牛蒡子提取物体外抑菌作用的研究

２００８年第６期　牛蒡子提取物体外抑茵作用的研究　孙　佳，王学英　，臧　楠，石成林，李　群，陈　丹　（沈阳农业大学生物科学技术学院，辽宁沈阳１１０１６１）　摘要：用体积分数为７Ｏ　的乙醇溶液提取牛蒡子，然后用滤纸片法测定提取液对病原茵的抑制作　用，用二倍稀释法确定提取液的最低抑茵浓度（ＭＩＣ），并进一步研究提取液的热稳定性。结果表　明，牛蒡子乙醇提取液对柞蚕链球菌、金黄色葡萄球菌、番茄早疫病菌和小麦赤霉病菌等有比较明　显的抑制效果，而对玉米小斑病菌和玉米弯孢病菌没有抑制作用。提取液对柞蚕链球菌的最低抑　茵浓度为０．１２５ｇ／Ｌ，蜡质芽孢杆菌为０．２５０ｇ／Ｌ，苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌　为０．５００ｇ／Ｌ，乳酸茵为１．０００ｇ／Ｌ，大肠杆菌、番茄早疫病菌为２．０００ｇ／Ｌ，小麦赤霉病菌、柞蚕白僵　病菌、葡萄白腐病菌、谷子白发病菌、烟草赤星病菌、毛霉以及水稻恶苗病菌为４．０００　ｇ／Ｌ。热处理　对提取物的抑茵效果无显著影响（Ｐ＞０．０５）。　关键词：牛蒡子；乙醇提取液；抑茵活性　中图分类号：￥４８２．２　９２　文献标识码：Ａ　文章编号：１００４—３２６８（２００８）０６—００７４一Ｏ４　Ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｏｆ　Ａｒｃｔｉｕｍ　Ｅｔｈａｎｏｌ　Ｅｘｔｒａｃｔ　ＳＵＮ　Ｊｉａ，ＷＡＮＧ　Ｘｕｅ—ｙｉｎｇ　，ＺＡＮＧ　Ｎａｎ，ＳＨＩ　Ｃｈｅｎｇ—ｌｉｎ，ＬＩ　Ｑｕｎ，ＣＨＥＮ　Ｄａｎ　（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　１１０１６１，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ａｒｃｔｉｕｍ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｗｉｔｈ　７０　ｅｔｈａｎｏｌ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐａｐｅｒ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｈａｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ　ｅｆｆｅｃｔ　ａｇａｉｎｓｔ　Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｐｅｒｎｙｉ，Ｓ　口ｐ＾　Ｚ０ｃ０ｃｃ“ｓ　ｕｒｅｕｓ，Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ　ｓｏｌａｎｉ　ａｎｄ　Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ，ｂｕｔ　ｈａｄ　ｎｏ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ　ｍａｙｄｉｓ　ａｎｄ　Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ　ｌｕｎａｔａ．Ｔｈｅ　ＭＩＣ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｗａｓ　０．１２５　ｇ／Ｌ　ｔｏ　Ｓｔｒｅｐｔｏ—　ＣＯＣＣＵＳ　ｐｅｒｎｙｉ，０．２５０　ｇ／Ｌ　ｔｏ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃｅｒｅｕｓ，０．５００　ｇ／Ｌ　ｔｏ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃｅｒｅｕｓ　ａｎｄ　Ｓ　口ｐ＾　Ｚ０ｃ０ｃｃ“ｓ　ｕｒｅｕｓ，１．０００　ｇ／Ｌ　ｔｏ　Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ，２．０００　ｇ／Ｌ　ｔｏ　Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ａｎｄ　Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ　ｓｏｌａｎｉ，ａｎｄ　４．