1.实验动物:是指经过人工定向培养、对其携带的微生物和寄生虫实行控制,其遗传背景明确,来源清楚,并在相应的环境设施内饲养,用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。
2实验用动物:所有用于科学实验的动物统称为实验用动物。包括实验动物、野生动物、经济动物和观赏动物。 3实验动物和实验用动物的区别: 实验动物具有一下特点: 1实验动物是遗传限定的动物;
2对其携带的微生物、寄生虫实行人工控制; 3实验动物的目的用于科学研究。
4实验动物学:是研究实验动物和动物实验的科学。前者是以实验动物为对象研究其驯养、育种、繁殖、饲养、管理、解剖、生理及动物各种疾病的表现和防治,以及对野生动物的开发和应用;而动物实验则是应用实验动物进行生命科学的研究,包括各种实验方法、技术操作及人类疾病的动物模型复制等。 5实验动物的研究方向: 1推广“3R”实验
(替代replacement、减少reduction、优化refinement); 2转基因动物研究;
3动物疾病模型的开发和利用; 4动物组织器官的克隆研究; 5实验动物福利。
1动物福利:就是让动物在康乐的状态下生存,其标准包括动物无任何疾病、无行为异常、无心理紧张压抑和痛苦等。基本原则包括:让动物享有不受饥渴的自由、生活舒适的自由、不受痛苦伤害的自由、生活无恐惧感和悲伤感的自由以及表达天性的自由。
动物福利包括物质(身体)和精神2个方面。物质方面很简单,一般指食物和饮水,只要供给及时、量足、营养丰富、清洁卫生就可以了。精神方面包括:适宜的生活环境,免受疼痛之苦,免受惊吓、不安和恐惧等精神上的刺激。当必须处死时,采用安乐死的措施等。 2动物福利的“五项基本福利”,“五大自由”,“五项标准”:
1为动物提供适当的清洁饮水和保持健康和精力所需要的食物,使动物不受饥渴之苦(免受饥饿的自由)。 2为动物提供适当的房舍或栖息场所,能够舒适地休息和睡眠,使动物不受困顿不适之苦(生活舒适的自由)。 3为动物做好防疫,预防疾病和给患病动物及时诊治,使动物不受疼痛、伤病之苦(免受痛苦伤害和疾病的自由)。 4保证动物拥有良好的条件和处置(包括宰杀过程),使动物不受恐惧和精神上的痛苦(免受恐惧和不安的自由)。 5为动物提供足够的空间、适当的设施以及与同类动物伙伴在一起,使动物能够自由表达习性(免受身体热度不适的自由;表达所有自然行为的自由)。
实验动物微生物学分类、概念、环境要求和应用范围:
1普通动物CV;2清洁动物CL;3无特殊病原体动物SPF; 4无菌动物GF和悉生动物GN。
1无菌动物GF:是指现有的检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物。饲养条件:无菌隔离器内(隔离系统)。应用:在生物医学研究中有较独特的作用;微生物学研究、免疫学研究、放射医学研究、营养代谢研究、老年病学研究、药理和毒理学研究、心血管病研究、肿瘤、寄生虫学、口腔医学研究。
2悉生动物GN:也称已知菌动物,指在动物体内带有明确的微生物种类的动物。饲养条件:无菌隔离器内(隔离系统)。应用:在多种研究中可代替无菌动物。微生物、免疫、微生物和寄生虫相互关系等的研究。 3无特殊病原体动物SPF:指动物机体内无特定的微生物和寄生虫存在,但带有非特定的微生物和寄生虫的动物。饲养条件:屏障环境。应用:适用于所有科研实验,是目前国际标准级的实验动物。各种疫苗生产所采用的动物应为SPF动物。
4清洁动物CL:除普通的动物应排除的病原外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体,是根据我国国情而设定的等级动物。饲养条件:屏障系统。应用:在我国已经成为用于科学研究的标准的实验动物;国际上仅用于短期试验或部分科学研究实验。
