专利名称:一种实时荧光定量RT-PCR鉴别猪瘟强毒与疫苗弱
毒的方法
专利类型:发明专利
发明人:沈志强,谢金文,李安,王金良,苗立中申请号:CN201110143039.5申请日:20110530公开号:CN102808040A公开日:20121205
摘要:本发明涉及一种实时荧光定量RT-PCR反应结合熔解曲线分析鉴别猪瘟强毒与疫苗弱毒的方法。设计合成了3条引物,P1/P3可特异性扩增猪瘟病毒强毒株,预期扩增产物为549bp,Tm值为89.5±0.5℃;P2/P3可特异性扩增猪瘟兔化弱毒疫苗株,预期扩增产物为164bp,Tm值为84.5±0.5℃。在最优条件下进行荧光定量RT-PCR反应和复合荧光定量RT-PCR反应,最终成功建立了能够鉴别区分猪瘟野毒与疫苗毒的荧光定量RT-PCR方法。不仅可以根据熔解曲线波峰的多少确定是否有非特异性PCR产物,还可根据波峰峰顶对应的温度进一步确定产物的特异性。本方法可以根据熔解曲线立即判断发病猪是强毒或者弱毒疫苗感染,减少了未感染免疫猪被误杀的可能性,具有很高的科研与临床应用价值。
申请人:山东绿都生物科技有限公司
地址:256600 山东省滨州市黄河二路169号
国籍:CN
代理机构:北京神州华茂知识产权代理有限公司
代理人:吴照幸
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