationship[J].Malaysian J Sci,2005,24(1):187—190. [2] Roy P,George J,Srivastava S,et a1.Inhibitory efects of tea polyphenols by targeting cyelooxygenase-2 through regulation of nuclear factor kappa B,Akt and p53 in rat mammary tumors[J].Investigational New Drugs,201 1,29 (2):225-231. [3]Singh M,Bhui K,Singh R,et a1.Tea polyphenols enhance cisplatin chemosensifivity in cervical cancer cells via induction of apoptosis[J].Life Sci,2013,9(13):70-72. [4]Laturffe N,Rilfer JP.Bioactive polyphenols from grapes and wine emphasized with resve—ratrol[J]. Current Pharmaceutical Design,2013,9(19):75—81. [5] 胡宗福,于文利,赵亚平,等.绿原酸清除活性氧和抗脂 质过氧化的研究[J].食品科学,2006,27(2):102—104. [6]Furiga A,Funel AL,Badet C.In vitro study of antioxidant capacity and antibacterila activity on oral anaerobes of a grou Pseed extract[J].Food Chem,2009,113(4): 1037.1040. [7]Atamai D,Chaher N,Berbou Cham,et a1.Antioxdant capacity and phenol eontenl of selected Algerian medicinal plants[J].Food Chem,2009,112(2):303—309. [8] 金莹,朴爱东.植物多酚的结构及生物学活性的研究 [J].中国食物与营养,2005(9):27-29. 【9] 张忠慈,黄卫宁.荞麦多酚分子结构及养麦特有性质研 究进展[J].粮食与油脂,2004(9):10—13. [10]Deviptiya N,Strinivasa V,Sudheer AR,et a1.Effect of ellagic acid,a natural polyphenol,on alcoholinduced proxidant and antioxidant imbalance[J].Singapore Med, 2007,48(4):311-318. [11]贤景春,林敏.金丝草总多酚提取工艺及抗氧化性研究 [J].安徽农业大学学报,2013,57(6):3-6. 2015年6月第17卷第6期 中国现代中药Modem Chinese Medicine Jun.2015 Vo1.17 No.6 [12] 黄秋森.有机溶剂提取萃取法生产茶多酚工业试验[J]. 现代化工,2006,26(9):49—51. [13] Li HZ,Pordesimo L,Weiss J,et a1.High intensity ultrasound.assisted extraction of oil from soybeans『J].Food Res Int,2004,37(7):731-738. [14] Karabegovic I T,Veljkovic V B,Lazic M L.Ultrasound— assisted extraction of total phenols and flavonoids from dry tobacco(Nicotiana tabacum)leaves[J].Nat Prod Commun, 201 1,6:1855—1856. [15] 胡明明,张国文,何力,等.响应面法优化超声提取花生 壳多酚[J].南昌大学学报,2011,35(3):241-246. [16] 周芳,赵鑫,宫婕,等.响应面法优化超声辅助提取红皮 云杉多酚工艺[J].食品工业科技,2014,67(1): 231_235. [17] 周海旭,李忠海,钟海雁,等.樟树叶多酚超声波提取工 艺的响应面优化[J].经济林研究,2013,31(4):51-55. [18] 于敬,周晶.生物酶解技术在中药提取中的应用[J].现 代药物与临床,2010,25(5):340-343. [19] 谢蓝华,肖南.复合酶解辅助乙醇提取茶多酚工艺研究 [J].茶叶科学,2013,21(1):551—553. [20] 张国文,刘永华,杨振华,等.赣南信丰茶叶中蛋白质、茶 多酚、咖啡碱的测定[J].南昌大学学报(工科版), 1996。18(4):26-29. [21] 王文杰.高锰酸钾滴定法测定茶多酚有关用剂的特性研 究[J].福建茶叶,2002(1):15—17. 【22] Singlerton V L,Orthofer R,Lamuela—Raventos RM,et a1. Analysis of totla phenols and other antioxidant substrates and antioxidants by means of Folin.Ciocalteu reagent『J 1. Meth Enzymo,1999,299:152.178. [23] 蔡文国,吴卫,邵金凤,等.Folin-Ciocalteu法测定鱼腥草 多酚的含量[J].食品科学,2010,31(14):201—204. [24] 唐金华,丁文芳,李永和,等.Folin—Ciocalteu比色法测定 阜康阿魏叶中总多酚的含量[J].新疆医科大学学报, 2012,35(9):1143-1145. [25] 刘硕谦,刘仲华,黄建安,等.紫外分光光度法检测水皂 角总多酚的含量[J].食品工业科技,2003,24(6): 76-77. [26] 陈孝权,肖海军.分光光度法测定茶叶中茶多酚含量的 不确定度评估[J].化学通报,2013,76(10):945-950. [27] 陈方剑,宋洪杰.用紫外一可见分光光度法测定感冒安 颗粒中总酚酸的含量[J].药学服务与研究,2013,13 (4):285-287. [28] 易湘茜,韦保耀.高效液相色谱法测定菠萝中多酚类化 合物[J].食品与发酵工程,2006,32(2):99一101. [29] 孙承锋,姜竹茂.反相高效液相色谱法测定苹果多酚的 含量[J].食品工业科技,2006,52(4):461-463. [30] 李福娟,蔡文生.反相高效液相色谱法分离测定烟草中 的多酚类化合物[J].色谱,2007,25(4):565-568. [31]Zhang YY,Cao GH,Zhu WX,et a1.Comparative study of e- Fos expression in rat dorsal vagal complex and nucleus ambiguus induced by different durations of restraint water— immersion stress[J].Chin J Physiol,2009,52(3): 143.150. [32]包志华,高建平.干酪素法测定蒙药色木槭中鞣质的含 量[J].中国民族医药杂志,2013,10(1O):63-65. [33]吴玲芳,王坤风,夏青,等.