5普通动物CV:是在微生物学和寄生虫学控制上要求最低的动物,它要求不携带人兽共患病和动物烈性传染病的病原体。饲养条件:开放系统。应用:生物医学教学示教,预试验,不可用于科研、生产和检定。 无菌动物的形态学特点:
1消化系统:盲肠肥大,比普通动物的要大5-10倍;肠道肌层薄,肠绒毛变细变短;肝脏重量下降。 2循环系统:心脏相对变小;白细胞数变少,且数量波动范围小。
3免疫系统:免疫机能基本处于原始状态。胸腺、淋巴组织、网状内皮系统发育不良;脾脏缩小,无二级滤泡,网状内皮细胞功能下降。
1
无菌动物的生理学特点: 1寿命:比普通动物长。
2代谢和营养:武军动物血中含氮量少,肠管对水的吸收率低,代谢周期比普通动物长;体内不能合成维生素B和维生素K。
3生长率:不同种属生长率不同。无菌禽类生长率高于普通动物;无菌大、小鼠与普通动物差不多;无菌豚鼠、兔比普通慢。
4生殖:无菌条件对动物生殖影响不大。大、小鼠因出生无感染,身体较好,其繁殖率高于普通大、小鼠;无菌豚鼠、兔比普通者低。
5抗辐射能力强,抗实验性烫伤和抗休克死亡能力也强。
6免疫功能:血清中IgM、IgG水平低,免疫功能处于原始状态;应答速度慢;过敏反应,对异体移植的排斥反应以及自身免疫现象消失或减弱;血清中几乎不存在丙种球蛋白和特异抗体。 微生物学特点:
在现有条件下检测不到任何微生物。 实验动物遗传学分类:
近交系动物、封闭群动物、杂交一代动物(F1代)。
1近交系动物:经至少连续20代以上全同胞兄妹交配培育而成,品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先,该品系称为近交系动物。
特征:1基因位点的纯合性2遗传组成的同源性3表型一致性
4遗传组成独特性5长期遗传稳定性6遗传特征的可辨性7国际分布的广泛性8背景资料完整性。 缺点:1近交衰退;2生产饲养成本高;3对外界环境敏感。 普交系应用: 1节省样本量。
2组织细胞或肿瘤移植,个体间相容性一致。
3隐性纯合基因的暴露,获得先天性畸形及先天性疾病的动物模型,如糖尿病、高血压等。 4某些品系自发或诱发肿瘤,成为肿瘤病因学,肿瘤药理学模型。
5多个近交系同时使用,分析不同的遗传组成对某项实验结果的影响,或观察实验结果是否具有普遍意义。 重组近交系应用
重组近交系对祖系间有差异的性状和基因进行遗传分析是非常有用的实验材料。如:分离分析,连锁分析,功能分析等
同源近交系的应用:
1在同一遗传背景下比较某基因位点上不同等位基因的遗传效应。 2在不同遗传背景中研究同一基因与遗传背景及其它基因的关系。
3消除杂合遗传背景对某些突变基因表达的影响,以获得更为稳定的实验动物模型 4对复杂的多基因性状进行遗传分析。 主要的近交系动物:
C57BL/6、BALB/c、DBA/2、C3H、CBA、F344、SHR。 2封闭群动物:
以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个种群,在不从外部引入新的血源条件下,至少连续繁殖4代以上称为封闭群。
封闭群的特点和应用:
1封闭群动物具有杂合性并避免了近交,从而避免了近交衰退的出现,所以其生活力、生育力都比近交系强,具有繁殖力高,疾病抵抗力强的特点,可大量生产。
2封闭群就整体而言,由于没有引进新的血源,其遗传特性及其他反应性能保持相对稳定。但就群体个体而言,因其具有杂合性,所以个体间的反应性具有差异,因此,个体间的重复性和一致性没有近交系、系统杂交动物F1好。
根据这些特点,封闭群一般适用于药物筛选,毒理安全试验和教学。 常用的封闭群动物有:青紫蓝兔、新西兰兔、昆明小鼠(KM)、NIH小鼠、Wistar大鼠、SD大鼠、LACA封闭群小鼠等。
3杂交一代动物(F1代):
根据科学研究的需要,有计划将2个不同近交系动物之间交配所获得的第一代动物,称为杂交一代动物,简称F1动物。 特征及应用:
1遗传表型上的一致性。用于营养、药物、病原体和激素的生物评估。
