实验七 果蝇的伴性遗传
14级生物技术1班 王堽 20140322142
一、目的
1、记录交配结果和掌握统计处理方法; 2、正确认识伴性遗传的正、反交的差别。 二、原理
1910年,摩尔根在实验室中无数红眼果蝇中发现了一只白眼雄蝇。让这只白眼雄蝇与野生红眼雌蝇交配,F1全是红眼果蝇。让F1的雌雄个体相互交配,则F2果蝇中有3/4为红眼,l/4为白眼,但所有白眼果蝇都是雄性的。这表明,白眼这种性状与性别相连系,外祖父的性状通过母亲遗传给儿子。这种与性别相连的性状的遗传方式就是伴性遗传。摩尔根等对这种遗传方式的解释是:果蝇是XY型性别决定动物,控制白眼的隐性基因(W)位在X性染色体上,而Y染色体上却没有它的等位基因。如果这种解释是对的,那么白眼雄蝇就应产生两种精子:一种含有X染色体,其上有白眼基因(W),另一种含有Y染色体,其上没有相应的等位基因;F1杂型合子(Ww)雌蝇则应产生两种卵子:一种所含的X染色体,其上有红眼基因(W);另一种所含的X染色体,其上有白眼基因(W);后者若与白眼雄蝇回交,应产生1/4红眼雌蝇,l/4红眼雄蝇,1/4白眼雌蝇,l/4白眼雄蝇。实验结果与预期的一样,表明白眼基因(W)确在X染色体上。
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果蝇的性染色体有X和Y 两种类型.雌蝇细胞内有2条X染色体,为同配性别(XX),雄蝇为XY是异配性别.性染色体上的基因在其遗传过程中,其性状表达规律总是与性别有关.因此,把性染色体上基因决定性状的遗传方式叫伴性遗传。
果蝇的红眼与白眼是一对由性染色体上的基因控制的相对性状。用红眼雌果蝇与白眼雄果蝇交配,F1代雌雄均为红眼果蝇,F1代相互交配,F2代则雌性均为红眼,雄性红眼:白眼=1:1;相反用白眼雌果蝇与红眼雄果蝇交配,F1代雌性均为红眼,,雄性都是白眼,F1相互交配得F2代,雌蝇红眼与白眼比例为1:1,雄蝇红眼与白眼比例亦为1:1。由此可见位于性染色体上的基因,与雌雄性别有关系。
伴性遗传可归纳为下列规律:
1. 当同配性别的性染色体(如哺乳类等为XX为雌性,鸟类ZZ为雄性)传递纯合显性基因时,F1雌、雄个体都为显性性状。F2性状的分离呈3显性:1隐性;性别的分离呈1雌:1雄。其中隐性个体的性别与祖代隐性体一样,即1/2的外孙与其外祖父具有相同的表型特征。
2.当同配性别的性染色体传递纯合体隐性基因时,F1表现为交叉遗传,即母亲的性状传递给儿子,父亲的性状传递给女儿,F2中,性状与性别的比例均表现为1:1。
3.存在于Y染色体差别区段上的基因
在进行伴性遗传实验时,也会出现例外个体,即在 B 杂交组合, F1
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代中出现不应该出现的雌性白眼,这是由于两条 x 染色体不分离造成的,不过这种情况极为罕见,约几千个个体中才有一个。 三、仪器、设备、试剂及材料 1、器材
恒温培养箱,双筒解剖镜,架盘天平,高压灭菌锅,培养瓶,麻醉瓶,白瓷板,毛笔,镊子,棉花塞。 2、试剂
乙醚,丙酸,酵母粉,玉米面,琼脂条,葡萄糖,蒸馏水。 3、材料
黑腹果蝇 (Drosophila melanogaster)品系,野生型红眼 (+)和突变型白眼 (white eye,w).决定黑腹果蝇红眼和白眼的基因位于X染色体上,是一对等位基因. 四、步骤 1、配制培养基 果蝇培养基配方 :
A:糖6.2克,加琼脂0.62克,再加水38mm煮沸溶解;
B:玉米粉8.25克,加水38mm,加热搅拌均匀,再加0.7克酵母粉; A和B混合加热成糊状后,加0.5mm丙酸,即可分装到培养瓶中。 倒入培养基的厚度约2厘米,在培养基中插入一张消过毒的干燥硬纸片,以扩大果蝇的活动场所。
将培养瓶置入高温高压灭菌锅内,以121℃,1.5大气压消毒30分钟。 消毒完成后,待灭菌锅内压力降至常压后开启锅盖使其半开,再以灭
