（12）发明专利申请
（21）申请号 CN201510485573.2 （22）申请日 2015.08.09 （71）申请人 中国水稻研究所
地址 310006 浙江省杭州市下城区体育场路359号
（10）申请公布号 CN105112435A
（43）申请公布日 2015.12.02
（72）发明人 王克剑;王春;沈兰;付亚萍;严长杰 （74）专利代理机构 杭州中成专利事务所有限公司
代理人 金祺
（51）Int.CI
C12N15/66; C12N15/82;
权利要求说明书 说明书 幅图
（54）发明名称
植物多基因敲除载体的构建及应用
（57）摘要
本发明公开了一种植物多基因敲除载体的
构建及应用，包括如下步骤：1)、双元表达载体pC1300-Cas9的构建；2)、中间载体SK-gRNA的构建；3)、单个目的gRNA的构建；4)、多个gRNA的串联及最终双元表达载体的构建。本发明利用同尾酶连接的方法将多个gRNA序列连接至已有Cas9序列的双元表达载体上，进而通过农杆菌
侵染的转基因技术获得植物多突变体。利用这种同尾酶连接的构建策略，可以组合多个gRNA，通过一次转基因就可获得植物多突变体，从而建立了一种高效、便捷制备植物多突变体的方法。
法律状态
法律状态公告日
2015-12-02 2015-12-02 2015-12-30 2015-12-30 2018-11-27
法律状态信息
公开 公开
实质审查的生效 实质审查的生效 授权
法律状态
公开 公开
实质审查的生效 实质审查的生效 授权
权利要求说明书
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说明书
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