2杂交优势。较强的生命力,对疾病的抵抗力强,寿命较长,容易饲养。适用于携带有害基因和长期慢性致死试
2
验。
3杂合的遗传组成。杂交一代的遗传物质均等的来源于两个亲本近交系,同时具有两个亲本品系的特点,可接受两个品系的细胞、组织、器官和肿瘤移植,适用于免疫学和发育学领域的研究。 4作为某些疾病研究的模型。
近交系动物的遗传监测:对近交系动物而言,发生遗传改变的主要原因有遗传污染、遗传漂移和突变。 常见的遗传监测方法:
1生化标记基因监测:同工酶和异构蛋白标记。
2免疫遗传学标记基因监测:皮肤移植法,混合淋巴细胞培养法
3形态学遗传标记基因监测:毛色基因位点标记、下颌骨形态的分析技术。 4微卫星DNA标记法 近交系的新进展:
重组近交系、同源突变近交系、同源导入近交系。
实验动物环境:指将动物饲养在人为控制的有限空间,并按照人们的意志进行生长、繁殖、实验的一个人工的特定场所。
3个环境:饲养室或动物实验室以外的周围环境为外环境,以内的成为内环境。内环境分为大环境和小环境。直接包围动物体的饲养笼盒内的对实验动物产生影响的各种物理、化学等因素称为小环境;放置动物笼架等的饲养间的各种物理、化学等因素称为大环境。主要考虑大环境的影响。 影响实验动物的环境因素: 1气候因素。包括温度(21-27)、湿度(40%-70%)、气流(每小时换气10-20次,速度0.1-0.2m/s)、风速、换气等。
2物理化学因素。包括粉尘、气味(氨的浓度应小于14mg/m3)、噪声(60dB以下)、照明等。 3居住因素。包括建筑、笼具、垫料、给食器、给水器等。
4生物因素。同种动物因素:社会地位、势力范围、争斗、饲养密度等; 异种动物因素:微生物、人及其他种动物等。 5营养因素。饲料营养和水。
实验动物设施:广义上是指进行实验动物生产和从事动物实验设施的总和。狭义上指保种、繁殖、生产、育成实验动物的场所,而将实验研究、试验检定等设施称为实验动物设施。 按微生物控制程度分类:普通环境、屏障环境、隔离环境。
按病原微生物对人和动物的危害程度分类:P1级、P2级、P3级、P4级。 洁净物品的消毒管理:
1饲料的灭菌:高压灭菌、射线灭菌。 2垫料的灭菌。
3笼器具的灭菌:高压灭菌法,不能高压灭菌的可用药液浸泡。 4饮水的灭菌,高压灭菌或者PH值达2.5-2.8。
5无菌工作服的管理。选用耐高温高压、抗腐蚀、不产生绒毛的材料。
实验动物饲料的消毒:1干热灭菌法2高温高压灭菌法3药物熏蒸法4发射线照射灭菌法。 实验动物配合饲料的分类:
1全价配合饲料;2混合饲料;3浓缩饲料;4添加剂预混料。 常用实验动物营养需要的特点:
1保证必需脂肪酸占总能量的1.3%;○2不需补充VK,但要VA;○3对钙磷缺乏抵抗力强,大多对镁需要1大鼠:○
4无菌大鼠还要补VB12。 量多;○
2小鼠:高碳水化合物,特别需要亚油酸;对钙要求宽,对VA、VD要求高,对VA过量敏感。无菌小鼠还要补VB12。DBA小鼠要求高蛋白低脂肪的饲料。C57BL/6小鼠要求高蛋白饲料。 3地鼠:蛋白质对地鼠营养需要尤其重要。
4豚鼠:对粗纤维的消化能力强,12-14%。粗纤维不足,引起排便障碍和脱毛现象。对精氨酸的需要量高。每天需补充VC10mg。
5兔:精氨酸;补充VK;粗纤维。无菌兔要补充所有维生素,并降低粗纤维含量。 SPF 普通 清洁 无菌 + + + 小鼠 + + + 大鼠 + + + 地鼠 + + + + 豚鼠 + + + + 家兔 + 3
+ + 犬 + + 猴 小鼠的生物学特性: 染色体20对,小鼠的毛色由C-c,B-b,A-a三个基因支配。 外貌特征:全身被毛,长10-15cm,重量20-40g。 一般特性:
1体型小,对外界环境反应敏感,适应性差。 2性情温驯,易于饲养管理。 3喜黑暗安静环境,昼伏夜出。 4喜群居。
5发育迅速,性成熟早。小鼠6-7周性成熟。 6性周期短,繁殖力强。
