专利名称：单链寡核苷酸的制备方法专利类型：发明专利发明人：梁兴国,曹娟娟,安然申请号：CN201810748988.8申请日：20180710公开号：CN108913736A公开日：20181130
摘要：本发明涉及一种单链寡核苷酸的制备方法，首先进行PEAR反应，模板为
N’‑X’‑R’‑N’‑X’，R’为能产生3’突出末端的耐高温限制性内切酶的识别位点，N’为切刻内切酶的识别位点，经过高温变性、退火、延伸，得到延伸产物双链
N’‑X’‑R’‑N’‑X’/N‑X‑R‑N‑X；利用能产生3’突出末端的限制性内切酶对双链进行切割，得到片段(N‑X/N’‑X’)；没有被酶切的双链作为模板直接参与下一轮的扩增，而且模板在退火过程中通过滑动作用而继续延伸，串联重复序列增加，目的产物持续指数增长。然后进行切口引物延伸反应，切刻内切酶对PEAR酶切产物中的N‑X链进行切割，产生单链缺口，另外一条单链保持完整，随后聚合酶以缺口为起点进行延伸，切刻内切酶识别位点重新形成；同时通过置换下游的目的单链X，得到游离的单链。
申请人：中国海洋大学
地址：266000 山东省青岛市崂山区松岭路238号
国籍：CN
代理机构：青岛中天汇智知识产权代理有限公司
代理人：袁晓玲
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