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菌锅干燥培养瓶之棉塞30分钟,完成后取出使其冷却备用。 待培养基冷却后,用酒精棉花擦去瓶壁上的水珠。因为瓶里有了积水,移入的果蝇容易淹死或粘住。 2、收集处女蝇
雌果蝇自羽化开始10小时之内尚未成熟而无交配能力。选择处女蝇时,先把培养瓶中的老果蝇全部除去,收集10小时之内羽化出来的新果蝇,麻醉后用放大镜在百瓷板上将果蝇雌雄分开,这时得到的雌果蝇应该全部都是处女蝇。如果要验证选取的处女蝇是否准确,先不要放入雄蝇,3天后看雌蝇是否产卵,如果产卵就不是处女蝇了。 3、接种
按照无菌操作技术,一手持培养瓶,一手持广口瓶,轻轻地旋转广口瓶棉塞,使果蝇掉离棉塞,迅速取下两瓶的棉塞,瓶口相对,培养瓶在上,果蝇触角根部的感觉神经能和人类的耳朵一样感知声音和重力,受惊吓后会向上逃走,轻轻敲击广口瓶,果蝇会陆续飞入培养瓶,塞好瓶口,进行伴性遗传杂交时,应该同时配置正交和反交试验组合.因为决定性状的基因在性染色体上,正,反交的结果会出现性状和性别的差异.在果蝇培养前,要在杂交培养瓶上贴上标签,标明实验题目,杂交组合,杂交日期,实验者姓名.最后,把培养瓶放在20~25℃恒温培养箱内饲养果蝇.
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标签如下: A组 ++ × WY 日期 姓名 4、去亲本:
果蝇饲养几天以后,肉眼可见培养瓶中出现了幼虫和蛹,这时可以将亲本移出,以防亲本与F1果蝇混杂,影响实验结果。 5、F1代性状观察和统计:
再经过几天饲养之后,培养瓶中会陆续羽化出F1代果蝇,仔细观察F1代果蝇性状,统计正,反交F1代表型性状的观察结果,并将结果填入表6、F1代自交:
把正交试验得到的F1代果蝇转入一个新培养瓶中进行相互交配,把反交试验得到的F1代果蝇也转入一个新培养瓶中进行互交(不需挑选处女蝇),以期获得F2代. 7、去亲本:
经过7~8天的培养,当培养瓶里出现了F2代幼虫和蛹时,把培养瓶里的成蝇转移出去,防止与F2代果蝇混杂. 8、F2代性状观察和统计:
再经过几天饲养之后,F2代果蝇会陆续羽化来,仔细观察F2代果蝇的性状,统计正,反交F2代表型性状的观察结果,并将结果填入表格。
B组 WW × +Y 日期 姓名 -/
9、伴性遗传试验结果分析:
根据实验观察和统计结果,应用统计学分析方法,分析果蝇眼色遗传的现象和特点,深入理解伴性遗传的本质和规律。 五、结果 1、实验记录
表1.果蝇观察记录(A)瓶
日期 室气压 恒温箱 各类果蝇数目 温度 ℃ 10.21 10.27 10.30 11.2 11.4 11.5 11.10 11.12 11.13 11.14 11.17 11.21 11.24 18.5 82.11 24.1 16.2 81.81 23.8 16.8 82.14 23.2 18.8 82.39 22.4 18.4 81.56 22.6 18.1 81.76 21.4 18.4 81.52 21.6 17.6 81.49 21.4 19.5 81.23 23.1 16.5 81.57 22.7 15.5 83.23 23.1 16.8 83.15 21.5 14.8 83.12 22.0 接种:♀(+) × ♂(w) =10:10 瓶中出现幼虫,放出亲本 15 16 12 0 0 0 16 19 15 0 0 0 红眼♂(+) 白眼♂(w) 红眼♀(+) 白眼♀(w) 温℃ Kp 挑出6对转接入新培养瓶中 放出F1代亲本 5 7 8 45 57 31 6 5 5 48 57 28 13 13 12 85 106 65 0 0 0 0 0 0 -/
表2.果蝇观察记录(B)瓶
