一、实验目标
1.掌握旋光仪的操纵使用.
2.懂得旋光法测粗淀粉的基来历根基理. 二、实验原理
在加热及稀盐酸的作用下,淀粉水解并转入盐酸溶液中.在一定的水解条件下,分歧谷物淀粉的比旋光度是分歧的.其[α]D在171~195之间,因此可用旋光法测定粗淀粉的含量.
三、实验仪器、试剂
1.1%盐酸溶液:将比重为的盐酸用蒸馏水稀释至1000mL,标定后的浓度为±.
2.30%硫酸锌溶液. 3.15%亚铁氰化钾溶液.
4.旋光仪、水浴锅、容量瓶(100mL)、锥形瓶(100mL)、分析天平(感重)、烧杯. 四、实验步调
1.称取粉碎过40目筛的样品(切确至)放入200mL烧杯中,沿器壁缓慢加入50mL 1%盐酸溶液,并轻轻摇动使全部样品湿润,然后将烧杯放入沸水浴中.在3分钟内使其沸腾,准确沸腾15分钟,当即取出,迅速冷却至室温.
2.先加入1mL 30%硫酸锌溶液,充分混匀后,再加入1mL
20
亚铁氰化钾溶液,摇匀,并全部转移至100mL容量瓶中,用少量蒸馏水将锥形瓶冲洗几次.若泡沫过多,加几滴无水乙醇消泡,用蒸馏水定容至刻度.混匀后过滤,弃取初始滤液15mL,收集其余滤液充分混匀后停止旋光测定. 五、实验成果
淀粉含量(%)=
α×100 [α] D·L·W
20
×100
式中: α——测得的旋光度.
[α] D :淀粉的比旋光度(见表4-1). L:旋光管长度(dm). W:样品重量(g).
表1 分歧食粮淀粉的比旋光度
品 种 [α] D20 小 麦 黑 麦 大 麦 水 稻 玉 米 品 种 [α] D20 土豆 小 米 荞 麦 燕 麦 20
表2 实验测得的旋光度值α
旋光度值α 第一次 第二次 第三次 平均值 [α] D=182.7 L=2dm 所以
淀粉含量(%)=
×100 ×2×
×100=89.28%
20
六、实验说明
1.实验中,沸水浴要准备足量的水.用定时钟准确记时. 2.提前打开旋光仪,使其进入稳定工作状态. 七、实验讨论 (一)实验成果分析
经查资料可知小麦中淀粉含量一般为53%~70%,而经计算我们组测得的值为89.28%,成果偏高,能够原因有:
(1)该面粉是优质面粉,淀粉含量较高; (2)旋光仪不敷切确;
(3)能够是由于测定时水温较低导致旋光度偏高,环境温度
也有影响;
(4)样液中能够含有旋光度更高的杂质.
(二)思考题:
1.样品加盐酸处理时,煮沸时间少于或多于15分钟会对测定成果发生什么影响?
答:因为淀粉水解成葡萄糖才有旋光,节制加热时间是为了水解完全包管测定的准确性.若煮沸时间少于15min,淀粉能够水解不完全;如果煮沸时间多于15min,会发生副反应,发生糊精,也会影响实验成果.
2.为什么过滤时要弃取初始滤液15mL?
答:一是因为本小组在用滤纸做漏斗时未用蒸馏水先弄湿滤纸,直接倒需要过滤的浑浊液,因此会有部分未通过滤
纸,直接从滤纸与漏斗的缝隙处流入烧杯;二是为了在滤纸概况形成滤饼层,此样液固体含量较高,适合使用滤饼层过滤,通常,过滤开端阶段得到的是浑浊液,对实验成果会有影响,所以要舍弃前15ml. (三)实验方法
1.本实验采取旋光法测定淀粉含量,本法适用于分歧来历的淀粉.
(1)优点:重现性好、操纵简便、疾速,由于淀粉的比旋光度大,直链淀粉和支链淀粉的比旋光度又很接近,因此本法对于可溶性糖类含量不高的谷物样品具有较高的准确度;
(2)缺点:蛋白质含量较高的样品,还有一些未知或性质不清楚的样品及淀粉已承受热或变性的样品,如高蛋白营养米粉,用旋光法测定时误差较大. 2.淀粉含量测定的其他方法有: (1)物理法:[1]相对密度法 [2]折光法 [3]旋光法
(2)化学法:[1]还原糖法
[2]碘量法(简便疾速、活络、准确度高)
[3]比色法
注:食品中还原糖、蔗糖、淀粉和果胶物质等的测定多采取化学分析法,但所测得的多是糖类物质的总量,不克不及确定糖的组分及每种糖含量.
(3)色谱法、电泳法:可对各种糖分停止分离和定量. (4)酶法:活络度高、干扰少.可测定葡萄糖、蔗糖和淀粉
等.
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