藏药余甘子酚酸类成分研究进 展[c]//中华中医药学会中药化学分会第八届学术年会 论文集.北京:中华中医药学会中药化学分会,2013:8. [34]Ajila CM,Brar SK,Venna M,et a1.Extraction and analysis of polyphenols:recent trends[J].Critical Reviews in Biotechnology,2011,31(3):227-249. [35]Fukumoto LR,Mazza G.Assessing antioxidant and Wooxidant activities of phenolic compounds[J].J Agric Food Chem,2010,48(8):3579—3604. [36]Lamien—Meda A,Lamien CE,Compaore MM,et a1. Polyphenol content and antioxidant activity of fourteen wild edible fruits from Burkina Faso[J].Molecules,2012,13 (3):581-594. [37]Adhikari S,Tilak JC,Devasagayam TP,et a1.Free radical reactions of a naturally occurring flavone baicalein and possible mechanisms towards its membrane protective properties[J].Indina J Biochem Biophys,2011,48(4): 275-282. [38]Chobot V,Hadacek F.Exploration of pro—oxidant and antioxidant activities of the flavonoid myrieetin[J].Redox Rep,2011,16(6):242_247. [39]贤景春,林婉华.飞扬草总多酚提取及其对羟基自由基 的抑制作用[J].云南农业大学学报,2014,21(1): 23-26. [40]赵二劳,冯冬艳.香椿叶提取物抗氧化及抑茵活性研究 [J].河南工业大学学报(自然科学版),2013,28(6): ll一14. [41]Weber J M,Ruzindana—Umunyana A,Imbeauh L,et a1. Inhibition of adenovirus infection and adenmn by green tea catechins[J].Antivir Res,2003,58(2):73.167. [42]张杰,詹炳炎,姚学军,等.中药石榴皮蹂质成分抗生殖 器疱疹病毒作用[J].中国中药杂志,1995,20(9): 556-578. [43]Singh R P,Chidambara Murthy KN,Jayaprakasha GK,et 1a. Studies on the antioxidant activity of pomegranate(Punica granatum)peel and seed extracts using in vitro models[J].J AgIic Food Chem,2002,50(1):81-86. [44]Yang G Y,Liao J,Kim K,et a1.Inhibition of growth and induction of apoptosis in human cancer cell lines by tea ・635・ 2015年6月 第17卷第6期 中国现代中药Modern Chinese Medicine Jun.2015 Vo1.17 No.6 (上接第629页) [10]刘爱平,曾峰.黄芪多糖对人肺癌A549细胞增殖的作用及 [18]周杰.黄芪多糖治疗慢性萎缩性胃炎和胃癌癌前病变的 其机制的实验研究[J].肿瘤药学,2011,1(06):499.501. [11]Chen JinXin,Hu Jun,Zhang JuanJuan,et a1.Effect of astragalus polysaccharides on expression of Bcl-2 in human 机制研究[D].南京:南京中医药大学,2013:99. [19]Zhao Jing,Qu Yi.Akt with mitochondrial apoptosis pathway [J].Chemistry of Life,2010,30(04):528—532. [20]吴朝妍。张莹雯,叶太生,等.NF—KB抑制介导的黄芪多 hepatoma cell lines HepG2[J].Chinese Journal of Gerontology,2014,34(叭):124—126. 糖抗人肺癌细胞效应[J].武汉大学学报(医学版), 2013,34(02):174-177. [12]黄惠风,钱建业,谢少茹.黄芪多糖对人胃癌细胞MKN45 诱导凋亡和细胞周期的影响[J].实用临床医药杂志, 2010,14(19):17—20. 1 21】Dohi T,Behrami E,Wall NR,et a1.Mitoehondfial survivin inhibits apoptosis and promotes tumorigenesis[J].J Clin Invest,2004,114(8):1117—1127. [13]Lee K Y,Jeon Y J.Maerophage activation by polysaccharide isolated from Astragalus membranaceus 『J]. Int [22]Ji H,Wang Z,Perera SA,et a1.Mutations in BRAF and KRAS converge on activation of the mitogen—activated Immunopharmacol,2005,5(7—8):1225—1233. [14]任关萍,刘明华,李蓉,等.黄芪多糖抗肿瘤活性研究 [J].中国新药杂志,2010,19(03):221—224. [15]孙舒玉,何小鹃,罗丹,等.黄芪多糖对顺铂治疗S180荷 瘤鼠的增效减毒作用[J].中国中医基础医学杂志, 2013,19(09):1031-1033. protein kinase pathway in lung cancer mouse models[J]. Cancer Res,2007,67(10):49334939. [23]王宏艳.ERK1/2在黄芪多糖促进HepG2细胞凋亡中的 作用[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(07):235.238. [24]Yao Jin feng,Wu Chun Li,Chen Hui Xia,et a1.astragalus polysaccharides on HL-60 cells telomerase activity『J]. Henan Oncology,2005,18(04):247・248. [16]黄宏思,黄衍强,韦鹏涯黄芪多糖协同紫杉醇对肿瘤细胞 的杀伤作用[J].右江民族医学院学报,2010,10(01):3—5. [17]冯涛,张保国.黄芪多糖对肝癌HepG2细胞的抑制作用 [25]罗利琼,黄培强,孔庆志,等.中药多糖对S-180肉瘤细胞 及其机制[J].实用老年医学,2010,24(O6):486488. 内钙离子浓度的影响[J].肿瘤,2008,28(o3):236—237. (收稿日期2015-01-09) ・636・