性周期4-5天,妊娠期19-21天,哺乳期20-22天。小鼠的性周期分为4个阶段:动情前期、动情期、动情后期、动情间期。一次排卵10-23个。雌鼠交配后10-12h,阴道口有白色阴道栓,是交配的标志。 7喜啃咬。 解剖学特点:
1、骨骼:下颌骨的喙状突较小,髁状突发达。运用下颌骨形态的分析技术,可进行近交系小鼠遗传监测。上下颌各有2个门齿和6个臼齿,门齿终身生长,需经常磨损来维持齿端长度。
2、尾:小鼠无汗腺,尾部有2条动脉和3条静脉。2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面,3条静脉呈品字形分布。尾部有散热、平衡、自卫等功能。小鼠有褐色脂肪,参与代谢和增加热能。
3、内脏器官:脾脏位于胃的左侧,有明显造血功能。骨髓为红髓,无黄髓,终身造血。
4、生殖器官:卵巢为肠系膜包绕不与腹腔相通,故无宫外孕。子宫为双子宫,呈“Y”形。乳腺发达,胸部3对,腹部2对。
5、淋巴系统:小鼠的淋巴系统特别发达,外界刺激可使淋巴系统增生,易患淋巴系统疾病。 生理学特点:
1生长发育:小鼠寿命2-3年,无菌小鼠可达3年。
2呼吸、心率与血压:84-230次/min,470-780次/min,95-138/67-90mmHg。 3体温:37-39℃。
4血液学指标:小鼠血液量占体重的1/15,易发生贫血,心脏采血一次可采0.5ml。 常见的品系:
近交系:C57BL/6、C3H系、BALB/c、DBA/2。 封闭群:昆明小鼠(KM)、NIH白化。 应用:
1药物评价和毒性试验:药物急性毒性试验,小鼠是最合适的动物。生物制品和制剂的效价测定。药物筛选试验。某些药物药效和副作用的评价。
2肿瘤学的研究:肿瘤基因组学和癌基因假说的研究。 3计划生育研究。
大鼠的生物学特性:染色体21对。 一般特性:
1生活习性:夜间活跃,喜居安静环境,对外界刺激反应较敏感;喜欢独居,性情温驯,聪敏;嗅觉发达,味觉差;
2食性:较杂,以谷食为主兼食肉类,对营养缺乏非常敏感,是研究营养的良好实验动物。当维生素A缺乏时常咬人。体内可合成维生素C。 3汗腺不发达:尾巴是散热器官。 4对粉尘、氨气和硫化氢等极为敏感。
5对湿度变化敏感。低于40%易患环尾病,一般保持在50%-65%之间。
6肝脏再生能力强,无胆囊,不会呕吐,因此不能用于做催吐实验。对许多药物易产生耐药性。 解剖学特点:
肝脏再生能力强,部分切除后仍可再生。有胆管,无胆囊,胆管与十二指肠相接,并受其括约肌控制。左肺为1个大叶,右肺分成4叶,适宜支气管肺泡灌洗。子宫为双子宫型,左右子宫角的腔是完全分开的。无扁桃体。垂体位于视交叉之后,易于摘除。 生理学特点:
寿命2-3年,无菌鼠达4年。体温39℃。 繁殖力强,2个月性成熟。
4
性周期4-5天,妊娠期19-21天,哺乳期21天。 主要品系:
近交系:ACI、F344、SHR、WKY; 封闭群:Wistar、SD。 应用:
1生理学研究:具有行为情绪的变化特征,广泛用于高级神经活动的研究,如走迷宫。 2药理学和毒理学研究:大鼠髁关节对炎症反应敏感,用于抗关节炎药物的研究。
3营养学和代谢疾病研究:大鼠对营养缺乏比较敏感,饲料中营养不全面是常出现典型的营养缺乏症状,是研究营养学的首选动物。
4肿瘤研究:大鼠可复制成各种肿瘤模型,是肿瘤实验研究最常用的实验动物。它特别易患肝癌。 5口腔学研究:用来研究龋齿。 豚鼠的生物学特性:染色体32对。 一般特性:
1采食行为:草食性动物。 2群居行为。
3普赖厄反射:豚鼠听觉发达且能识别多种不同的声音,当有尖锐的声音刺激时,常表现为耳廓微动,称为普赖厄反射。 4体内不能合成维生素C(猕猴、豚鼠)。 5豚鼠是晚成性动物。 6寿命:4-5年,最长7年。
解剖学特点:尾巴只有尾的痕迹。门齿锐利,深入颌骨。淋巴系统发达。 生理特点:
1性周期15-17天,妊娠期59-72天。哺乳期21天。
2体内缺乏左旋葡萄糖内酯氧化酶,自身不能合成维生素C。 3抗氧化能力强,比小鼠强4倍,比大鼠强2倍。 4对麻醉药物敏感,麻醉死亡率较高。