０００　ｇ／Ｌ　ｔｏ　Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ，Ｂｅａｕｖｅｒｉａ　ｂａｓｓｉａｎａ，Ｃｏｎｉｅｌｌａ　ｄｉｐｌｏｄｉｅｌｌａ，Ｓｃｌｅｒｏｓｐｏｒａ　ｇｒａｍｉｎｉｃｏｌａ，Ｍｕｃｏｒ，Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ　ａｌｔｅｒｎａｔａ　ａｎｄ　Ｃｉｂｂｅｒｅｌｌａ　ｆｕｊｉｋｕｒｏｉ．　Ｈｅａｔ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｈａｄ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ａｒｃｔｉｕｍ　ｅｘｔｒａｃｔ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ａｒｃｔｉｕｍ；Ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ；Ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　近年来，化学农药带来的环境污染和残留问题　新型生物制剂，并将其应用于医药卫生、生物农药等　已引起人们的广泛关注，研究开发安全无害、无毒副　领域有着重要的意义。　作用的生物农药已成为保护生态环境、发展绿色农　牛蒡子为菊科植物牛蒡（Ａｒｃｔｉｕｍ　ｌａｐｐａ　Ｌ．）的　业的关键措施之一。此外，在细菌对抗生素的耐药　干燥成熟果实，又称为恶实、大力子、蝙蝠刺、夜叉头　性逐渐增强而新的抗生素又很难发现的今天，分离　等［１］。牛蒡过去为野生植被，现已有人工栽培，全国　提纯传统中药中的抗菌物质，研究开发高效、环保的　大部分地区均有产出，资源丰富。　收稿日期：２００８一Ｏ１—２２　基金项目：辽宁省科技攻关项目（２００１２０８８）　作者简介：孙佳（１９８２一），女，辽宁锦州人，在读硕士研究生，研究方向：生物制药研究。　通讯作者：王学英（１９５１一），男，辽宁大连人，教授，博士，主要从事生物制药研究。　７４　·　维普资讯 http://www.cqvip.com

河南农业科学　现代药理学研究发现，牛蒡中所含的主要成分　木脂素类化合物具有抗流感病毒、抗ＨＩＶ病毒、抗　１．３　试验万法　１．３．１　牛蒡子提取液的制备　称取牛蒡子药材　肿瘤、改善肾脏代谢功能、降血压、抗菌等多种生理　活性　］。此外，有资料记载，牛蒡子对金黄色葡萄　球菌、肺炎双球菌以及多种致病性真菌有不同程度　４０　ｇ，磨碎，过筛（筛孔径为０．４５　ｍｍ），先置于索氏　提取器中用石油醚于９０℃下抽提至无色，然后放入　６５。Ｃ的水浴锅中，以８倍量体积分数为７０　的乙醇　回流提取３次，每次１　ｈ，合并３次回流液，用旋转蒸　发仪浓缩，使质量浓度达到２．０００　ｇ／Ｌ，即得牛蒡子　的乙醇提取液ｌ５ｊ。　的抑制作用　“］，但尚未见有详细的研究报道。　鉴此，研究了牛蒡子提取液对１７种致病菌的抑　菌谱、最低抑菌浓度以及热处理对牛蒡子提取液抑　菌效果的影响等，旨在为研制抑菌生物制剂提供　１．３．２菌株菌液的制备　依据　１材料和方法　１．１　试验材料　１．１．１牛蒡子购于同仁堂大药房。　１．１．２主要药品　无水乙醇、石油醚、甲醇等试剂　均为分析纯试剂。　１．１．３供试菌种大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）、金　黄色葡萄球菌（Ｓ￡ｎ　＾　Ｚ０ｃ０ｃｃ“５　ｕｒｅｕｓ）、枯草芽孢杆　菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃｅｒｅｕｓ）、柞蚕链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｐｅｒｎｙｉ）、苏云金芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、　乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、蜡质芽孢杆菌　