外泌体目前的生产工艺

一、

通过干细胞培养，获得外泌体。（如人脂肪干细胞，脐血干细胞、动

物干细胞）二、

直接在动物器官、组织中提取外泌体。（如血液、唾液、尿液、细胞

上清、脑脊液、羊水、胎盘组织）三、四、

直接在植物中提取外泌体。（如番茄、人参、红豆杉、生姜）通过基因工程大肠杆菌能够分泌外泌体（如采用基因编辑、各种转

染体系）五、

通过纳米尺寸的过滤器对细胞进行连续的挤压，可产生外泌体模拟

物纳米囊泡六、

人工合成外泌体复合物。（如利用透明质酸的配体活性与聚乙烯亚胺

的透膜活性使二者协同作用人工合成外泌体复合物）

外泌体目前的提取工艺

一、

超速离心法，这是目前外泌体提取最常用的方法。

此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足，电镜鉴定时发现外泌体聚集成块，由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准，也有一些研究认为此种方法得到的是微泡不是外泌体。二、

过滤离心，这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性，但

同样存在纯度不足的问题。三、

密度梯度离心法，用此种方法分离到的外泌体纯度高，但是前期

准备工作繁杂，耗时，量少。

四、免疫磁珠法，这种方法可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操

作简单、不需要昂贵的仪器设备，但是非中性pH和非生理性盐浓度会影响外泌体生物活性，不便进行下一步的实验。五、

PS亲和法，该方法将PS（磷脂酰丝氨酸）与磁珠结合，利用亲和

原理捕获外泌体囊泡外的PS。该方法与免疫磁珠法相似，获得的外泌体形态完整，纯度最高。由于不使用变性剂，不影响外泌体的生物活性，外泌体可用于细胞共培养和体内注射。2016.9《ScientificReports》杂志发表了该方法最新数据，表明PS法可提取相当高纯度的外泌体。六、

色谱法，这种方法分离到的外泌体在电镜下大小均一，但是需要

特殊的设备，应用不广泛