5对青霉素、四环素、红霉素等抗生素类药物反应大,较大剂量用药后48小时常可引起急性肠炎甚至死亡,是由于豚鼠肠道正常菌丛在抗生素作用下产生内毒素所致。 应用:
1免疫学研究:豚鼠是实验动物血清中补体含量最多的。免疫学实验中所用补体多来源于豚鼠。豚鼠易于过敏,用于研究速发型过敏性呼吸道疾病。常用实验动物接受致敏物质的反应程度不同,顺序:豚鼠>兔>犬>猫>蛙。 2传染病研究:尤其对结核杆菌高度敏感,用于病原的分离、鉴别、诊断和各种抗结核病药物的筛选及病理研究的最佳动物。
3药物学研究:是研究青霉素和其他抗生素的动物模型。适用于药物毒物对胎儿后期发育影响的试验。用于麻醉药及镇咳药的药效评价实验。
4营养学研究:体内缺乏左旋葡萄糖内酯氧化酶,自身不能合成维生素C。是研究实验性坏血病和维生素C生理功能的理想动物模型。
5耳科学研究:常用于听觉和内耳疾病的研究。 地鼠的生物学特性:
金黄地鼠染色体22对,中国地鼠染色体11对。 一般特性:
1杂食性动物,有贮存食物的习性,可将食物贮存于颊囊内。
2昼伏夜出,晚8-11点最活跃,有嗜睡习惯,熟睡时全身松弛,如死亡状,不易醒。 3室温20±2℃,相对湿度40%-60%为宜。室温低于13℃时可出现冬眠。 4地鼠好斗,牙齿尖硬,可咬断钢丝。 解剖学特点:
口腔内两侧各有一个颊囊。颊囊缺少腺体和完整的淋巴通路,因此对外来的组织不产生免疫排斥反应,是进行组织培养、人类肿瘤移植和观察微循环改变的良好区域。 中国地鼠、大鼠:无胆囊,有胆管,直接开口于十二指肠。 生理学特点: 妊娠期14-17天,哺乳期21天。
地鼠对皮肤移植的免疫反应特别强。封闭群体内个体间皮肤移植常可存活,并能长期生存下来。不同群体间移植100%被排斥。 应用:
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1肿瘤学研究:地鼠的颊囊可移植肿瘤。 金黄地鼠无原发性肺肿瘤,最适合诱发支气管肺癌和肺肿瘤。 2生理学研究: 妊娠期短,繁殖快,可以用于生殖生理和计划生育的研究。 3遗传学研究
4糖尿病研究:中国地鼠可自发产生糖尿病。
5营养学研究:地鼠对维生素缺乏敏感,可以用于维生素B2,维生素A,维生素E缺乏症的研究。 6药物学、毒理学、致畸等方面的研究。 7冬眠和冬眠机制的研究。 8金黄地鼠常用于狂犬疫苗、乙型脑炎疫苗的制备及鉴定。 兔的生物学特性:染色体22对。 一般特性:
1草食性,性情温驯,群居性差。 2听觉、嗅觉灵敏。 3食粪性 4喜干怕热
5夜行性,嗜眠性
6具有啮齿类行为,喜欢磨牙且有啃木习惯。 解剖学特点:
1骨骼系统:易骨折,是较好的骨折模型。前半身肌肉不发达,后半身肌肉很发达。
2消化系统:盲肠非常大,回盲肠有特有的圆小囊,囊壁富有淋巴滤泡,其黏膜不断分泌碱性液体,可以中和盲肠中微生物分解纤维素所产生的各种有机酸,有利于消化吸收。 3双子宫。
4循环系统:胸腔构造与其他动物不同,胸腔中央有纵隔将胸腔分为左右两部,互不相通。心脏外有心包。开胸后打开心包暴露心脏进行实验操作时,只要不弄破纵隔,动物不需做人工呼吸。
5淋巴系统:后肢膝关节曲面腘窝处有1个比较大的呈卵圆形的腘淋巴结,易触摸固定,适于做淋巴结内注射。 6神经系统:颈部有减压神经独立分支。
7皮毛系统:表皮很薄,真皮较厚,坚韧而有弹性。全身被毛,1年更换2次。 8耳大,血管清晰,便于注射和采血。 9眼:眼球巨大,虹膜内有色素细胞。 生理学特点:
1恒温动物:正常体温在38.5℃-39.5℃之间。对热物质反应敏感,适于用作热原实验。 2草食性动物,其消化道中的淋巴球囊有助于对粗纤维的消化。 3食粪(软便)现象,是正常的生理现象。硬便和软便。 4兔属刺激性排卵动物(家兔和猫和骆驼),交配后10-12小时排卵。(自发性排卵(大、小鼠、狗))。 性周期8-15天,妊娠期30-33天,哺乳期40-45天。 5家兔的卵子是哺乳动物中最大的。