日期 室气压 恒温箱 各类果蝇数目 温度 ℃ 10.21 10.27 10.30 11.2 11.4 11.5 11.10 11.12 11.13 11.14 11.17 11.21 11.24 18.5 82.11 24.1 16.2 81.81 23.8 16.8 82.14 23.2 18.8 82.39 22.4 18.4 81.56 22.6 18.1 81.76 21.4 18.4 81.52 21.6 17.6 81.49 21.4 19.5 81.23 23.1 16.5 81.57 22.7 15.5 83.23 23.1 16.8 83.15 21.5 14.8 83.12 22.0 接种:♀(w) × ♂(+) =10:10 瓶中出现幼虫,放出亲本 0 0 0 15 13 19 17 12 16 0 0 0 红眼♂(+) 白眼♂(w) 红眼♀(+) 白眼♀(w) 温℃ Kp 挑出6对转接入新培养瓶中 放出F1代亲本 9 6 4 44 56 36 8 9 6 42 54 34 7 7 8 47 57 26 6 8 9 39 49 38 2、结果统计
表3.F1代统计结果(A)瓶
观察结果 统计日期 10.30 各类果蝇的数目 红眼♂(+) 红眼♀(+) 15 16 -/
11.2 11.4 合计
16 12 50 19 15 43 表4.F1代统计结果(B)瓶
观察结果 统计日期 10.30 11.2 11.4 合计 各类果蝇的数目 白眼♂(w) 红眼♀(+) 15 13 19 47 表5.F2代统计结果(A)瓶
17 12 16 45 观察结果 统计日期 11.12 11.13 11.14 11.17 11.21 11.24 合计 红眼♂(+) 各类果蝇的数目 白眼♂(w) 红眼♀(+) 白眼♀(w) 5 7 8 45 57 31 153 6 5 5 48 57 28 149 13 13 12 85 106 65 294 0 0 0 0 0 0 0 -/
百分比 26% 25% 49% 0 表6.F2代统计结果(B)瓶
观察结果 统计日期 11.12 11.13 11.14 11.17 11.21 11.24 合计 百分比
六、结果分析
表16 F2代A组合x2表
观察值(0) 理论值(e) (o-e) (o-e)2 (o-e)2/e 149 4 16 0.05 149 0 0 0 298 -4 16 0.05 0 0 0 0 红眼♂(+) 白眼♂(w) 红眼♀(+) 白眼♀(w) 红眼♂(+) 各类果蝇的数目 白眼♂(w) 红眼♀(+) 白眼♀(w) 9 6 4 44 56 36 155 25% 8 9 6 42 54 34 153 25% 7 7 8 47 57 26 152 25% 6 8 9 39 49 38 149 23% 153 149 294 0 -/
x2 p
0.1 0.80~0.70 查x2表得:当x2=0.1时,0.70
0.05,说明实验结果与理论预期值相符,他们之间的误差属于随机误差,说明此实验F2代值科学,正交试验成功。
表16 F2代B组合x2表
观察值(0) 理论值(e) (o-e) (o-e)2 (o-e)2/e x2 p
查x2表得:当x2=0.127时,0.70
0.05,说明实验结果与理论预期值相符,他们之间的误差属于随机误差,说明此实验F2代值科学,反交试验成功。
根据x2测定,P>0.05,说明观察值与理论值之间的偏差是没有意义的,也就是说,可以认为观察值是符合假设的,说明实验本身没有不合理,
152 3 9 0.06 152 1 1 0.007 0.127 0.80~0.70 152 0 0 0 152 -3 9 0.006 红眼♂(+) 白眼♂(w) 红眼♀(+) 白眼♀(w) 155 153 152 149 -/
且正交与反交结果不同,与伴性遗传本身特点相符。
综上所述,本实验结果符合伴性遗传的假设,说明眼色这对相对性状是由位于X上的基因控制。其遗传是伴性遗传。 七、讨论
1.为什么要做正反交?