（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃｅｒｅｕｓ）、玉米小斑病菌（Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉ一　“ｍ　ｍａｙｄｉｓ）、玉米弯孢病菌（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ　ｌｕｎａｔａ）、　番茄早疫病菌（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ　ｓｏｌａｎｉ）、小麦赤霉病菌　（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ）、柞蚕白僵病菌（Ｂｅａｕ－　ｖｅｒｉａ　ｂａｓｓｉａｎａ）、葡萄白腐病菌（Ｃｏｎｉｅｌｌａ　ｄｉｐｌｏｄｉｅｌ—　ｌａ）、谷子白发病菌（Ｓｃｌｅｒｏｓｐｏｒａ　ｇｒａｍｉｎｉｃｏｌａ）、烟草　赤星病菌（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ　ａｌｔｅｒｎａｔａ）、毛霉（Ｍｕｃｏｒ）、水　稻恶苗病菌（Ｃｉｂｂｅｒｅｌｌａ　ｆｕｊｉｋｕｒｏｉ）。以上菌种由沈　阳农业大学微生物教研室提供，常规保存，用前　活化。　１．１．４　培养基　马铃薯培养基（ＰＤＡ）：马铃薯　２００ｇ，葡萄糖１０～２０　ｇ，琼脂１７～２０　ｇ，磷酸二氢钾　１　ｇ；细菌培养基（ＬＢ）：胰蛋白胨１０　ｇ，氯化钠１０　ｇ，　琼脂１５～２０ｇ，酵母提取物５　ｇ；牛肉膏蛋白胨培养　基：胰蛋白胨１０ｇ，牛肉膏８ｇ，酵母提取物３　ｇ，葡萄　糖１０ｇ，氯化钠５　ｇ，磷酸二氢钾１．５　ｇ，硫酸镁０．２　ｇ，　硫酸锰０．５　ｇ，琼脂１５～２０ｇ。　以上各培养基按配方配好后，调ｐＨ值，定容至　１　０００　ｍＬ，１２１ｕＣ高压灭菌２０ｍｉｎ备用。　１．２　主要仪器　恒温水浴锅、旋转蒸发仪、电子分析天平、无菌　操作台、恒温振荡培养箱、高压灭菌锅、紫外分光光　度仪、血球计数器、台式高速冷冻离心机。　１．３．２．１供试菌株的准备　在无菌室中将供试菌　种接入相对应的试管斜面培养基上，细菌置３７　Ｃ恒　温培养箱内培养２４ｈ；真菌置２５℃恒温培养箱内培　养４８　ｈ，之后将其置于４＇Ｃ冰箱冷藏备用。　１．３．２．２　菌悬液的制备　用接种环挑取少许菌体　于装有１０　ｍＩ　无菌水的试管中，制成菌悬浮液。用　血球计数器计数，调整菌悬浮液的浓度至含孢子或　菌体为１０。个／Ｌ的菌液。　１．３．３　比浊法测定提取液抑菌活性　选取大肠杆　菌、金黄色葡萄球菌和柞蚕链球菌３种比较常见且　较易培养的细菌为供试菌种。取对数生长期的细菌　菌液，３　０００　ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，弃上清，无菌、冰浴，　加ｐＨ　６．５磷酸缓冲液洗涤、稀释，使ＯＤ　。为０．３～　０．５，取提取液与菌液共育（体积比为１：１０），以未　加提取液的菌液为对照，将共育液和对照液分别作　用１０　ｍｉｎ，２０　ｍｉｎ，３０　ｍｉｎ，４０　ｍｉｎ，５０　ｍｉｎ后分别测　定ＯＤ值。比活力：（（）Ｄ—ＯＤ。）／ＯＤ。（比活力的单　位为Ｕ／ｍｇ；ＯＩ）ｏ为初始的吸光值；ＯＤ为作用一定　时间后的吸光值）。　１．３．４滤纸片法　测定提取液抑菌活性　把已配　好并经过高压蒸汽灭菌的各种固体培养基融化后分　别倒入已灭菌的培养皿中制成平板，将各供试菌悬　液取０．５ｍＬ至凝固好的无菌平板上，用无菌三角　耙涂布均匀。取直径１０ｍｌＴｌ的灭菌滤纸片放人牛　蒡子提取液中浸泡过夜，用无菌镊子取含有提取液　的滤纸片贴在含菌平板上，每皿４片，每菌做３次重　复。细菌置３７℃恒温培养箱内培养２４ｈ，真菌置　２５℃恒温培养箱内培养４８ｈ，测量滤纸片的抑菌圈　直径，比较抑菌效果，结果求平均值。　１．３．５最低抑菌浓度（ＭＩＣ）的测定　采用二倍稀　释法　］，将牛蒡子提取液用无菌蒸馏水进行倍比稀　释，制备浓度为４．０００　ｇ／Ｉ　，２．０００　ｇ／Ｉ　，１．０００ｇ／Ｉ　，　０．５００　ｇ／Ｌ，０．２５０　ｇ／Ｌ和０．１２５　ｇ／Ｉ　的稀释液。用　无菌吸管分别吸取２　ｍＬ稀释液加入到无菌培养皿　中，然后每皿倒入１５～２０ｍＩ　ＰＤＡ培养基，充分混　７５　·　维普资讯 http://www.cqvip.com