6特殊的血型和唾液型:唾液型分排出型和非排出型。血型有α、β、αβ、O型四种。 主要品种品系:
日本大耳白兔,新西兰白兔,青紫蓝兔,中国白兔 应用:
1致热原等实验研究:家兔体温变化灵敏,对细菌内毒素、化学药品、异种蛋白最易产生发热反应。 2微生物和免疫学研究:兔血清产量多,可制备高效价和特异性强的免疫血清。
3兔属刺激性排卵动物,可准确检测排卵时间并容易取得胚胎材料,可用于避孕药的研究。 4眼科研究:兔眼球大,便于进行手术操作和观察,是眼科研究中最常用的动物。 5心血管病和肺心病的研究
6对动脉硬化的研究:兔对外源性胆固醇的吸收率高达75%-90%,家兔形成高脂血症、主动脉粥样硬化斑块、冠状动脉粥样硬化等病变与人类病变及其相似。
7皮肤反应试验:兔对刺激反应敏感,反应近似于人。 犬的生物学特性:染色体39对。 一般特性:
1喜近人,易驯养。
2适应能力强,可承受比较热和冷的气温。
3习惯不停的走动。习惯啃咬骨头与喜欢吃肉类或脂肪类饲料。
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4寿命:10-20年。 解剖学特点:
1无锁骨,肩胛由骨骼肌连接躯体,阴茎骨存在是其特征之一。
2视网膜上无黄斑,故没有最清晰的视觉点。犬为红绿色盲,故不能用红绿色为条件刺激来进行条件反射。 3犬的嗅脑、嗅器官、嗅神经极为发达。
4汗腺不发达,趾垫有少许汗腺。散热主要靠呼吸频率。 5食管全部由横纹肌构成。胃较小,容易作胃导管手术。 生理学特点:
1春秋季单发情动物。
性周期180天,妊娠期60天,哺乳期60天。
2犬有5中血型,ABCDE。只有A型能引起输血反应。
3犬有四种神经类型:多血质,粘液质,胆汁质,忧郁质。 主要品种品系
比格犬被公认为是较理想的实验用家犬,已成为目前实验研究型别中最标准的动物。 四系杂交犬,纽芬兰犬,墨西哥无毛犬等。
猫的生物学特性:染色体19对。
1猫舌表面有无数丝状突起乳头,被有较厚的角质层,呈倒钩状。 2猫的血压稳定,血管壁较坚韧,对强心苷敏感。
3猫的大脑小脑发达,对去脑实验和其他外科手术耐受力较强。猫的平衡感觉、反射功能发达,瞬膜反应敏锐。 4猫的呕吐反射敏感,适宜进行呕吐反射方面的实验。 5猫对吗啡的反应和其他动物相反,猫表现中枢兴奋。 6刺激性排卵动物(家兔和猫和骆驼) 应用:
1降压试验选用的实验动物是猫。
2猫有及其敏感的神经系统,头盖骨和脑的形状固定,是脑神经生理学研究的绝好实验动物:大脑僵直、姿势反射实验以及刺激交感神经时的瞬膜及虹膜反应实验。 猪的生物学特性:染色体19对。
1发达的吻突和唾液腺,汗腺不发达。
2小型猪的胎盘属于上皮绒毛膜型,母源抗体不能通过胎盘屏障。猪初乳中多含IgG、IgA和IgM,常乳中含有多量的IgA,初生猪仔体内缺少母源抗体,只能从初乳中获得。 3研究动脉粥样硬化(人类冠心病)最好的动物模型。 4小型猪是进行实验性烧伤研究的理想动物。 猕猴
1群居、有社会等级制度。好奇心与模仿力强。
2手的拇指、脚的大趾能与其他四指相对,能握物攀爬,掌面有指纹和掌纹。 3猕猴口腔内两侧有颊囊,存储食物。
4视网膜上有黄斑,中央凹,有立体视觉能力。有色觉。听觉敏感,有发达的触觉和味觉。 5猕猴体内缺乏维生素C合成酶,不能在体内合成维生素C(猕猴、豚鼠)。
6性皮肤:雌猴在交配季节,生殖器官周围区域发生肿胀,外阴、尾根部、后肢的后侧面、前额和脸部等处的皮肤都会发生肿胀,这种肿胀称为“性皮肤”。性皮肤是猕猴属的生殖生理特征之一。在排卵前期,特别是排卵期出现明显肿胀、发红,在排卵期特别明显,月经来临之前消退。 7在制造和鉴定脊髓灰质炎疫苗时,猕猴是唯一的实验动物。
8是筛选抗震颤麻痹药物的最好的动物。也是器官移植中重要的动物。 鸡
1没有汗腺,怕热不怕冷。 2食管中部有嗉囊,储存食物。
3无膀胱,尿与粪便一起排出,尿呈白色。 4最适温度10-21℃,光照。14-16h/天。