答:这是由于伴性遗传的特点所决定的。性染色体是异形的,其实不仅形态上不相同,质量上也大不相同,以XY型而言,X染色体和Y型染色体有一部分是同源的,该部分的基因是互为等位的,其所控制的遗传行为常与常染色体基因控制的性状相同,另一部分是非同源的,该部分基因就不能互为等位,X染色体非同源部分的基因只存在于X染色体上,Y染色体非同源部分的基因只存在于Y染色体上,两者无配对关系,无功能上的联系,这些基因称半合基因,它们所控制的性状称为伴性性状,因为这些性状的遗传与性别有关,称为伴性遗传。 在伴性遗传中,基因位于性染色体上,在本实验中,果蝇的眼色基因位于X染色体上,所以,正交和反交的结果是不一样的,这是伴性遗传的一个重要特征,当正反交结果不同时,也可反过来证明该性状是伴性遗传。
2、为什么挑取果蝇组成选育F2代时,不需要处女蝇?
答:亲本挑选时,由于需要该种性状该种基因型的亲本,所以需要处女蝇,当亲本杂交F1代出现后,A组合中只有两种表现型,即红眼雌性和红眼雄性,B组合中只有红眼雌性和白眼雄性,两个组合中,雌雄果蝇都各只有一种性状,随机挑取5对果蝇时,所选的性状也只是
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那种性状,所以是不是处女蝇都不会影响实验结果。 3、伴性遗传的特点。
答:1.当同配性别的性染色体(如哺乳类等为XX为雌性,鸟类ZZ为雄性)传递纯合显性基因时,F1雌、雄个体都为显性性状。F2性状的分离呈3显性:1隐性;性别的分离呈1雌:1雄。其中隐性个体的性别与祖代隐性体一样,即1/2的外孙与其外祖父具有相同的表型特征。
2.当同配性别的性染色体传递纯合体隐性基因时,F1表现为交叉遗传,即母亲的性状传递给儿子,父亲的性状传递给女儿,F2中,性状与性别的比例均表现为1:1。
3. 3.存在于Y染色体差别区段上的基因(特指人类或哺乳类)所决定的性状,或由W染色体所携带的基因所决定的性状,仅仅由父亲(或母禽、母鸟)传递给其儿子(或雌禽、母鸟)。表现为特殊的Y连锁(或W连锁)遗传。 八、作业
1、何谓伴性遗传?限性遗传?从性遗传?人类有哪些性状是伴性遗传?
答:性染色体是异形的,其实不仅形态上不相同,质量上也大不相同,以XY型而言,X染色体和Y型染色体有一部分是同源的,该部分的基因是互为等位的,其所控制的遗传行为常与常染色体基因控制的性状相同,另一部分是非同源的,该部分基因就不能互为等位,X染色
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体非同源部分的基因只存在于X染色体上,Y染色体非同源部分的基因只存在于Y染色体上,两者无配对关系,无功能上的联系,这些基因称半合基因,它们所控制的性状称为伴性性状,因为这些性状的遗传与性别有关,称为伴性遗传。
从性遗传是常染色体上基因的遗传,具有这种基因的同一基因型个体由于不同性别中内分泌因素的作用,在一性别中表现为显性,在另一性别中表现为隐性。
限性遗传是指只存在于某一性别中表现的性状的遗传,这类性状多数是由常染色体上的基因所决定的,例如,雌性中的产蛋量等。 人类的伴性遗传:红绿色盲,血友病,抗维生素D佝偻病等。 2、试述常染色体和性染色体的区别与联系。
答:区别:1.常染色体形态大小基本一致,而性染色体的形态大小可能有很大区别,如X和Y。
2.性染色体上携带性别决定信息,但常染色体上没有。
3.常染色体上的基因都是成对存在,而性染色体上不是,如X和Y。 4.常染色体遗传中正反交后代中表现型一致,没有性别的差异,但性染色体遗传中后代雌雄中表现型在正反交中不一样。 5.在大多数生物中,常染色体数目多于性染色体数目。
联系:无论是常染色体还是性染色体,它们的复制,转录,翻译都共用一套密码子,并且遵循核基因控制,它们共同作用,相辅相成才组曾了生物体完整的遗传信息,它们同样都是遗传信息的载体。
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