２００８年第６期　匀，静置凝固后，制成含样品平板。在平板内加入　０．５　ｍＬ菌悬液，用无菌三角耙涂布均匀，细菌置　３７℃恒温培养箱内培养２４ｈ，真菌置２５℃恒温培养　箱内培养４８ｈ，观察各种菌的生长情况。另取一相　同的稀释系列，不接种任何菌作为对照，以完全没有　菌生长的最低提取物浓度为该提取物的最低抑菌浓　度。每个浓度及对照均设３个重复。　１．３．６不同温度处理对牛蒡子提取液抑菌效果的　影响［７］　取牛蒡子提取液分别置于４Ｏ℃，６Ｏ℃，　８Ｏ℃，１００℃水浴处理３０ｍｉｎ，以原液为对照。用滤　纸片法测定处理前后样品的抑菌效果，每个温度处　理及对照均设３个重复。　２结果与分析　２．１提取液的抑茵效果　图Ｉ　牛蒡子提取液对３种细菌的杀菌活力　时间（ｍｉｎ）　２．１．２抗菌物质的抑菌谱　由表１可知，牛蒡子提　取液对大部分病原菌具有抑制作用，并且对细菌的　抑制效果要好于真菌，其中对柞蚕链球菌、蜡质芽孢　杆菌的抑菌作用最明显，抑菌圈直径达到１５ｍｍ以　上；对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、苏云金芽孢　杆菌、番茄早疫病菌和小麦赤霉病菌也比较明显，抑　菌圈直径在１３　ｍｍ以上；对乳酸菌、大肠杆菌、毛　２．１．１提取液的杀菌活力　由图１可知，牛蒡子提　取液对３种供试菌的作用在３０ｒａｉｎ内随着时间的　延长，抑菌效果明显增强，３０　ｍｉｎ后，ｏＤ值变化不　（暑曼ｎ）Ｒ蚂丑　明显，柞蚕链球菌和金黄色葡萄球菌镜检无菌体存　在，涂平板后无菌落，大肠杆菌有稀疏菌落，可见提　５　４　仉　３　２　仉　１　霉、烟草赤星病菌、谷子白发病菌、葡萄白腐病菌、柞　蚕白僵病菌以及水稻恶苗病菌也有抑菌效果，抑菌　圈直径为１Ｉｍｍ左右；而对玉米弯孢病菌、玉米小　斑病菌没有明显的抑菌效果。　Ｏ　取液对细菌的抑制作用主要发生３０　ａｉｒｎ内，且其对　柞蚕链球菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果比对大肠　杆菌强，此结果与抑菌圈法一致［５］。　表Ｉ　牛蒡子提取液对部分病原菌的抑茵作用　病原菌种类　柞蚕链球菌Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｐｅｒｎｙｉ　蜡质芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃｅｒｅｕｓ　枯草芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃｅｒｅｕｓ　金黄色葡萄球菌Ｓ￡口　ｊ，ｚ０ｆ０ｆｆ“ｓ　ｕｒｅｕｓ　抑菌效果　卅卅　　病原菌种类　烟草赤星病菌Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ　ａｌｔｅｒｎａｔａ　谷子白发病菌Ｓｃｌｅｒｏｓｐｏｒａ　ｇｒａｍｉｎｉｃｏｌａ　葡萄白腐病菌Ｃｏｎｉｅｌｌａ　ｄｉｐｌｏｄｌｅｌｌａ　柞蚕白僵病菌Ｂｅａｕｖｅｒｉａ　ｂａｓｓｉａｎａ　抑菌效果　＋　＋　＋　＋／一　＿卜＋　＿卜＋／一　苏云金芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ　乳酸菌Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ　＿卜＋／一　＋　水稻恶苗病菌Ｃｉｂｂｅｒｅｌｌａ　ｆｕｊ　ｉｋｕｒｏｉ　玉米弯孢病菌Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ　ｌｕｎａｔａ　＋　一　大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　毛霉Ｍｕｃｏｒ　＋／一　＋／一　玉米小斑病菌Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ　ｍａｙｄｉｓ　小麦赤霉病菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ　一　＿卜＋　番茄早疫病菌Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ　ｓｏｌａｎｉ　注：卅－Ｈ－　：ｄ≥１５；＿卜＋：１３≤ｄ＜１５；＋：Ｉ１≤ｄ＜１３；一：抑菌效果不明显；＋十／一：１３≤ｄ＜Ｉ５或者抑菌效果不明显；＋／一：Ｉ１≤ｄ＜１３或者　抑菌效果不明显；ｄ为抑菌圈直径（ｍｍ）。