5鸡胚常用于病毒的培养、传代和减毒,因此常用于病毒类疫苗生产鉴定和病毒学研究。是麻疹疫苗、狂犬疫苗和流感疫苗的主要材料。 蟾蜍与蛙
1心脏在离体情况下仍有节奏的搏动,常用来研究心脏的生理、药物对心脏的作用;
2腓肠肌和坐骨神经可用来观察外周神经的生理功能,药物对外周神经、横纹肌或神经肌肉连接的作用; 3蛙或蟾蜍可进行观察脊髓休克、脊髓反射、反射弧分析、肠系膜或蹼血管微循环的实验。
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实验动物疾病分为传染性疾病和非传染性疾病。 人兽共患病:指自然条件下可以在人和其他脊椎动物之间互相传播的疾病。也就是人类和脊椎动物由共同的病原体引起,而在流行病学上又互相关联的疾病。如狂犬病毒、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒、流行性出血热、B病毒(猴疱疹病毒)、沙门菌、志贺菌、结核分枝杆菌、致病皮肤真菌及弓形体等。肝炎病毒。(人不感染鼠肝炎病毒。)
动物烈性传染病:对自然宿主致病性强,常引起爆发流行,甚至毁灭整个动物群,如鼠痘病毒、兔出血病毒、多杀性巴氏杆菌、鼠棒状杆菌、泰泽菌等。 狂犬病分为狂暴型和沉郁型2种类型。
狂暴型分3个时期:前驱期、兴奋期、麻痹期。 发生疫病时的扑灭措施:
1及时发现、诊断和上报疫情,并通知邻近单位做好预防工作。
2迅速隔离患病动物,污染的环境和器具紧急消毒。实验用动物应停止实验观察或淘汰。
3若发生危害性大的疫病,如鼠痘、流行性出血热等应采取封锁等综合性措施。动物痊愈或消毒处理后1个月方可解除封锁。
4病死或淘汰动物应采取焚烧等措施合理处理。 5应及时报告上级管理部门和防疫部门。 选择实验动物的原则:
1广泛查阅文献,积极进行交流。 2进行必要的动物预试验。
3相似性原则:1结构和功能的相似性;2时相或年龄状态的相似性;3群体分布的相似性;4生态健康状况的相似性;5疾病特点的相似性;6操作实感的相似性。
4选用解剖、生理特点符合实验项目的要求的实验动物。 5选用患有类似人类疾病的近交系或突变系动物。 6选用结构功能简单又能反映研究指标的动物。 7匹配性原则。 8易获性原则。
实验动物选择应注意的问题
年龄、体重、性别、生理状态、健康状况及动物品系、等级及个体选择因素等。注意有关的国际规范和动物福利。 环境对实验动物的影响:
1国家标准中最适温度为18-28℃,日温差不超过3℃。 2湿度40%-70%。
3换气次数,每小时更新10-15次,气流速度13-18cm/s。 4噪声,国家标准要求噪声应控制在60分贝以下。 5照明
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6氨气国际标准要求其浓度应小于14mg/m。 7笼具、垫料和饮用水。水PH值为:2.5-3.0。
动物实验:是指人为改变环境条件,观察并记录动物演出型的变化,以探讨生命科学中的疑难问题。 实验动物可用公式表示:R=(A+B+C)×D+E; R:实验动物的总反应或演出型; A:动物种间的共同反应;
B:动物品种,品系特有的反应; C:动物的个体反应;
D:环境因素(包括实验处理); E:实验误差。
影响动物实验的因素: 1遗传因素 2生物因素 3环境因素
3实验技术环节因素 4实验误差
人类疾病动物模型:是指医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料。 按原因分类:自发性、诱发性、抗疾病、生物医学动物模型。
自发性动物模型:是指实验动物未经任何有意识的人工处理,在自然情况下动物自然发生的疾病,或由于基因突变的异常表现通过遗传育种保留下来的动物模型。自发性动物模型以遗传病和肿瘤居多。
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优点:在一定程度上较少了人为的因素,更接近自然的人类疾病。
缺点:目前发现的疾病种类有限,饲养条件要求高,自然发病率低,发病周期长,不可能大量应用。
诱发性动物模型:是指通过使用物理、化学、生物等致病手段,人为地造成动物组织、器官或全身形成类似人类疾病的动物模型,又称为实验性动物模型,即人工地诱发处特定疾病,以供研究。
优点:能在短期内复制大量的疾病动物模型,并能严格控制各种条件,使复制出的疾病模型适合研究的目的。 缺点:诱发性动物模型和自然产生的基本模型在某些方面存在一定的差异,而且有些人类疾病不能用人工方法诱发出来。
人类疾病动物模型的意义: 1避免在人体进行实验。 2简化缩短研究周期。
3提供发病率较低的疾病材料。
4可以严格控制试验条件,增强实验材料的可比性。 5样品收集方便,结果容易分析。 6有助于全面认识疾病的本质。 人类疾病动物模型的复制原则:
1尽可能重现所要求的人类疾病的模型。 2选用有实用价值的、标准化的实验动物。 3经济易行。
4不能盲目的使用近交系动物。
5安全性:应不对实验人员和其他人员的生命安全产生威胁。
免疫缺陷动物:是指由于先天性遗传突变或用人工方法造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物。 T淋巴细胞免疫缺陷:裸大鼠和裸小鼠。
裸小鼠:是指先天性无毛、无胸腺的小鼠。细胞免疫功能丧失。裸基因nu是一个隐性突变基因。T淋巴细胞明显减少或缺失;细胞免疫力功能低下;B细胞、NK细胞功能基本正常。 新生裸鼠无触须是鉴别正常新生鼠的要点。
应用:是研究人肿瘤、人类各种免疫缺陷病、麻风病的理想动物模型。
裸大鼠:基因rnu。一般特征与裸小鼠相似。无胸腺。除头部四肢有稀少被毛,全身几乎无毛。缺乏功能性T细胞,B细胞功能基本正常,NK细胞活力增强。维持经费比裸小鼠更高。
转基因动物:是指染色体基因组中整合有外源基因并能遗传给后代的一类动物。 转基因:整合到动物染色体基因组的外源基因被称为转基因。 嵌合体动物:只有部分组织细胞中整合有外源基因的动物。 转基因动物和嵌合体动物的区别:
相同点:它们染色体基因组内都整合有外源基因。 不同点:
1转基因动物所有组织细胞基因组中均整合有外源基因,嵌合体只是部分组织细胞内;
2转基因动物能将外源基因遗传给下一代,嵌合体只有当外源基因整合入生殖细胞时才能遗传;
3外源基因的整合发生在第一次卵裂以前则动物所有组织细胞中都整合有外源基因若发生在第一次卵裂后则得到嵌合体动物。
转基因动物的基本原理:是将改建后的目的基因(或基因组片段)用显微注射等方法注入实验动物的受精卵(或着床前胚胎细胞),然后将此受精卵(或着床前胚胎细胞)在植入受体动物的输卵管(子宫)中,使其发育成携带有外源基因的转基因动物,人们可以通过分析转基因和转基因动物表型的关系,从而揭示外源基因的功能,也可以通过转入目的基因培育品种优良的工程动物。 以小鼠为例,显微注射法构建转基因动物的流程: 超排处理的雌鼠×雄鼠 采集受精卵 正常雌鼠 ×结扎雄鼠 受精卵的显微注射 移植 假孕母鼠 产生子代 鉴定 转基因鼠系 9
克隆动物:是指生物体通过体细胞进行的无性生殖以及由无性生殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的群体。
克隆技术的原理:将含有遗传物质的供体细胞核移植到除去细胞核的卵细胞中(因为卵和精子的核内染色体是单倍体,而体细胞核内的染色体是双倍体,若不将其核取出,体细胞的核移植后就会形成染色体倍数异常的细胞),利用微电流刺激等方法使二者融合为一体,然后促使该新细胞分裂繁殖,发育成胚胎。当胚胎发育到一定程度再移植到假孕雌性动物的子宫中使之怀孕,孕育成熟并产下与供体细胞基因相同的动物。
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