表２同　２．２提取液对各种供试茵的最低抑茵浓度　用。从表２还可以看出，牛蒡子提取液对细菌的最　由表２结果可知，牛蒡子提取液对柞蚕链球菌　的最低抑菌浓度为０．１２５ｇ／Ｌ，对蜡质芽孢杆菌的最　低抑菌浓度为０．２５０ｇ／Ｌ，对苏云金芽孢杆菌、枯草　低抑菌浓度低于对真菌的最低抑菌浓度，说明牛蒡　子提取液对细菌的杀菌作用要好于真菌，杀灭真菌　时需用较大浓度的药液。　芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为　０．５００ｇ／Ｌ，对乳酸菌的最低抑菌浓度为１．０００ｇ／ｉ　，　２．３　不同温度处理对牛蒡子提取液抑茵作用的　影响　对大肠杆菌、番茄早疫病菌的最低抑菌浓度为　２．０００ｇ／Ｌ，对小麦赤霉病菌、柞蚕白僵病菌、葡萄自　腐病菌、谷子白发病菌、烟草赤星病菌、毛霉以．Ｔｋ　稻恶苗病菌的最低抑菌浓度为４．０００ｇ／Ｌ，提取液对　玉米弯孢病菌和玉米小斑病菌没有明显的抑制作　如图２所示，牛蒡子提取液经过不同温度热处　理后对柞蚕链球菌的抑制效果影响不大，各温度之　间抑菌圈差异不显著（Ｐ＞Ｏ０５），说明牛蒡子提取　液有较好的热稳定性７６　·　维普资讯 http://www.cqvip.com 河南农业科学　一星一　］亘日褪最　５　Ｏ　５　Ｏ　Ｏ　圈　∞　∞　圉　菌剂的研究带来了一定的难度。因此，在抑菌活性　物质筛选［８　明中，应采用多种方法有机结合。本试　验目前只是进行了体外的离体试验，初步测定了牛　蒡子乙醇提取液的抑菌活性，但其杀菌作用机理还　有待进一步研究。此外，作为生物杀菌制剂，尚需进　步进行盆栽以及大田作物的杀菌试验，验证牛蒡　１００　子提取液在离体、活体条件下均有抑菌活性，以利于　进一步开发利用。　注：以柞蚕链球嗣为指不菌，浓度为１×１０　ｃｆｕ／ｍＩ　图２热处理对牛蒡子提取液抑茵效果的影响　参考文献：　３结论与讨论　［１］　肖培根．新编中药志［Ｍ］．北京：化学工业出版丰十，　２００２：４８．　１）在本试验条件下，牛蒡子提取液对７种细菌　和８种致病真菌均具有一定的抑制作用，并且对细　菌的抑制效果要好于真菌。被抑制的病原菌中既有　革兰氏阳性菌也有革兰氏阴性菌；既有球菌也有杆　［２］　龚又明，刘利根，宋科峰，等．牛蒡子的研究进展［Ｊ］．海　峡药学，２００５，１７（４）：１—４．　［３］　任常胜，朱庆龄．牛蒡子的研究概况［Ｊ］．中国民族医药　杂志，２００３，１２（增刊）：３６—３９．　［４］郝林华，陈靠山，李光友．耐盐植物牛蒡的研究进展与　应用［Ｊ］．海洋科学，２００４，２８（５）：６９—７２．　［５］周邦靖．常用中药的抗菌作用及其测定方法［Ｍ］．重　庆：科学技术出版社重庆分社，１９８７：２８９—３０６．　菌；既有细菌又有真菌，说明牛蒡子提取液具有高效　广谱的抑制作用。　２）研究结果表明，牛蒡子提取液对大肠杆菌以　外的其他细菌的最小抑菌浓度都小于１．０００　ｇ／ｉ　，对　大部分真菌的最小抑菌浓度也都小于４．０００　ｇ／Ｌ，其　［６］李传仁，严赞开．龙柏叶提取物对食品抑菌作用研究　［Ｊ］．安徽农业科学，２００５，３３（２）：２９４—２９９．　［７］吴传茂，吴周和，曾莹，等．从植物中提取天然防腐剂的　研究［Ｊ］．食品科学，２０００（５）：２４—２７．　［８］倪长春，沈宙，顾必文，等．杀菌剂生物活性筛选离体活　体兼顾的重要性［Ｊ］．浙江化工，２０００，３１（增刊）：６１—６４．　［９］　张穗．杀菌剂生物测定技术［Ｊ］．植物保护，１９９９，２５　（３）：３５—３７．　中对柞蚕链球菌的最低抑菌浓度仅为０．１２５　ｇ／ｉ　，而　对玉米弯孢病菌和玉米小斑病菌的抑制作用不佳，　无法测出最低抑菌浓度。　３）热处理对牛蒡子醇提取液的抑菌效果无显　著影响（Ｐ＞０．０５）。　４）目前开发新型杀菌剂的重要途径之一是从　植物中寻找生物活性物质，但植物体在生长过程中　能够产生各种各样的次生代谢产物，这为植物源杀　Ｅｌｏ］祁之秋，王英姿，夏敏，等．拮抗细菌Ｒ２６发酵滤液对　灰葡萄孢菌的抑菌活性研究［Ｊ］．河南农业科学，２００７　（１　２）：８１—８２．　７７　·